Blutentnahme durch subklavische Venenpunktion bei Mäusen. Die Blutprobenentnahme von Mäusen ist in den meisten Forschungslabors unerlässlich. Die herkömmlichen Ansätze für die Blutentnahme bei Mäusen sind Schwanzschneiden, wenn weniger als 100 Mikroliter Proben benötigt werden.
Wenn jedoch mehr als 100 Mikroliter Blut zu einem nicht-terminalen Zeitpunkt benötigt werden, sind retroorbitale, submandibuläre Blutungen oder submentale Blutentnahme die am häufigsten in Betracht gezogenen Techniken. An einigen Stellen wurden die Jugularvenenschnitt oder Katheterisierung als alternative Methoden angenommen. Dennoch sind die oben genannten Methoden für Mäuse verletzend.
Auf der Grundlage unserer formalen Forschungen führen wir hier eine neue wirtschaftliche und schonende Strategie für die Blutentnahme aus subklavischer Vene bei Mäusen ein. Die Sicherheit und Machbarkeit, und erhaltene Blutvolumen mit dieser Technik, werden vorgestellt und diskutiert. Nach der Vollnarkose, legen Sie die Maus in supine Position.
Reinigen Sie den Infraklavenraum mit 75% Ethanol. Bestätigen Sie das Schlüsselbein und die suprasternale Fossae vor der Punktion. Identifizieren Sie die Punktionsstelle in der Mitte des Schlüsselbeins.
Bewegen Sie die Nadeln überlegen und nach oben in Richtung der suprasternalen Fossae, nur nachträbe zum Schlüsselbein. Nachdem Sie drei bis vier Millimeter nach vorne bewegt haben, halten Sie den Unterdruck in der Spritze und ziehen Sie die Nadel langsam zurück. Blut wird während des Entzugs in die Spritze abfließen.
Nach der Blutentnahme die Punktionsstelle ein bis zwei Minuten lang weich drücken, um die Blutung zu stoppen. Bereiten Sie benötigte Materialien vor, einschließlich 75% Ethanol, Klebeband, Epiliermittel, Tuben, 1,0 Milliliter Spritze, die mit Nadel, elektronischer Waage, Heparin und Saline verbunden sind. Nach zufriedenstellender Vollnarkose, legen Sie die Maus auf den Operationstisch in Supine-Position, und zwei bis vier Zentimeter vom Rand des Tisches entfernt, um Venenpunktion zu erleichtern.
Befestigen Sie die Gliedmaßen in einer bequemen Position, wie in Abbildung 2 dargestellt. Im gesamten Verfahren war keine Intubation oder mechanische Belüftung erforderlich. Epilierendes Mittel um den Infraclavularraum mit Wattestäbchen auftragen.
Drei Minuten später das Epilatierungsmittel mit nassem Wattestäbchen waschen, um das Fell und sichtbaren Schmutz zu entfernen. Sterilisieren Sie den infraclavicularen Raum mit 75% Ethanol, und dann mit sauberer Gaze trocknen. Identifizieren Sie die Position von Schlüsselbein und suprasternalen Fossae mit einem Finger.
Suchen Sie die Punktionsstelle, in der Nähe der Mitte des Schlüsselbeins, und gefangen auf sie. Setzen Sie den linken Zeigefinger seitlich an die Punktionsstelle, um die Haut und das Unterhautgewebe zu fixieren. Bewegen Sie die Nadel nach oben in einer Schädellag in Richtung der suprasternalen Fossae.
Sobald die Nadel in das Unterhautgewebe gelangt, muss sich der Ringfinger der rechten Hand rückwärts bewegen, um unterdruck zu sein. Bewegen Sie die Spritze für drei bis vier Millimeter vorwärts, aber stoppen Sie, wenn kein Blutabfluss in die Spritze vorhanden ist. Ziehen Sie dann langsam die Spritze zurück und halten Sie den Unterdruck darin.
In den meisten Fällen gelangt das Blut im Verlauf des Zurückziehens in die Spritze. Sobald das Blut in die Spritze gelangt, fixieren Sie die Spritze und halten Sie den Unterdruck, bis das erforderliche Blutvolumen in der Spritze entnommen ist. Nach der Blutentnahme ziehen Sie die Punktionsnadel zurück und drücken Sie die Punktionsstelle mit Wattestäbchen ein bis zwei Minuten lang leicht, um die Blutung zu stoppen, und schicken Sie dann Mäuse zurück in die Käfige.
Übertragen Sie die Blutprobe in unsere Heparin-Röhre. Wir wiederholten dieses Verfahren bei 10 Quimi-Mäusen. Neun Verfahren waren auf der rechten Seite erfolgreich.
Ein Fall scheiterte innerhalb von drei Versuchen auf der rechten Seite, und die Blutentnahme gelang auf der linken Seite. Der Zeitverlauf lag zwischen 35 und 126 Sekunden. Das Blutentnahmevolumen wurde auf rund 200 Mikroliter festgelegt.
Die Blutentnahme gelang mit einem bis vier Versuchen. Die Blutentnahme war beim ersten Versuch bei zwei Mäusen und bei vier Versuchen mit einer Maus bei zwei bis drei Versuchen bei anderen Mäusen erfolgreich. Alle Daten sind in Tabelle 1 dargestellt.
Alle Tiere überlebten und erholten sich innerhalb von 30 Minuten nach der Blutentnahme. Es gab keinen signifikanten Unterschied zwischen Geschlecht für alle beobachteten Parameter. Zusammenfassend ist die subklavische Venenpunktion eine sichere und wirksame Methode zur Blutentnahme bei Mäusen.
Neben dem Schwanzvenenschneiden und der retroorbitalen Plexusblutentnahme ist diese Methode machbar und eignet sich für Beobachtungsforschungen an mehreren Zeitpunkten bei Mäusen.
