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El protocolo permite medir la deformación de la microestructura ósea en todo el fémur humano proximal y su dureza mediante la combinación de microtomografías computarizadas de gran volumen, una etapa compresiva hecha a medida y herramientas avanzadas de procesamiento de imágenes.
La obtención de imágenes de la microestructura ósea bajo cargas progresivamente crecientes permite observar el comportamiento de falla microestructural del hueso. En este trabajo se describe un protocolo para la obtención de una secuencia de imágenes microestructurales tridimensionales de todo el fémur proximal sometido a una deformación progresivamente creciente, causante de fracturas clínicamente relevantes del cuello femoral. El protocolo se demuestra utilizando cuatro fémures de donantes femeninas de 66 a 80 años en el extremo inferior de la densidad mineral ósea de la población (rango de puntuación T = −2,09 a −4,75). Se diseñó una etapa compresiva radiotransparente para cargar las muestras replicando una postura de una pierna, mientras se registraba la carga aplicada durante la obtención de imágenes de microtomografía computarizada (micro-TC). El campo de visión era de 146 mm de ancho y 132 mm de alto, y el tamaño de píxel isotrópico era de 0,03 mm. El incremento de fuerza se basó en predicciones de elementos finitos de la carga de fractura. La etapa de compresión se utilizó para aplicar el desplazamiento a la muestra y promulgar los incrementos de fuerza prescritos. Las fracturas subcapitales debidas a la apertura y cizallamiento del cuello femoral ocurrieron después de cuatro a cinco incrementos de carga. Las imágenes de micro-TC y las mediciones de la fuerza de reacción se procesaron para estudiar la deformación ósea y la capacidad de absorción de energía. La inestabilidad de la corteza apareció en los primeros pasos de carga. El hueso subcondral de la cabeza femoral presentaba grandes deformaciones que alcanzaban el 16% antes de la fractura, y un aumento progresivo de la capacidad de soporte hasta la fractura. La energía de deformación aumentó linealmente con el desplazamiento hasta la fractura, mientras que la rigidez disminuyó a valores cercanos a cero inmediatamente antes de la fractura. Tres cuartas partes de la energía de fractura fue tomada por la muestra durante el incremento final de fuerza del 25%. En conclusión, el protocolo desarrollado reveló una notable capacidad de absorción de energía, o tolerancia al daño, y una interacción sinérgica entre el hueso cortical y trabecular a una edad avanzada del donante.
Las fracturas del cuello femoral son una carga importante para la población que envejece. La microtomografía computarizada (micro-TC) y las pruebas mecánicas concomitantes permiten observar la microestructura ósea y estudiar su relación con la fuerza ósea, sus cambios relacionados con la edad y los desplazamientos bajo carga 1,2. Sin embargo, hasta hace poco, los estudios de micro-TC de hueso bajo carga se limitaban a núcleos óseos extirpados3, animales pequeños4 y unidades de columna vertebral humana5. El presente protocolo permite cuanti....
El protocolo se desarrolló y probó con 12 muestras de fémur recibidas de un programa de donación de cuerpos. Los especímenes se obtuvieron frescos y se almacenaron a -20 °C en el Laboratorio de Biomecánica e Implantes de la Universidad de Flinders (Tonsley, Australia del Sur, Australia). La humedad ósea se mantuvo durante todo el experimento. Las donantes fueron mujeres caucásicas (66-80 años de edad). La autorización ética se obtuvo del Comité de Ética de Investigación Social y del Comportamiento (SBREC) de la Universidad de Flinders (Proyecto # 6380).
1. Planificación de un incremento de paso de carga específico de la muestra
Las imágenes muestran todo el fémur proximal, el alveolo a presión, el cemento dental, la copa de aluminio y el tejido de envoltura. La microarquitectura ósea se puede ver deformarse progresivamente a medida que aumenta la carga antes de la fractura y después de la fractura (Figura 4).
Figura 4: La etapa.......
El presente protocolo permite estudiar la micromecánica de las fracturas de cadera en tres dimensiones ex vivo. Se ha diseñado, fabricado y probado a medida una etapa compresiva radiotransparente (aluminio) capaz de aplicar una deformación progresiva a la mitad proximal del fémur humano y medir la fuerza de reacción. En este protocolo se emplea un escáner de micro-TC de gran volumen para proporcionar una secuencia temporal de volúmenes de imagen que muestran todo el fémur proximal con carga progresiva a .......
Todos los autores declaran no tener conflictos de intereses.
Financiación del Consejo Australiano de Investigación (FT180100338; IC190100020) se agradece.
....Name | Company | Catalog Number | Comments |
Absorbent tissue | N/A | Maintain the bone moisture throughout the experiment | |
Alignment rig | Custom-made | Rig for positioning the specimen in the potting cup | |
Aluminium potting cup | Custom-made | Potting cup | |
Bone saw | N/A | Cut the specimen to size | |
Calibration phantom QCT Pro | Mindways Software, Inc., Austin, USA | CT Calibration 13002 | Calibrate grey levels in the images into equivalent bone mineral (ash) density levels |
Clinical Computed-Tmography scanner | General Electric Medical Systems Co., Wisconsin, USA | Optima CT660 | Preliminary imaging for the prediction of the load step to fracture |
Compressive stage | Custom-made | A 10 kg, radiotransparent compressive stage for applying and maintaining throught imaging a prescribed deformation to the specimen. | |
Dental cement | Soesterberg, The Netherlands | Vertex RS | |
Femur specimen | Science Care, Phoenix, USA | ||
Finite-element analysis software | ANSYS Inc., Canonsburg, USA | ANSYS Mechanical APDL | Finite-element software package |
Freezer | N/A | Store specimens at -20 °C | |
Hard Drive | Dell | Disk space: 500 GB per volume | |
Image bnarization and segmentation software | Skyscan-Bruker, Kontich, Belgium | CT analyzer | Image processing software |
Image elastic segmentation | The University of Sheffield | Bone DVC | https://bonedvc.insigneo.org/dvc/ |
Image processing and automation software | The MathWork Inc. | Matlab | Image processing software |
Image registration software | Skyscan-Bruker, Kontich, Belgium | DataViewer | Image processing software |
Image segmentation and FE modelling software | Simpleware, Exeter, UK | Scan IP | Bone egmentation software |
Image stiching script | Australian syncrotron, Clayton, VIC, AU | The script is available at IMBL | |
Image visualization | Kitware, Clifton Park, NY, USA | Paraview | Image visualization |
Image visualization | Australian National University | Dristhi | Image visualization: doi:10.1117/12.935640 |
Imaging and Medical beamline | Australian syncrotron, Clayton, VIC, AU | Large object micro-CT beamline at the Australian Synchrotron | |
Laptop | Dell Inc., USA | ||
Low-friction x-y table | THK Co., Tokyo, Japan | ||
NI signal acquisition software | National Instruments, Austin, TX | NI-DAQmx | |
Phosphate-buffered saline solution | Custom-made | Maintain the bone moisture throughout the experiment | |
Plastic bag | N/A | Maintain the bone moisture throughout the experiment | |
Rail | SKF Inc., Lansdale, PA, USA | ||
Screw-jack mechanism | Benzlers, Örebro, Sweden | Serie BD (warm gear unit) | stroke: 150 mm, maximal load: 10,000 N, gear ratio: 27:1, a displacement per revolution: 0.148 mm |
Single pco.edge sensor, lens coupled scintillator | Australian syncrotron, Clayton, VIC, AU | Detector Ruby FOV: 141 x 119 mm; 2560 x 2160 px; 55 µm/px; 50 fps | |
Six axis load cell | ME-Meßsysteme GmbH, Hennigsdorf, GE | K6D6 | Maximal measurement error: 0.005%; maximal force: 10000 N; maximal torque: 500 Nm |
Strain amplifier | ME-Meßsysteme GmbH, Hennigsdorf, GE | GSV-1A8USB K6D/M16 |
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