Общая цель этой статьи состоит в том, чтобы описать протокол, применяемый для индуцирования периимплантита у мышей с помощью лигатуры, и наблюдать его эффективность путем оценки тканей и потери костной массы вокруг имплантатов. Следующие процедуры были выполнены в операционном зале с соблюдением всех норм биобезопасности и защиты. Все процедуры выполнялись под 10-кратным микроскопическим увеличением и выполнялись обученными и откалиброванными операторами.
Все операции проводились под ингаляционной анестезией изофлураном и кислородом. Понадобился помощник оператора, чтобы стабилизировать животное и поддерживать открытость рта. Для предотвращения раздражения глаз перед началом экстракции использовали офтальмологическую смазку.
Для этого метода были использованы 18 трехнедельных самцов мышей C57BL/6J, которым было проведено удаление зубов, установка имплантата и индукция периимплантита. Удаление зубов. Для удаления зубов между первым и вторым моляром был введен 5 зубной эксплорер, чтобы начать подъем и вывих.
Затем зубной проводник был введен в мезиальный участок первого моляра. После подъема для удаления первого моляра использовали щипцы на кончике и щипцы для завязывания швов. Затем между вторым и третьим моляром был введен зубной проводник для поднятия и вывиха второго моляра.
После удаления зубов полный гемостаз достигался с помощью стерильного аппликатора с ватным наконечником в течение одной минуты. Сразу после извлечения все животные получали обезболивающие препараты, вводимые путем подкожной инъекции. Кроме того, в течение четырех недель после экстракции обычная пища была заменена мягкой диетой, а антибиотик вводился перорально, включая лекарство в питьевую воду.
Установка имплантата. С помощью лезвия 15c был сделан мезиодистальный разрез через ороговевшую ткань в области, соответствующей ранее присутствующим зубам. Правые верхнечелюстные моляры были пространственным ориентиром.
Щечные и нёбные лоскуты на всю толщину были подняты с помощью 5 стоматологических эксплореров, что обеспечило полное поднятие лоскута. Остеотомия проводилась с помощью твердосплавной ручной дрели диаметром 0,3 мм, прикрепленной к штифтовым тискам и активируемой вращением по часовой стрелке. Места остеотомии находились примерно на один миллиметр вглубь заживших лунок удаления.
После этого титановые имплантаты, по одному на животное, были самопостукивающими движениями в области первого и второго левых моляров верхней челюсти с помощью винтового движения по часовой стрелке. Имплантаты имели четырехнедельный период заживления, в течение которого мышам давали антибиотики и кормили, как описано выше. Индукция периимплантита.
Периимплантит был индуцирован размещением шелковой лигатуры 6-0 вокруг каждого приспособления, непосредственно апикально к головке имплантата. Лигатуры поддерживались в течение двух недель для развития периимплантита. Лигатуры проверялись каждые два дня, чтобы убедиться, что они все еще присутствуют.
Если отсутствовала, ставилась новая лигатура. По истечении этого срока все животные были принесены в жертву. Верхние челюсти собирали, фотографировали с помощью оптического микроскопа, фиксировали в 10%-ном формалине в течение 24 часов, а затем хранили в 70%-ном этаноле.
Клиническая оценка проводилась путем получения снимков сразу после жертвоприношения с помощью оптической микроскопии. По сравнению с контрольной группой, в группе периимплантита наблюдалось воспаление, образование карманов и повышенный отек мягких тканей вокруг имплантата. Признаков тяжелых клинических фенотипических осложнений не наблюдалось.
Через две недели после установки лигатуры при сравнении нелигатурных и лигатурных групп наблюдались значительные различия в высоте костной ткани, наблюдаемой с помощью линейного анализа, и объеме потери костной массы, наблюдаемой при объемном анализе. Для определения клеточных изменений декальцинированные образцы срезали и окрашивали гематоксилином и эозином. В результате наблюдалась большая миграция апикального эпителия и потеря костной массы в образцах периимплантита по сравнению с контрольной группой.
После просмотра этого видео у вас должно быть хорошее представление о том, как индуцировать периимплантит на мышиной модели, а также выявить обнаруженные клинические, микротомографические и гистологические различия. Несмотря на то, что этот метод не охватывает все аспекты периимплантита, он необходим для установления причинно-следственной связи, предоставляя информацию о заживлении тканей и поддерживая исследования, касающиеся потери костной массы и периимплантных заболеваний.
