Los efectos antihipertensivos y los mecanismos de la decocción de Huotan Jiedu Tongluo en ratas con hipertensión tipo H

Resumen

En este trabajo se presenta un protocolo para inducir hipertensión tipo H y se evalúan los efectos antihipertensivos de la decocción de Huotan Jiedu Tongluo (HTJDTLD) administrada por vía intragástrica. En ratas con hipertensión tipo H, HTJDTLD tuvo efectos antihipertensivos efectivos, posiblemente asociados con la inhibición de la activación de la vía de apoptosis inducida por el estrés del retículo endoplásmico (RE).

Resumen

La hipertensión de tipo H, que es una forma específica de hipertensión caracterizada por niveles elevados de homocisteína plasmática (Hcy), se ha convertido en un importante desafío de salud pública en todo el mundo. Este estudio investigó los efectos hipotensores y los mecanismos subyacentes de la decocción de Huotan Jiedu Tongluo (HTJDTLD), una fórmula de medicina tradicional china altamente efectiva comúnmente utilizada para tratar la estenosis vascular. La metionina se utilizó para inducir hipertensión tipo H en ratas, y la HTJDTLD se administró por vía intragástrica. A continuación, se midieron las presiones sistólicas y diastólicas de la arteria caudal de las ratas mediante manometría caudal no invasiva en ratas. La evaluación histológica de la aorta se realizó mediante tinción con hematoxilina-eosina (HE). Se utilizó el ensayo de inmunoadsorción enzimática (ELISA) para medir los niveles de Hcy, y la reacción en cadena de la polimerasa con transcriptasa inversa cuantitativa (qRT-PCR) y el western blot para determinar los niveles de ARNm y proteínas de la proteína reguladora de glucosa 78 (GRP78), el factor 2 asociado al receptor del factor de necrosis tumoral (TNF) (TRAF2), las quinasas c-Jun N-terminal (JNK) y la caspasa-3. Los resultados mostraron que HTJDTLD disminuyó significativamente la presión arterial, alivió las lesiones histopatológicas y disminuyó los niveles de Hcy después del tratamiento con metionina. Además, HTJDTLD inhibió significativamente la expresión génica y proteica de GRP78, JNK, TRAF2 y caspasa 3, que están implicadas principalmente en la vía de apoptosis inducida por el estrés del retículo endoplásmico (RE). En general, los resultados indicaron que HTJDTLD tuvo efectos antihipertensivos efectivos en ratas con hipertensión tipo H y revelaron los mecanismos antihipertensivos asociados con la inhibición de la activación de la vía de apoptosis inducida por el estrés del RE.

Introducción

La hipertensión, un importante factor de riesgo de ataque cardíaco, accidente cerebrovascular e insuficiencia renal, se ha convertido en un importante desafío de salud pública que afecta a 1.000 millones de personas en todo el mundo^. La homocisteína (Hcy), un aminoácido que contiene el grupo tiol, es un intermediario metabólico vital del metabolismo de la metionina. La hipertensión con niveles plasmáticos elevados de Hcy se define como hipertensión tipo H, que podría ser un factor de riesgo significativo para la aparición y recurrencia de enfermedades cardiocerebrovasculares como el accidente cerebrovascular ^2,3

Protocolo

Todos los experimentos con animales fueron aprobados por el Comité Institucional de Cuidado y Uso de Animales (IACUC) de la Universidad de Medicina China de Changchun. Los materiales se enumeran en la Tabla de Materiales.

1. Animales y trato

1. Divida aleatoriamente un total de 50 ratas adultas espontáneamente hipertensas (SHR) (machos, 50 días de edad) en cinco grupos, incluidos los grupos control (CON), metionina (MET), MET + HTJDTLD + maleato de enalapril (EM), MET + EM y MET + HTJDTLD.
   NOTA: Las ratas experimentales fueron alojadas en un ambiente controlado diseñado para garantizar su comodida....

Discusión

La hipertensión es uno de los trastornos cardiovasculares más comunes que afecta a un tercio de la población adulta y aumenta el riesgo de accidente cerebrovascular, enfermedad coronaria e insuficiencia cardíaca y renal⁸. La hipertensión tipo H es un tipo especial de hipertensión que se refiere a la co-ocurrencia de hipertensión primaria y aumento de los niveles de homocisteína y ha atraído una amplia atención a lo largo de los años⁹. En los últimos años, el us.......

Materiales

Name	Company	Catalog Number	Comments
1st Strand cDNA Synthesis SuperMix for qPCR	Yeasen,China	11149ES	cDNA synthesis kit
Anti-beta-actin antibody	Bioss, China	bs-0061R
Anti-caspase-3 antibody	Bioss, China	bs-0081R
Anti-GPR78 antibody	Abcam, USA	ab108513
Anti-JNK antibody	Abcam, USA	ab76572
Anti-p-JNK antibody	Bioss, China	bsm-52462R
Anti-rabbit IgG antibody	Bioss, China	bs-0295G-HRP
Anti-TRAF2 antibody	Bioss, China	bs-22372R
Bio-Rad CFX96 Touch system	Bio-Rad	CFX96	real-time PCR detection system
ECL Western Blot Substrates	Merck, MA, USA	WBULP-10ML
Enalapril maleate folic acid tablets	Yangzijiang Pharmaceutical Company, China	20040991
FastStart SYBR Green Master	Sigma	FSSGMMRO
Fructus Trichosanthis	The First Affiliated Hospital of Changchun University of Traditional Chinese Medicine, China	No catalog number
Hirudo	The First Affiliated Hospital of Changchun University of Traditional Chinese Medicine, China	No catalog number
intelligent noninvasive sphygmomanometer	Beijing Softron Biotechnology company	BP-2010A
Lonicerae Japonicae Flos	The First Affiliated Hospital of Changchun University of Traditional Chinese Medicine, China	No catalog number
Methionine	Sigma, USA	M9500
Radix Angelicae Sinensis	The First Affiliated Hospital of Changchun University of Traditional Chinese Medicine, China	No catalog number
Radix et Rhizoma Glycyrrhizae	The First Affiliated Hospital of Changchun University of Traditional Chinese Medicine, China	No catalog number
Radix et Rhizoma Nardostachyos	The First Affiliated Hospital of Changchun University of Traditional Chinese Medicine, China	No catalog number
Radix et Rhizoma Rhodiolae Crenulatae	The First Affiliated Hospital of Changchun University of Traditional Chinese Medicine, China	No catalog number
Radix et Rhizoma Salviae Miltiorrhizae	The First Affiliated Hospital of Changchun University of Traditional Chinese Medicine, China	No catalog number
Radix Scrophulariae	The First Affiliated Hospital of Changchun University of Traditional Chinese Medicine, China	No catalog number
Rat Hcy ELISA Kits	Shanghai Meimian Industrial Company, China	MM-0293R2
RIPA buffer	Shanghai Beyotime Biotechnology company	P0013B