本文的总体目标是报告应用于通过结扎诱导小鼠种植体周围炎的方案,并通过组织评估和植入物周围的骨质流失来观察其有效性。以下程序在符合所有生物安全和保护标准的手术室中进行。所有程序均在10倍显微放大倍率下进行,并由经过培训和校准的操作员执行。
所有手术均在异氟醚和氧气的吸入麻醉下进行。需要一名助理操作员来稳定动物并保持嘴巴张开。为了防止眼睛受到刺激,在开始拔牙之前使用眼科润滑剂。
对于这种方法,使用18只三周龄的C57BL / 6J雄性小鼠并进行了拔牙,种植体放置和种植体周围炎诱导。拔牙。对于拔牙,在第一和第二磨牙之间引入了 5 颗牙齿探索器以开始抬高和脱位。
接下来,将牙科探查器引入第一磨牙的近中部位。抬高后,使用尖端镊子和缝合钳去除第一磨牙。接下来,在第二磨牙和第三磨牙之间引入牙科探查器,以抬高和脱位第二磨牙。
拔牙后,使用无菌棉尖涂抹器一分钟即可完全止血。提取后,所有动物立即接受止痛药,通过皮下注射给药。此外,在提取后的四个星期内,常规食物被软饮食取代,并口服抗生素,将药物纳入饮用水中。
植入物放置。使用15c刀片,在与先前存在的牙齿相对应的区域的角质化组织中做一个近远端切口。右上颌磨牙是空间参考。
使用 5 牙科探测器抬起颊部和腭部全厚皮瓣,确保完全抬高皮瓣。截骨术使用直径为0.3毫米的硬质合金微型手钻进行,该手钻连接到销钳上,并通过顺时针旋转激活。截骨部位在愈合的拔牙窝中大约一毫米深。
之后,使用顺时针拧紧运动在第一和第二上颌左臼齿区域自行敲击钛植入物,每只动物一个。植入物有四个星期的愈合期,在此期间给小鼠服用抗生素并如前所述喂食。种植体周围炎诱导。
通过在每个固定装置周围放置 6-0 的丝结扎线来诱导种植体周围炎,紧邻种植体头的顶端。结扎维持两周以发展种植体周围炎。每两天检查一次连字,以确保它们仍然存在。
如果缺少,则放置新的结扎。在这段时间之后,所有的动物都被献祭了。收获上颌骨,用光学显微镜拍照,在10%福尔马林中固定24小时,然后储存在70%乙醇中。
通过使用光学显微镜在牺牲后立即拍照来进行临床评估。与对照组相比,种植体周围炎组在种植体周围观察到炎症、口袋形成和软组织水肿增加。未观察到严重临床表型并发症的证据。
结扎放置两周后,在比较非结扎组和结扎组时,通过线性分析观察到的骨高度和通过体积分析观察到的骨质流失量存在显着差异。为了确定细胞变化,将脱钙样品切片并用苏木精和伊红染色。因此,与对照组相比,在种植体周围炎样本中观察到更多的根尖上皮迁移和骨质流失。
观看此视频后,您应该对如何在小鼠模型中诱导种植体周围炎有很好的了解,并确定发现的临床、显微断层扫描和组织学差异。虽然这种方法不能代表种植体周围炎的所有方面,但它对于建立因果关系是必不可少的,它提供了有关组织愈合的信息,并支持了有关骨质流失和种植体周围疾病的研究。