L'obiettivo generale di questo articolo è quello di riportare il protocollo applicato per indurre la perimplantite nei topi mediante legatura e di osservarne l'efficacia attraverso la valutazione dei tessuti e la perdita ossea intorno agli impianti. Le seguenti procedure sono state eseguite in una sala chirurgica conforme a tutti gli standard di biosicurezza e protezione. Tutte le procedure sono state eseguite con un ingrandimento microscopico 10X ed eseguite da operatori addestrati e calibrati.
Tutti gli interventi chirurgici sono stati eseguiti in anestesia inalatoria con isoflurano e ossigeno. È stato necessario un assistente operatore per stabilizzare l'animale e mantenere l'apertura della bocca. Per prevenire l'irritazione degli occhi, è stato utilizzato un lubrificante oftalmico prima di iniziare l'estrazione.
Per questo metodo, sono stati utilizzati 18 topi maschi C57BL/6J di tre settimane che sono stati sottoposti a estrazioni dentali, posizionamento di impianti e induzione di perimplantite. Estrazione dentale. Per le estrazioni dentarie, è stato introdotto un esploratore dentale 5 tra il primo e il secondo molare per avviare l'elevazione e la lussazione.
Successivamente, l'esploratore dentale è stato introdotto nel sito mesiale del primo molare. Dopo l'elevazione, la pinza a punta e la pinza per legare la sutura sono state utilizzate per rimuovere il primo molare. Successivamente, è stato introdotto l'esploratore dentale tra il secondo e il terzo molare per elevare e lussare il secondo molare.
Dopo le estrazioni dentali, l'emostasi completa è stata ottenuta utilizzando un applicatore sterile con punta di cotone per un minuto. Subito dopo l'estrazione, tutti gli animali hanno ricevuto farmaci antidolorifici, somministrati tramite iniezione sottocutanea. Inoltre, per quattro settimane dopo le estrazioni, il cibo normale è stato sostituito da una dieta morbida e l'antibiotico è stato somministrato per via orale, incorporando il farmaco nell'acqua potabile.
Posizionamento dell'impianto. Utilizzando una lama 15c, è stata praticata un'incisione mesiodistale attraverso il tessuto cheratinizzato nell'area corrispondente ai denti precedentemente presenti. I molari mascellari destri erano il riferimento spaziale.
I lembi a tutto spessore vestibolare e palatale sono stati sollevati utilizzando un esploratore dentale a 5, garantendo la completa elevazione del lembo. L'osteotomia è stata eseguita utilizzando un microtrapano manuale in metallo duro di 0,3 millimetri di diametro collegato a una morsa a perno e attivato attraverso la rotazione in senso orario. I siti di osteotomia erano profondi circa un millimetro negli alveoli di estrazione guariti.
Successivamente, gli impianti in titanio, uno per animale, sono stati autofilettati nella regione del primo e del secondo molare mascellare sinistro utilizzando un movimento di avvitamento in senso orario. Gli impianti hanno avuto un periodo di guarigione di quattro settimane, durante il quale ai topi sono stati somministrati antibiotici e nutriti come descritto in precedenza. Induzione della perimplantite.
La perimplantite è stata indotta posizionando una legatura di seta 6-0 attorno a ciascun dispositivo, immediatamente apicale alla testa dell'impianto. Le legature sono state mantenute per due settimane per sviluppare la perimplantite. Le legature sono state controllate ogni due giorni per assicurarsi che fossero ancora presenti.
In caso di mancanza, è stata apposta una nuova legatura. Dopo questo periodo, tutti gli animali venivano sacrificati. Le mascelle sono state prelevate, fotografate al microscopio ottico, fissate in formalina al 10% per 24 ore, quindi conservate in etanolo al 70%.
La valutazione clinica è stata eseguita scattando foto immediatamente dopo i sacrifici utilizzando la microscopia ottica. Rispetto al gruppo di controllo, sono stati osservati infiammazione, formazione di tasche e aumento dell'edema dei tessuti molli intorno all'impianto nel gruppo perimplantite. Non è stata osservata alcuna evidenza di gravi complicanze del fenotipo clinico.
Due settimane dopo il posizionamento della legatura, confrontando i gruppi senza legatura e legatura, sono state osservate differenze significative nell'altezza ossea tramite l'analisi lineare e nel volume di perdita ossea osservato tramite l'analisi volumetrica. Per determinare i cambiamenti cellulari, i campioni decalcificati sono stati sezionati e colorati con ematossilina ed eosina. Di conseguenza, è stata osservata una maggiore migrazione epiteliale apicale e una maggiore perdita ossea nei campioni di perimplantite rispetto al gruppo di controllo.
Dopo aver visto questo video, dovresti avere una buona comprensione di come indurre la perimplantite in un modello murino, oltre a identificare le differenze cliniche, microtomografiche e istologiche riscontrate. Sebbene questa metodica non rappresenti tutti gli aspetti della perimplantite, è indispensabile per stabilire un rapporto di causa ed effetto, fornendo informazioni sulla guarigione dei tessuti e supportando gli studi riguardanti la perdita ossea e la malattia perimplantare.
