O objetivo geral deste artigo é relatar o protocolo aplicado para induzir peri-implantite em camundongos por ligadura e observar sua eficácia através da avaliação tecidual e perda óssea ao redor dos implantes. Os procedimentos a seguir foram realizados em sala cirúrgica, obedecendo a todas as normas de biossegurança e proteção. Todos os procedimentos foram realizados em aumento microscópico de 10X e realizados por operadores treinados e calibrados.
Todas as cirurgias foram realizadas sob anestesia inalatória com isoflurano e oxigênio. Um auxiliar de operação foi necessário para estabilizar o animal e manter a abertura da boca. Para evitar irritação nos olhos, foi utilizado lubrificante oftálmico antes de iniciar a extração.
Para este método, 18 camundongos machos C57BL/6J com três semanas de idade foram utilizados e submetidos a extrações dentárias, colocação de implantes e indução de periimplantite. Extração dentária. Para as extrações dentárias, um explorador dental 5 foi introduzido entre o primeiro e o segundo molar para iniciar a elevação e luxação.
Em seguida, o explorador dentário foi introduzido no sítio mesial do primeiro molar. Após a elevação, a pinça de ponta e a pinça de amarração de sutura foram utilizadas para a remoção do primeiro molar. Em seguida, o explorador dentário foi introduzido entre o segundo e o terceiro molar para elevar e luxar o segundo molar.
Após as extrações dentárias, a hemostasia completa foi obtida com o uso de aplicador estéril com ponta de algodão por um minuto. Imediatamente após a extração, todos os animais receberam medicação para dor, administrada por injeção subcutânea. Além disso, durante quatro semanas após as extrações, a alimentação regular foi substituída por uma dieta branda, e antibiótico foi administrado por via oral, incorporando a medicação à água potável.
Colocação de implantes. Utilizando-se uma lâmina de 15c, uma incisão mesiodistal foi feita através do tecido queratinizado na área correspondente aos dentes previamente presentes. Os molares superiores direitos foram a referência espacial.
Os retalhos vestibular e palatino de espessura total foram elevados com o uso de um explorador dentário 5, garantindo a elevação completa do retalho. A osteotomia foi realizada com microbroca manual de carboneto de 0,3 milímetro de diâmetro, acoplada a uma morsa de pinos e ativada por rotação no sentido horário. Os locais de osteotomia tinham aproximadamente um milímetro de profundidade nos alvéolos de extração cicatrizados.
Em seguida, implantes de titânio, um por animal, foram auto-rosqueados na região do primeiro e segundo molares superiores esquerdos, utilizando-se um movimento de parafusamento no sentido horário. Os implantes tiveram um período de cicatrização de quatro semanas, durante o qual os camundongos receberam antibióticos e foram alimentados conforme descrito anteriormente. Indução de peri-implantite.
A periimplantite foi induzida colocando-se uma ligadura de seda 6-0 ao redor de cada fixação, imediatamente apical à cabeça do implante. As ligaduras foram mantidas por duas semanas para desenvolvimento de peri-implantite. As ligaduras foram verificadas a cada dois dias para certificar-se de que ainda estavam presentes.
Em caso de falta, uma nova ligadura era colocada. Após esse período, todos os animais foram sacrificados. As maxilas foram colhidas, fotografadas em microscópio óptico, fixadas em formalina a 10% por 24 horas e armazenadas em etanol 70%.
A avaliação clínica foi realizada por meio de fotos imediatamente após os sacrifícios, utilizando-se microscopia óptica. Quando comparado ao grupo controle, inflamação, formação de bolsa e aumento do edema de partes moles foram observados ao redor do implante no grupo peri-implantite. Não foram observadas evidências de complicações graves do fenótipo clínico.
Duas semanas após a colocação da ligadura, quando comparados os grupos não ligadura e ligadura, houve diferenças significativas na altura óssea observada pela análise linear e no volume de perda óssea pela análise volumétrica. Para determinar as alterações celulares, amostras descalcificadas foram seccionadas e coradas com hematoxilina e eosina. Como resultado, observou-se maior migração epitelial apical e perda óssea nas amostras peri-implantite quando comparadas ao grupo controle.
Depois de assistir a este vídeo, você deve ter uma boa compreensão sobre como induzir peri-implantite em um modelo de camundongos, bem como identificar as diferenças clínicas, microtomográficas e histológicas encontradas. Embora este método não represente todos os aspectos peri-implantites, é indispensável para o estabelecimento de uma relação de causa e efeito, fornecendo informações sobre a cicatrização tecidual e subsidiando estudos sobre perda óssea e doença peri-implantar.
