Diese Arbeit wurde finanziell unterstützt von der National Natural Science Foundation of China (82204088, 82273669) und der Natural Science Foundation of Shandong Province, China (ZR2021QH209).

Wir verwendeten männliche C57BL/6J-Mäuse (Alter: 6-8 Wochen; Gewicht: 20-22 g) für alle Verhaltenstests. Die Mäuse wurden konstanten Bedingungen ausgesetzt (d.h. Temperatur, 23 ± 1 °C; Luftfeuchtigkeit: 55 % ± 5 % und 12/12 h Hell-Dunkel-Zyklus mit eingeschaltetem Licht um 7:00 Uhr). Alle Verhaltenstests wurden zwischen 10:00 und 17:00 Uhr durchgeführt. Alle Tierversuche wurden von der Ethikkommission der Fachkommission für Tierversuche der Universität Qingdao genehmigt. Nach einer 1-wöchigen Eingewöhnungsphase wurden alle Mäuse inhalierbaren Umweltschadstoffen ausgesetzt.
1. Exposition gegenüber Schadstoffen
<ol><li>Intranasale Verabreichung durch Instillation<ol><li>Inhalierbare Umweltschadstoffe in einer 0,9%igen Kochsalzlösung auflösen. Verwenden Sie einmal 5%ige Zinksulfatlösung, die nachweislich Riechstörungen verursacht17. Bei Kontrollmäusen ist 0,9 % ige normale Kochsalzlösung zu verabreichen.</li>
		<li>Anästhesieren Sie die Maus durch intraperitoneale Injektion von 1% Natrium-Pentobarbital18 und beurteilen Sie die Narkosetiefe mit dem Zehenkneifreflex. Tragen Sie Tiersalbe auf die Augen der Maus auf, um Trockenheit zu verhindern. Positionieren Sie die Maus auf dem Rücken auf einer geneigten Fläche, mit dem Kopf nach unten.</li>
		<li>Verabreichen Sie mit einer Pipettierpistole 10 μl der Lösung in ein Nasenloch der Maus, so dass die Lösung auf natürliche Weise in die Nasenhöhle eingeatmet werden kann.</li>
		<li>Um das Wohlbefinden der Maus zu gewährleisten und mögliche Beschwerden zu vermeiden, wiederholen Sie die Inhalation für das andere Nasenloch nach einem Intervall von 10 Minuten.</li>
		<li>3 Tage nach der intranasalen Verabreichung durch Instillation bei Mäusen ist der Test auf vergrabene Lebensmittel durchzuführen.</li>
	</ol></li>
</ol>2. Test auf vergrabene Lebensmittel
<ol><li>Führen Sie 18-24 Stunden vor dem Test einen Futterentzug durch, indem Sie alle Futterpellets aus dem Futterbehälter des Heimkäfigs entfernen. Wechseln Sie das Einstreumaterial für Mäuse. Entfernen Sie die Wasserflasche nicht.</li>
	<li>Ordnen Sie den Operationstisch wie unten beschrieben an.<ol><li>1 Stunde vor Beginn des Tests ist der Käfig mit den Mäusen zum Ausruhen in den Operationssaal zu bringen.</li>
		<li>Richten Sie den Operationssaal während dieser Zeit ein. Verwenden und kennzeichnen Sie transparente PVC-Standard-Mäusekäfige mit A, da diese eine vertraute Umgebung bilden. Verwenden und markieren Sie den Testkäfig als B, bei dem es sich um einen transparenten PVC-Standard-Käfig handelt. Markieren Sie den gemeinsamen Käfig, in dem die Mäuse nach dem Experiment platziert wurden, als Käfig C.</li>
		<li>Decken Sie die Käfige A und B mit 3 cm Einstreu ab und messen Sie diese mit einem Lineal ab. Ordnen Sie die Käfige nebeneinander an, mit einem Abstand von 0,5 m zwischen den einzelnen Käfigen (Abbildung 1).</li>
		<li>Definieren Sie den Versuchsbereich als einen Bereich mit einem Radius von 2 m, wobei der Mittelpunkt der Mittelpunkt der Käfige ist. Definieren Sie den Bereich außerhalb des Bereichs von 2 m als Beobachtungsbereich.</li>
		<li>Halten Sie Käfig C und Käfige mit ungetesteten Mäusen so weit wie möglich vom Versuchsbereich entfernt.</li>
	</ol></li>
	<li>Notieren Sie die Zeit, um Nahrung zu finden, wie unten beschrieben.<ol><li>Wählen Sie eine zufällige Position in Käfig B, vergraben Sie das Futter 1 cm unter der Oberfläche der Einstreu und glätten Sie die Oberfläche der Einstreu.</li>
		<li>Setzen Sie die Maus für 4 Minuten in Käfig A. Bringen Sie die Mäuse am Ende der Zeitmessung in Käfig B, schalten Sie das Videogerät ein und kehren Sie in den Beobachtungsbereich zurück.</li>
		<li>Wenn die Maus den Nahrungsblock mit der Vorderpfote aufnimmt, stoppt sie die Videoaufnahme. In einigen Fällen kann man Mäuse sehen, die mit dem Kopf über das Futter gebeugt fressen. Auch dieses Verhalten deutet auf einen Versuchserfolg hin, auch wenn die Maus das Futter nicht mit der Vorderpfote hält.</li>
		<li>Daten aufzeichnen. Notieren Sie die Zeit vom Kontakt mit der Matte am Boden von Käfig B bis zur Nahrungssuche für jede Maus. Wenn die Mäuse nach 4 min kein Futter finden, notieren Sie die Fundzeit als Verzögerungszeit von 240 s.</li>
		<li>Setzen Sie die Maus nach dem Test in Käfig C ein.</li>
		<li>Nehmen Sie das Futter aus Käfig B und geben Sie es in einen versiegelten Beutel. Setzen Sie das Futter in Käfig B zurück und testen Sie die nächste Maus nach dem Wechsel des Einstreumaterials, wie unten beschrieben.<ol><li>Bei Mäusen, die im selben Käfig gehalten sind, testen Sie mit dem gleichen Satz Einstreumaterialien in Käfig B. Bei Mäusen in verschiedenen Käfigen reinigen Sie den Käfig mit Alkohol und ersetzen Sie das Einstreumaterial.</li>
		</ol></li>
		<li>Geben Sie den Mäusen nach dem Experiment Futter und Wasser. Führen Sie das Experiment zur sozialen Geruchsunterscheidung 1 Tag später durch. HINWEIS: Während des gesamten Prozesses müssen Masken getragen werden, und durchsichtige Handschuhe müssen nach Beendigung des Experiments mit jeder Maus gewechselt werden, um Geruchsvermischung so weit wie möglich zu vermeiden. Halten Sie die Amplitude der Bewegungen so klein wie möglich, um Stress für die Maus zu vermeiden.</li>
	</ol></li>
</ol>3. Experiment zur Unterscheidung von Gerüchen in sozialer Atmosphäre
<ol><li>Sammlung von Urin<ol><li>Der Urin von geschlechtsreifen männlichen und weiblichen Mäusen wird getrennt gesammelt und in gleichen Volumina in Röhrchen aliquotiert19. In 2 mL Mikrozentrifugenröhrchen mit 300 μl Urin in jedem Röhrchen verpacken.</li>
		<li>Lagern Sie die Proben bis zur Verwendung bei -80°C. Schütteln Sie die Röhrchen, um die Probe nach dem Auftauen gleichmäßig zu verteilen. Tauen Sie die Probe nicht wiederholt auf und frieren Sie sie nicht ein.</li>
	</ol></li>
	<li>Ordnen Sie den Operationstisch wie unten beschrieben an.<ol><li>1 Stunde vor Beginn des Tests ist der Käfig mit den Mäusen zum Ausruhen in den Operationssaal zu bringen.</li>
		<li>Richten Sie den Operationssaal während dieser Zeit wie in den Schritten 2.2.2 bis 2.2.5 beschrieben ein.</li>
	</ol></li>
	<li>Notieren Sie die Zeit, um Urin zu finden, wie unten beschrieben.<ol><li>Machen Sie mit Klebeband eine Rille um jede der beiden breiten Seiten des Käfigs B, die groß genug ist, um das Mikrozentrifugenröhrchen mit 300 μl männlichem und weiblichem Urin aufzunehmen. Platzieren Sie die Schläuche und halten Sie die beiden Röhrenabdeckungen vorerst geschlossen.</li>
		<li>Setzen Sie die Maus in Käfig A und stellen Sie einen Countdown von 4 Minuten ein. Öffnen Sie die beiden Röhrchen von Käfig B am Ende der Zeit.</li>
		<li>Bringen Sie die Maus in die mittlere Position von Käfig B, im gleichen Abstand zu den beiden Röhren, schalten Sie dann das Videoaufzeichnungsgerät ein und ziehen Sie sich sanft und langsam in den Beobachtungsbereich zurück.</li>
		<li>Wenn die Maus an der Röhrenwand/dem Mund oder sogar im Inneren der Röhre schnüffelt, wird die Röhre erfolgreich gerochen. Drücken Sie zu diesem Zeitpunkt die Stoppuhr und notieren Sie die Zeit als Zeit des Riechens an der Röhre (M s), und fahren Sie dann mit der Aufzeichnung der Verweilzeit (X s) fort, bis sich die Maus von der Röhre entfernt.</li>
		<li>Fahren Sie mit der Zeitmessung fort, indem Sie an der anderen Röhre schnüffeln. Wenn die Maus an der Röhrenwand/dem Mund oder sogar im Inneren der Röhre schnüffelt, wird die Röhre erfolgreich gerochen. Drücken Sie die Stoppuhr und notieren Sie die Zeit, die es benötigt hat, um an der anderen Röhre zu riechen (N s), und fahren Sie dann mit der Aufzeichnung der Verweilzeit (Y s) fort, bis sich die Maus von der Röhre entfernt.</li>
		<li>Übertragen Sie die Maus am Ende des Experiments in Käfig C.</li>
		<li>Wechseln Sie die Urinschläuche und das Einstreumaterial von Käfig B nach jedem Maustest. Geben Sie den gebrauchten Rattenurin je nach Geschlecht in einen sauberen Beutel.</li>
		<li>Wechseln Sie die Handschuhe und testen Sie die nächste Maus wie oben beschrieben.</li>
	</ol></li>
	<li>Führen Sie das Experiment in einem Labor ohne offensichtlichen Geruch durch. Vermeiden Sie persönliche Produkte, die starke Gerüche abgeben. Tragen Sie während des gesamten Eingriffs Handschuhe und Masken, um Gerüche so weit wie möglich zu vermeiden. Halten Sie die Amplitude der Bewegungen so klein wie möglich, um Stress für die Maus zu vermeiden.</li>
</ol>

Beurteilung der Geruchsbeeinträchtigung bei Mäusen durch eingeatmete Umweltschadstoffe

<ol>
	<li>Sch&#228;fer, L., Schriever, V. A., Croy, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+olfactory+dysfunction:+causes+and+consequences.">Human olfactory dysfunction: causes and consequences.</a> Cell Tissue Res. 383 (1), 569-579 (2021).</li><li>Keller, A., Malaspina, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hidden+consequences+of+olfactory+dysfunction:+a+patient+report+series.">Hidden consequences of olfactory dysfunction: a patient report series.</a> BMC Ear Nose Throat Disord. 13 (1), 8 (2013).</li><li>Schroeter, J. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Application+of+physiological+computational+fluid+dynamics+models+to+predict+interspecies+nasal+dosimetry+of+inhaled+acrolein.">Application of physiological computational fluid dynamics models to predict interspecies nasal dosimetry of inhaled acrolein.</a> Inhal Toxicol. 20 (3), 227-243 (2008).</li><li>Schroeter, J. D., Garcia, G. J., Kimbell, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+computational+fluid+dynamics+approach+to+assess+interhuman+variability+in+hydrogen+sulfide+nasal+dosimetry.">A computational fluid dynamics approach to assess interhuman variability in hydrogen sulfide nasal dosimetry.</a> Inhal Toxicol. 22 (4), 277-286 (2010).</li><li>Keyhani, K., Scherer, P. W., Mozell, M. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Numerical+simulation+of+airflow+in+the+human+nasal+cavity.">Numerical simulation of airflow in the human nasal cavity.</a> J Biomech Eng. 117 (4), 429-441 (1995).</li><li>Hahn, I., Scherer, P. W., Mozell, M. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Velocity+profiles+measured+for+airflow+through+a+large-scale+model+of+the+human+nasal+cavity.">Velocity profiles measured for airflow through a large-scale model of the human nasal cavity.</a> J Appl Physiol. 75 (5), 2273-2287 (1993).</li><li>Zhang, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Exposure+to+particulate+matter+air+pollution+and+Anosmia.">Exposure to particulate matter air pollution and Anosmia.</a> JAMA Netw Open. 4 (5), e2111606 (2021).</li><li>Ekstr&#246;m, I. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Environmental+air+pollution+and+olfactory+decline+in+aging.">Environmental air pollution and olfactory decline in aging.</a> Environ Health Perspect. 130 (2), 27005 (2022).</li><li>Adams, D. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nitrogen+dioxide+pollution+exposure+is+associated+with+olfactory+dysfunction+in+older+U.S.+adults.">Nitrogen dioxide pollution exposure is associated with olfactory dysfunction in older U.S. adults.</a> Int Forum Allergy Rhinol. 6 (12), 1245-1252 (2016).</li><li>Prah, J. D., Benignus, V. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Decrements+in+olfactory+sensitivity+due+to+ozone+exposure.">Decrements in olfactory sensitivity due to ozone exposure.</a> Percept Mot Skills. 48 (1), 317-318 (1979).</li><li>Shi, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chronic+exposure+to+environmental+pollutant+ammonia+causes+damage+to+the+olfactory+system+and+behavioral+abnormalities+in+mice.">Chronic exposure to environmental pollutant ammonia causes damage to the olfactory system and behavioral abnormalities in mice.</a> Environ Sci Technol. 57 (41), 15412-15421 (2023).</li><li>Hern&#225;ndez-Soto, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chronic+intermittent+hypoxia+alters+main+olfactory+bulb+activity+and+olfaction.">Chronic intermittent hypoxia alters main olfactory bulb activity and olfaction.</a> Exp Neurol. 340, 113653 (2021).</li><li>Islam, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Odor+preference+and+olfactory+memory+are+impaired+in+Olfaxin-deficient+mice.">Odor preference and olfactory memory are impaired in Olfaxin-deficient mice.</a> Brain Res. 1688, 81-90 (2018).</li><li>Wang, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inducible+and+conditional+activation+of+ERK5+MAP+kinase+rescues+mice+from+cadmium-induced+olfactory+memory+deficits.">Inducible and conditional activation of ERK5 MAP kinase rescues mice from cadmium-induced olfactory memory deficits.</a> Neurotoxicology. 81, 127-136 (2020).</li><li>Chamero, P., Leinders-Zufall, T., Zufall, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=From+genes+to+social+communication:+molecular+sensing+by+the+vomeronasal+organ.">From genes to social communication: molecular sensing by the vomeronasal organ.</a> Trends Neurosci. 35 (10), 597-606 (2012).</li><li>Mohrhardt, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Signal+detection+and+coding+in+the+accessory+olfactory+system.">Signal detection and coding in the accessory olfactory system.</a> Chem Senses. 43 (9), 667-695 (2018).</li><li>Liu, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Type+3+adenylyl+cyclase+in+the+MOE+is+involved+in+learning+and+memory+in+mice.">Type 3 adenylyl cyclase in the MOE is involved in learning and memory in mice.</a> Behav Brain Res. 383, 112533 (2020).</li><li>Li, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Polyhexamethylene+guanidine+aerosol+triggers+pulmonary+fibrosis+concomitant+with+elevated+surface+tension+via+inhibiting+pulmonary+surfactant.">Polyhexamethylene guanidine aerosol triggers pulmonary fibrosis concomitant with elevated surface tension via inhibiting pulmonary surfactant.</a> J Hazard Mater. 420, 126642 (2021).</li><li>Yang, M., Crawley, J. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Simple+behavioral+assessment+of+mouse+olfaction.">Simple behavioral assessment of mouse olfaction.</a> Curr Protoc Neurosci. Chapter 8, Unit 8.24 (2009).</li><li>Huang, K. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Zinc+oxide+nanoparticles+induce+eosinophilic+airway+inflammation+in+mice.">Zinc oxide nanoparticles induce eosinophilic airway inflammation in mice.</a> J Hazard Mater. 297, 304-312 (2015).</li><li>Burd, G. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Morphological+study+of+the+effects+of+intranasal+zinc+sulfate+irrigation+on+the+mouse+olfactory+epithelium+and+olfactory+bulb.">Morphological study of the effects of intranasal zinc sulfate irrigation on the mouse olfactory epithelium and olfactory bulb.</a> Microsc Res Tech. 24 (3), 195-213 (1993).</li><li>Zou, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Methods+to+measure+olfactory+behavior+in+mice.">Methods to measure olfactory behavior in mice.</a> Curr Protoc Toxicol. 63, 11.18.1-11.18.21 (2015).</li><li>Ryalls, J. M. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Anthropogenic+air+pollutants+reduce+insect-mediated+pollination+services.">Anthropogenic air pollutants reduce insect-mediated pollination services.</a> Environ Pollut. 297, 118847 (2022).</li><li>Schiffman, S. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Livestock+odors:+implications+for+human+health+and+well-being.">Livestock odors: implications for human health and well-being.</a> J Anim Sci. 76 (5), 1343-1355 (1998).</li><li>Albrechet-Souza, L., Gilpin, N. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+predator+odor+avoidance+model+of+post-traumatic+stress+disorder+in+rats.">The predator odor avoidance model of post-traumatic stress disorder in rats.</a> Behav Pharmacol. 30 (2 and 3-Spec Issue), 105-114 (2019).</li><li>Davies, D. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inactivation+of+medial+prefrontal+cortex+or+acute+stress+impairs+odor+span+in+rats.">Inactivation of medial prefrontal cortex or acute stress impairs odor span in rats.</a> Learn Mem. 20 (12), 665-669 (2013).</li><li>Landers, M. S., Sullivan, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+development+and+neurobiology+of+infant+attachment+and+fear.">The development and neurobiology of infant attachment and fear.</a> Dev Neurosci. 34 (2-3), 101-114 (2012).</li><li>Drobyshevsky, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Antenatal+insults+modify+newborn+olfactory+function+by+nitric+oxide+produced+from+neuronal+nitric+oxide+synthase.">Antenatal insults modify newborn olfactory function by nitric oxide produced from neuronal nitric oxide synthase.</a> Exp Neurol. 237 (2), 427-434 (2012).</li><li>Arbuckle, E. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Testing+for+odor+discrimination+and+habituation+in+mice.">Testing for odor discrimination and habituation in mice.</a> J Vis Exp. (99), e52615 (2015).</li></ol>

Die Autoren erklären, dass keine Interessenkonflikte bestehen.

In diesem Artikel werden zwei grundlegende Protokolle vorgestellt, die für die schnelle Beurteilung von Geruchsstörungen bei Mäusen entwickelt wurden. Unterschiedliche inhalierbare Umweltschadstoffe führen bei Mäusen zu einer ausgeprägten Geruchsstörung. Der Test der vergrabenen Nahrung wird eingesetzt, um die Fähigkeit zur Erkennung flüchtiger Gerüche zu beurteilen, während das Experiment zur sozialen Geruchsunterscheidung die Fähigkeit des Tieres bewertet, verschiedene soziale Gerüche zu erkennen und zu un...

Riechstörungen haben sich zu einem bemerkenswerten Problem für die öffentliche Gesundheit entwickelt und sind unabhängig davon mit einem erhöhten Risiko für neurodegenerative Erkrankungen verbunden. Dieser Zustand kann sich negativ auf das allgemeine Wohlbefinden auswirken, zur Entwicklung depressiver Symptome beitragen und zu einer verminderten Lebensqualität führen. Seine Auswirkungen zeigen sich vor allem in der veränderten Wahrnehmung von Lebensmitteln, der Behinderung der sozialen Kommunikation und erhöhten negativen Gefühlen1. Verschiedene Faktoren, darunter Sinonasalerkrankungen, Infektionen der oberen Atemwege und traumatische Hirnverletzungen, wurden als Faktoren angesehen, die zur Geruchsbeeinträchtigung beim Menschen beitragen2. Insbesondere inhalierbare Umweltschadstoffe wie PM2,5, die auf 2 % bis 16 % geschätzt werden, gelangen durch die eingeatmete Luft in den Körper, durchqueren die Nasenhöhle und erreichen bestimmte geruchsbezogene Regionen, wo sie abgelagert werden 3,4,5,6,7. Jüngste Erkenntnisse deuten darauf hin, dass inhalierbare Umweltschadstoffe, einschließlich PM2,5 und Ammoniak, tatsächlich olfaktorische sensorische Neuronen schädigen können 8,9,10. Es ist jedoch eine weitere Validierung erforderlich, um festzustellen, ob eine solche Schädigung direkt zu einer Riechfunktionsstörung führt. Daher ist eine sorgfältige Bewertung der Auswirkungen inhalierbarer Umweltschadstoffe auf die Riechfunktion von besonderer Bedeutung.
Derzeit wird in zahlreichen Forschungslaboratorien Mäuse als alternatives Wirbeltiermodell für Verhaltensexperimente eingesetzt, die darauf abzielen, Veränderungen der Geruchsfunktion zu verstehen 11,12,13,14. Mäuse wurden als bevorzugtes Modellsystem für die Untersuchung der chemischen Kommunikation von Wirbeltieren ausgewählt und weisen eine bemerkenswerte olfaktorische Empfindlichkeit auf, die für die Nahrungssuche und die soziale Kommunikation entscheidend ist15. Darüber hinaus hat die sich ständig weiterentwickelnde Palette von Werkzeugen zur Beobachtung und Beeinflussung des Verhaltens von Mäusen diese Spezies für die Erforschung der Geruchsfunktion außerordentlich attraktiv gemacht16.
In dieser Studie verwendeten wir den Test für vergrabene Nahrung und das Experiment zur sozialen Geruchsunterscheidung, um die olfaktorische Beeinträchtigung in einem Mausmodell zu bewerten, das inhalierbaren Umweltschadstoffen ausgesetzt war. Um die Genauigkeit der Bewertung zu erhöhen, haben wir uns für die repräsentativste Methode zur Beurteilung der Geruchsfunktion entschieden. Wir haben diese Methode systematisch weiterentwickelt, um Einfachheit und Klarheit zu gewährleisten und das Ausmaß der durch inhalierbare Umweltschadstoffe verursachten Riechstörungen effektiv beurteilen zu können.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>0.5-10 &#956;L&#160; adjustable micropipette</td>
			<td>Eppendorf, Germany</td>
			<td>3123000225</td>
			<td>Intranasal instillation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>0.9% saline solution</td>
			<td>Solarbio</td>
			<td>7647-14-5</td>
			<td>Dissolve pollutants</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anhydrous zinc sulfate</td>
			<td>Macklin</td>
			<td>7733-02-0</td>
			<td>Expose mice</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Centrifuge tube (2 mL)</td>
			<td>Biosharp Incorporated</td>
			<td>BS-20-M</td>
			<td>Place urine</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Electronic balance</td>
			<td>Changzhou Ohaus Co.</td>
			<td>EX125DZH</td>
			<td>Weight anesthetics and pollutants</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>GraphPad Prism</td>
			<td>GraphPad Software</td>
			<td>8.0.1</td>
			<td>statistic analysis</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Handheld Dust detector</td>
			<td>TSI&#160;Incorporated</td>
			<td>DuatTrak <img alt="Equation 1" src="/files/ftp_upload/66818/66818eq01.jpg" style="margin: auto;" />8532</td>
			<td>Inhalation-exposed mice</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Video recording equipment</td>
			<td>Apple Inc.</td>
			<td>iPhone 6s Plus</td>
			<td>The activity time of mice was recorded</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vortex mixer</td>
			<td>Haimen Kylin-Bell Lab Instruments Co.</td>
			<td>Vortex-5&#160;</td>
			<td>Mix solution</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

studying the effects of inhaled environmental pollutants on olfactory function in mice

Riechstörungen sind ein erhebliches Problem für die öffentliche Gesundheit und sagen unabhängig das Risiko neurodegenerativer Erkrankungen voraus. Die Exposition gegenüber eingeatmeten Umweltschadstoffen kann den Geruchssinn beeinträchtigen; Dabei besteht ein dringender Bedarf an Methoden, um die Auswirkungen der Exposition gegenüber eingeatmeten Umweltschadstoffen auf den Geruchssinn zu bewerten. Mäuse sind aufgrund ihres hoch entwickelten Geruchssystems und ihrer Verhaltensmerkmale ideale Modelle für Geruchsexperimente. Um die Auswirkungen der Exposition gegenüber inhalierten Umweltschadstoffen auf die Geruchsfunktion bei Mäusen zu bewerten, wird ein detaillierter Test zur Unterscheidung von vergrabenen Lebensmitteln und ein Experiment zur sozialen Geruchsunterscheidung bereitgestellt, einschließlich der Versuchsvorbereitung, der Auswahl und des Aufbaus von Versuchsanlagen, des Testprozesses und der Zeitindizes. In der Zwischenzeit werden die Zeitmessungsausrüstung, die Betriebsdetails und die Versuchsumgebung besprochen, um den Erfolg des Assays sicherzustellen. Zinksulfat wird als Behandlung verwendet, um die Machbarkeit des experimentellen Ansatzes zu demonstrieren. Das Protokoll bietet ein einfaches und übersichtliches Verfahren zur Bewertung der Auswirkungen von inhalierten Umweltschadstoffen auf die Geruchsfunktion bei Mäusen.

Olfactory impairment has emerged as a noteworthy public health concern and is independently associated with an increased risk of neurodegenerative diseases. This condition can adversely affect overall well-being, contribute to the development of depressive symptoms, and result in a diminished quality of life. Its impact is prominently observed in the altered perception of food, hindrance in social communication, and heightened negative feelings1. Various factors, including sinonasal disease, upper respiratory tract infection, and traumatic brain injury, have been considered contributors to olfactory impairment in humans2. Notably, inhalable environmental pollutants such as PM2.5, estimated to range from 2% to 16%, enter the body through inspired air, traverse the nasal cavity, and reach specific olfaction-dedicated regions where they are deposited3,4,5,6,7. Recent findings indicate that inhalable environmental pollutants, including PM2.5 and ammonia, can indeed harm olfactory sensory neurons8,9,10. However, further validation is required to ascertain whether such damage directly leads to olfactory dysfunction. Hence, a meticulous evaluation of the effects of inhalable environmental pollutants on olfactory function is of particular importance.
Currently, numerous research laboratories employ mice as an alternative vertebrate model for behavioral experiments aimed at comprehending changes in olfactory function11,12,13,14. Mice were chosen as the preferred model system for investigating vertebrate chemical communication, and it exhibits a remarkable olfactory sensitivity crucial for foraging and social communication15. Furthermore, the continually evolving array of tools for observing and influencing mouse behavior has rendered this species exceptionally appealing for research on olfactory function16.
In this study, we employed the buried food test and the social odor discrimination experiment to assess olfactory impairment in a mouse model exposed to inhalable environmental pollutants. To enhance the precision of evaluation, we opted for the most representative method for assessing olfactory function. We systematically refined this method to ensure simplicity and clarity, allowing us to gauge the extent of olfactory dysfunction induced by inhalable environmental pollutants effectively.

Autor im Rampenlicht: Bewertung der olfaktorischen Wirkung von Luftschadstoffen - Tests für vergrabene Lebensmittel und soziale Gerüche

Untersuchung der Auswirkungen von eingeatmeten Umweltschadstoffen auf die Geruchsfunktion bei Mäusen

Our research is environmental toxicology. It asks to provide two behavioral testing methods for starting effects or inheritable environmental pollutants on olfactory function. We provide two simple and effective methods by certain food tests and the social order discrimination experiment for determining the toxicity of inheritable environmental pollutants on olfactory function.We can comprehensively evaluate the impact of inheritable environmental pollutants on olfactory function by convincing the variable test and social order discrimination experiment matters. Our protocol uses a video device to time and record mouse behavior, addressing the efficiency of observes not being able to observe the behavior of mice in the observation area.

Einatembare Umweltschadstoffe beeinträchtigen die Riechfunktion von Mäusen. Es hat sich gezeigt, dass atmosphärisches Zink, das aus Verbrennungsanlagen und Kraftfahrzeugen freigesetzt wird, ein eingeatmeter Schadstoff ist, der zu allergischen Lungenentzündungen führen kann20. Zinksulfat gilt als eine der typischen Verbindungen, die eine Geruchsstörung verursachen21. Daher verwenden wir Zinksulfat als Behandlung, um Mäuse durch intranasale Instillation zu exponieren, ...

Dieser Artikel bietet eine detaillierte Beschreibung des Tests zur Unterscheidung von vergrabenen Lebensmitteln und des Experiments zur sozialen Geruchsunterscheidung, um die Auswirkungen der Exposition gegenüber eingeatmeten Umweltschadstoffen auf die Geruchsfunktion bei Mäusen zu bewerten.

Olfactory impairment is a significant public health problem and independently predicts the risk of neurodegenerative diseases. Inhaled environmental ...

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Research

JoVE Journal

Environment

Studying the Effects of Inhaled Environmental Pollutants on Olfactory Function in Mice

310 Aufrufe.  Qingdao University. Unsere Forschung ist die Umwelttoxikologie. Es werden zwei Verhaltenstestmethoden für Starteffekte oder vererbbare Umweltschadstoffe auf die Geruchsfunktion zur Verfügung gestellt. Wir stellen zwei einfache und effektive Methoden zur Verfügung, indem wir bestimmte Lebensmitteltests und das Experiment zur Unterscheidung der sozialen Ordnung zur Bestimmung der Toxizität von vererbbaren Umweltschadstoffen auf die Geruchsfunktion zur Verfügung stellen.

Serie: Autor im Rampenlicht: Bewertung der olfaktorischen Wirkung von Luftschadstoffen - Tests für vergrabene Lebensmittel und soziale Gerüche

Olfactory impairment is a significant public health problem and independently predicts the risk of neurodegenerative diseases. Inhaled environmental pollutants exposure may impair olfaction; thereby, there is an urgent need for methods to evaluate the effects of inhaled environmental pollutants exposure on olfaction. Mice are ideal models for olfactory experiments because of their highly developed olfactory system and behavioral characteristics. To assess the effects of inhaled environmental pollutants exposure on olfactory function in mice, a detailed buried food test and social odor discrimination experiment is provided, including the experiment preparation, the selection and construction of experimental facilities, the testing process, and indexes of time. Meanwhile, timekeeping equipment, operational details, and the experimental environment are discussed to ensure the success of the assay. Zinc sulfate is used as the treatment to demonstrate the feasibility of the experimental approach. The protocol provides a simple and clear operational process for assessing the effects of inhaled environmental pollutants on olfactory function in mice.

This paper provides a detailed description of the buried food test and social odor discrimination experiment to assess the effects of inhaled environmental pollutants exposure on olfactory function in mice.

Forschung

Umwelt

Performing Buried Food Test to Assess the Effects of Inhaled Pollutants on Olfactory Function in Mice

To begin, dissolve inhalable environmental pollutants in a 0.9%saline solution. Use a 5%zinc sulfate solution once as it has been shown to cause loss of smell. Using a pipetting gun, administer 10 microliters of the solution into one nostril of the mouse, allowing it to naturally inhale the solution into the nasal cavity.Remove all chow pellets from the food hopper of the home cage, to carry out food deprivation, 18 to 24 hours before the test. Change the bedding materials for the mice. Take the cage containing the mice to the operating room to rest one hour before the start of the test.Arrange the operating room during this period. Use transparent PVC standard mice cages marked as A and squirrel cages marked as B for testing. Mark the common cage used to place the mice after the experiment as cage C.Cover cages A and B with three centimeters of bedding material, and measure them with a ruler.Then arrange the cages side by side, with 0.5 meters between each cage. Next, define the experimental area as a two-meter radius space centered on the cages, with the area beyond two meters designated as the observation area. Keep cage C and cages containing untested mice as far away from the experimental area as possible.Now, select a position at random in cage B.Bury the food one centimeter below the surface of the bedding and smooth the surface of the bedding. Then place the mouse in cage A for four minutes. At the end of the time, transfer the mouse to cage B and turn on the video device before returning to the observation area.Stop the video recording when the mouse picks up the food lock with its forepaw. Record the time from contact with the mat at the bottom of cage B until the food is found for each mouse. After the test, put the mouse in cage C and add feed and water.In the food burial test, mice exposed to zinc sulfate were unable to find food for 240 seconds compared to the control group.

Durchführung eines Tests mit vergrabenen Lebensmitteln zur Beurteilung der Auswirkungen von eingeatmeten Schadstoffen auf die Geruchsfunktion bei Mäusen