Ein neonatales BALB/c-Mausmodell der nekrotisierenden Enterokolitis

Zusammenfassung

Nekrotisierende Enterokolitis (NEC) ist die schwerste gastrointestinale (GI) Erkrankung, die häufig bei Frühgeborenen auftritt, insbesondere bei Säuglingen mit sehr niedrigem Geburtsgewicht, mit hoher Mortalität und unklarer Pathogenese. Die Ursache von NEC kann mit entzündlichen Anomalien des Immunregulationssystems zusammenhängen. Ein NEC-Tiermodell ist ein unverzichtbares Werkzeug für die Immunforschung von NEC-Erkrankungen. NEC-Tiermodelle verwenden normalerweise C57BL/6J-Neugeborenenmäuse; BALB/c neonatale Mäuse werden selten verwendet. Verwandte Studien haben gezeigt, dass bei einer Infektion von Mäusen die Th2-Zelldifferenzierung bei BALB/c-Mäusen im Vergleich zu C57BL/6J-Mäusen vorherrscht. Studien haben gezeigt, dass das Auftreten und die Entwicklung von NEC mit einem Anstieg der T-Helfer-Typ-2-Zellen (Th2) verbunden sind und im Allgemeinen von einer Infektion begleitet werden. Daher verwendete diese Studie neonatale BALB/c-Mäuse, um ein NEC-Modell mit ähnlichen klinischen Merkmalen und intestinalen pathologischen Veränderungen zu induzieren, wie sie bei Kindern mit NEC beobachtet wurden. Weitere Studien sind gerechtfertigt, um festzustellen, ob dieses Tiermodell verwendet werden könnte, um Th2-Zellantworten in NEC zu untersuchen.

Zusammenfassung

Nekrotisierende Enterokolitis (NEC) ist die schwerste gastrointestinale (GI) Erkrankung, die häufig bei Frühgeborenen auftritt, insbesondere bei Säuglingen mit sehr niedrigem Geburtsgewicht, mit hoher Mortalität und unklarer Pathogenese. Die Ursache von NEC kann mit entzündlichen Anomalien des Immunregulationssystems zusammenhängen. Ein NEC-Tiermodell ist ein unverzichtbares Werkzeug für die Immunforschung von NEC-Erkrankungen. NEC-Tiermodelle verwenden normalerweise C57BL/6J-Neugeborenenmäuse; BALB/c neonatale Mäuse werden selten verwendet. Verwandte Studien haben gezeigt, dass bei einer Infektion von Mäusen die Th2-Zelldifferenzierung bei BALB/c-Mäusen im Vergleich zu C57BL/6J-Mäusen vorherrscht. Studien haben gezeigt, dass das Auftreten und die Entwicklung von NEC mit einem Anstieg der T-Helfer-Typ-2-Zellen (Th2) verbunden sind und im Allgemeinen von einer Infektion begleitet werden. Daher verwendete diese Studie neonatale BALB/c-Mäuse, um ein NEC-Modell mit ähnlichen klinischen Merkmalen und intestinalen pathologischen Veränderungen zu induzieren, wie sie bei Kindern mit NEC beobachtet wurden. Weitere Studien sind gerechtfertigt, um festzustellen, ob dieses Tiermodell verwendet werden könnte, um Th2-Zellantworten in NEC zu untersuchen.

Einleitung

Nekrotisierende Enterokolitis (NEC), die schwerste gastrointestinale (GI) Erkrankung, tritt bei den meisten Frühgeborenen (>90%) auf, insbesondere bei Solchen mit sehr niedrigem Geburtsgewicht (VLBW)¹. Bei VLBW-Säuglingen liegt die Inzidenz der Krankheit zwischen 10% und 12%, und die Mortalität von Kindern, bei denen NEC diagnostiziert wurde, liegt zwischen 20% und 30% ^2,3. Die Ursache von NEC kann mit Schleimhautverletzungen, dem Eindringen pathogener Bakterien und der Darmfütterung zusammenhängen, die bei anfälligen Wirten zu Entzündungsreaktionen und der Induktion von Darmverletzunge....

Protokoll

Diese Forschung wurde vom Medical Ethics Committee des Guangzhou Women and Children's Medical Center (Nr. 174A01) und dem Animal Ethical Committee des Guangzhou Forevergen Biosciences Laboratory Animal Center (IACUC-G160100) genehmigt. Alle Tiere wurden im selben Raum in einer spezifischen pathogenfreien Umgebung (SPF) gezüchtet und Experimente wurden in einer konventionellen Umgebung durchgeführt. Die zur Zucht verwendeten Mäuse waren 7-8 Wochen alt; die Mäuse zur Induktion von NEC (n = 72) wurden am Tag 4 vom Muttertier getrennt, und die Muttertiere(n=14) wurden im ursprünglichen Käfig gehalten und die Mäuse der Kontrollgruppe (Fortsetzung) (n=24) gepflegt.

Ergebnisse

Das BALB/c-Maus-NEC-Modell wurde durch Formelfütterung, LPS-Fütterung, Hypoxie und Kältestimulation induziert. Während der Induktionsphase wurden die Mäuse auf Darmpathologie, Stuhlmerkmale, Körpergewichtsveränderungen und tägliches Überleben beobachtet. Repräsentative Bilder des Dünndarms während der NEC-Induktion; Die Zahlen im Bild stellen den Darmpathologie-Score von 0 (normales Epithel) bis 4 (am schwersten) dar (Abbildung 3A). Der intestinale Pathologie-Score war in der NEC.......

Diskussion

NEC ist der häufigste Notfall im Magen-Darm-System für Neugeborene mit einer hohen Inzidenz und Mortalität, insbesondere bei Frühgeborenen1,2,3. Seine Pathogenese ist jedoch noch unklar. Es wird derzeit angenommen, dass Schleimhautschäden, Erregerinvasion und enterale Fütterung Hochrisikofaktoren für ^NEC3 sind. Bis heute sind die Tiere, die für das NEC-Modell verwendet werden, hauptsächlich Schwe.......

Materialien

Name	Company	Catalog Number	Comments
Absolute ethanol	Sinopharm Chemical Reagent Co., LTD.	100092683
Goat Milk powder	Petag	71795558417
HE dye solution	Sinopharm Chemical Reagent Co., LTD.	G1003
Isoflurane	RWD, Shenzhen Reward Life Technology Co., LTD.	R510
LPS	Sigma-Adrich	L2880
Medical oxygen	various	various
Microscope	NIKON	NIKON imaging system (DS-Ri2)
Neutral resin	Sinopharm Chemical Reagent Co., LTD.	10004160
Paraffin	various	various
Premature baby milk powder	Abbott	57430
Xylene	Sinopharm Chemical Reagent Co., LTD.	10023418
1% Hydrochloric acid	various	various
10% Formalin	LEAGENE	DF0110