Dieses Protokoll wurde entwickelt, um Dosimetriemessungen so nahe wie möglich an realen Zellbestrahlungsbedingungen für radiobiologische Studien durchführen zu können. Mit diesem Protokoll können wir die genaue Dosis bestimmen, die zellen erhalten, so dass sie für viele Röntgeneinrichtungen anwendbar ist, und alle Parameter berücksichtigen und in Dosimetrie übersetzen. Alle Bestrahlungsparameter müssen vorgelagert eingerichtet werden, um eine optimale Erfassung der Dosimetriemessung zu ermöglichen, die eine enge Zusammenarbeit zwischen Physikern und Radiobiologen erfordert.
Um eine Bestrahlungsfeldauswertung durchzuführen, legen Sie einen sich selbst entwickelnden Dosimetriefilm auf die unterstützungsmittelartige Bestrahlung und bestrahlen Sie den Film mit mindestens zwei Grautönen, um ein gut markiertes Bestrahlungsfeld zu erhalten. Scannen Sie den sich selbst entwickelnden Dosimetriefilm mit einem speziellen Scanner und verwenden Sie das Analyse- und Plotprofil, um das Dosisprofil in ImageJ zu zeichnen. Markieren Sie dann die Bestrahlungsunterstützungsfläche, um sicherzustellen, dass der Zellbehälter in die richtige Position gebracht wird.
Um eine Dosismessung durchzuführen, legen Sie einen modifizierten Zellbehälter in das Bestrahlungsunterstützungsgehäuse und legen Sie die Ionisationskammer entsprechend den auf der Trägerfläche gemachten Markierungen in den Behälter. Bestätigen Sie, dass alle Bestrahlungsparameter entsprechend eingestellt wurden und die Ionisationskammer fünf Minuten lang vorbestrahlung. Null das Elektrometer und erhalten 10 Ein-Minuten-Messungen.
Verwenden Sie dann die Formel, um die durchschnittliche Dosisrate in Luftkerma zu bestimmen. Nummerierung aller Filme für ihre nachgelagerte Identifizierung. Mindestens 24 Stunden vor der Bestrahlung, schneiden Sie Stücke der sich selbst entwickelnden Dosimetriefolie entsprechend der Größe des Zellbehälters.
Um eine Kalibrierkurve zu konstruieren, legen Sie drei Filmstücke für die nicht bestrahlten Steuerungen beiseite und legen Sie den ersten Film in den Zellbehälter. Bestrahlen Sie dann den Film, um den ersten Dosispunkt zu erhalten. Wenn alle Filme in dreifacher Ausfertigung mit den entsprechenden gewählten Dosen bestrahlt wurden, kann eine Kalibrierkurve erzeugt werden.
Um die ZellkulturmediumDämpfung und Streuung zu messen, wählen Sie die gleiche Bestrahlungszeit für alle Bestrahlungen und bestrahlen drei Stücke sich selbst entwickelnder Dosimetriefilme im Behälter ohne Wasser. Als nächstes legen Sie ein einzelnes Stück Folie in den Behälter und füllen Sie den Behälter mit dem gleichen Volumen wasser wie das Volumen des Mediums, das bestrahlt wird. Positionieren Sie den Behälter bei Bedarf mit kleinen Klebestücken innerhalb des Gehäuses.
Wenn die Bestrahlung abgeschlossen ist, trocknen Sie die Folien mit saugfähigem Papier und lagern Sie die Lichtschutzfolien. 24 Stunden nach der Bestrahlung, auf dem Scanner, stellen Sie das TIFF-Format auf 48-Bit-Rot-Grün-Blau und den Übertragungsmodus auf 150 Punkte pro Zoll und wählen Sie keine Bildkorrektur. Um den Scanner aufzuwärmen, legen Sie einen nicht bestrahlten Film auf den Scanner und starten Sie eine Vorschau des Scans.
Starten Sie am Ende der Vorschau einen Timer und warten Sie 30 Sekunden, bevor Sie den Scan starten. Starten Sie am Ende des Scans einen 90-Sekunden-Timer. Registrieren Sie gleichzeitig den Scan und öffnen Sie das Bild in ImageJ.
Verfolgen Sie innerhalb des Scans einen quadratischen Bereich, der von Interesse ist, und messen Sie den durchschnittlichen roten Pixelpegel des Bereichs. Wiederholen Sie am Ende der 90 Sekunden die Scanvorschau mindestens 30 Mal, um den Scanner aufzuwärmen und zu stabilisieren. Sobald der Scanner stabilisiert ist, legen Sie einen Film in die Mitte des Scannerbetts und starten Sie eine Vorschau des Scans.
Warten Sie 30 Sekunden, bevor Sie den Scan starten. Warten Sie am Ende des Scans 90 Sekunden, bevor Sie den nächsten Scan starten. Anschließend wurden Messungen zur Schätzung der Dämpfungsdicke durchgeführt und die verschiedenen Dämpfungsdicken getestet, um die Dicke zu ermitteln, die die Strahlintensität um den Faktor zwei verringerte.
Bei der Ermitteltur dieser Dicke wurden fünf Messungen durchgeführt, um den durchschnittlichen mRAW-Wert zu bewerten, der durch den Temperatur- und Druckkorrekturfaktor korrigiert wurde. Für diese Konfiguration wurde eine Halbwertschicht von 0,667 Millimeter Kupfer gefunden. In dieser repräsentativen Analyse wurde ein sich selbst entwickelnder Dosimetriefilm bestrahlt, um die Oberfläche zu bestimmen, auf der das Bestrahlungsfeld homogen ist, was eine korrekte Platzierung des Zellbehälters ermöglicht.
Um die genaue Dosis für die Zellen zu bestimmen, wurde die gemessene Luftkerma-Dosisrate in Wasserkarma unter Verwendung des Verhältnisses des mittleren Massenenergieaufnahmekoeffizienten für Wasser zu Luft umgewandelt, der über das Photonenflenspektrum ausgewertet wurde, das für diese Analyse auf 0,659 Grautöne pro Minute geschätzt wurde. In dieser Zellkultur-Medium-Dämpfungs- und Streuanalyse wurden die sich selbst entwickelnden dositry-Radiochromfilme zunächst zwischen Null und drei Graustufen mit 0,25 grauen Schritten zwischen Null und einem grauen und 0,5 grauen Schritten zwischen einem und drei Graustufen kalibriert. Die Dosispunkte wurden dann mit einer Polynomkurve vierten Grades versehen.
Hier kann eine repräsentative Tabelle für die tägliche Messung beobachtet werden. Stellen Sie sicher, dass alle Konfigurationsparameter eingehalten werden, dass die Does-Rate im rechten Zellencontainer gemessen wird und dass der Einfluss des Zellkulturmediums ausgewertet wird. Es gibt mehrere Protokolle, um eine Dosisreferenzmessung festzulegen.
Der schlüsselfertige Punkt besteht darin, das geeignete Protokoll für eine bestimmte Anwendung auszuwählen, insbesondere bei Verwendung von Röntgeneinrichtungen mit geringem Röntgenbedarf.
