Gli effetti antipertensivi e i meccanismi del decotto di Huotan Jiedu Tongluo nei ratti con ipertensione di tipo H

Riepilogo

Qui, presentiamo un protocollo per indurre l'ipertensione di tipo H e valutiamo gli effetti antipertensivi del decotto di Huotan Jiedu Tongluo (HTJDTLD) somministrato per via intragastrica. Nei ratti con ipertensione di tipo H, HTJDTLD ha avuto efficaci effetti antipertensivi, probabilmente associati all'inibizione dell'attivazione della via dell'apoptosi indotta dallo stress del reticolo endoplasmatico (ER).

Abstract

L'ipertensione di tipo H, che è una forma specifica di ipertensione caratterizzata da elevati livelli plasmatici di omocisteina (Hcy), è diventata una delle principali sfide per la salute pubblica in tutto il mondo. Questo studio ha studiato gli effetti ipotensivi e i meccanismi alla base del decotto di Huotan Jiedu Tongluo (HTJDTLD), una formula di medicina tradizionale cinese altamente efficace comunemente usata per trattare la stenosi vascolare. La metionina è stata utilizzata per indurre l'ipertensione di tipo H nei ratti e l'HTJDTLD è stato somministrato per via intragastrica. Quindi, le pressioni arteriose sistolica e diastolica dell'arteria caudale dei ratti sono state misurate mediante manometria caudale di ratto non invasiva. La valutazione istologica dell'aorta è stata eseguita mediante colorazione con ematossilina-eosina (HE). Per misurare i livelli di Hcy è stato utilizzato il test di immunoassorbimento enzimatico (ELISA) e la reazione a catena quantitativa della polimerasi trascrittasi inversa (qRT-PCR) e il western blotting sono stati utilizzati per determinare i livelli di mRNA e proteine della proteina regolatrice del glucosio 78 (GRP78), del fattore 2 associato al recettore del fattore di necrosi tumorale (TNF), delle chinasi N-terminali c-Jun (JNK) e della caspasi-3. I risultati hanno mostrato che HTJDTLD ha abbassato significativamente la pressione sanguigna, alleviato le lesioni istopatologiche e diminuito i livelli di Hcy dopo il trattamento con metionina. Inoltre, HTJDTLD ha inibito significativamente l'espressione genica e proteica di GRP78, JNK, TRAF2 e caspasi 3, che sono coinvolti principalmente nella via dell'apoptosi indotta da stress del reticolo endoplasmatico (ER). Nel complesso, i risultati hanno indicato che HTJDTLD ha avuto effetti antipertensivi efficaci nei ratti con ipertensione di tipo H e ha rivelato i meccanismi antipertensivi associati all'inibizione dell'attivazione della via dell'apoptosi indotta dallo stress ER.

Introduzione

L'ipertensione, uno dei principali fattori di rischio per infarto, ictus e insufficienza renale, è diventata una sfida significativa per la salute pubblica che colpisce 1 miliardo di persone in tutto il mondo^. L'omocisteina (Hcy), un amminoacido contenente il gruppo tiolico, è un intermediario metabolico vitale del metabolismo della metionina. L'ipertensione con elevati livelli plasmatici di Hcy è definita come ipertensione di tipo H, che potrebbe essere un fattore di rischio significativo per l'insorgenza e la recidiva di malattie cardiocerebrovascolari come l'ictus ^2,3. Studi recenti ....

Protocollo

Tutti gli esperimenti sugli animali sono stati approvati dal Comitato Istituzionale per la Cura e l'Uso degli Animali (IACUC) dell'Università di Medicina Cinese di Changchun. I materiali sono elencati nella Tabella dei Materiali.

1. Animali e trattamento

1. Dividere casualmente un totale di 50 ratti adulti spontaneamente ipertesi (SHR) (maschi, 50 giorni di età) in cinque gruppi, inclusi i gruppi di controllo (CON), metionina (MET), MET + HTJDTLD + Enalapril maleato (EM), MET + EM e MET + HTJDTLD.
   NOTA: I ratti sperimentali sono stati alloggiati in un ambiente controllato progettato per garantire ....

Discussione

L'ipertensione è uno dei disturbi cardiovascolari più comuni che colpisce un terzo della popolazione adulta e aumenta il rischio di ictus, malattia coronarica e insufficienza cardiaca e renale⁸. L'ipertensione di tipo H è un tipo speciale di ipertensione che si riferisce alla co-occorrenza di ipertensione primaria e aumento dei livelli di omocisteina e ha attirato un'ampia attenzione nel corso degli anni⁹. Negli ultimi anni, l'uso di EM orali combinato con farmaci antipe.......

Materiali

Name	Company	Catalog Number	Comments
1st Strand cDNA Synthesis SuperMix for qPCR	Yeasen,China	11149ES	cDNA synthesis kit
Anti-beta-actin antibody	Bioss, China	bs-0061R
Anti-caspase-3 antibody	Bioss, China	bs-0081R
Anti-GPR78 antibody	Abcam, USA	ab108513
Anti-JNK antibody	Abcam, USA	ab76572
Anti-p-JNK antibody	Bioss, China	bsm-52462R
Anti-rabbit IgG antibody	Bioss, China	bs-0295G-HRP
Anti-TRAF2 antibody	Bioss, China	bs-22372R
Bio-Rad CFX96 Touch system	Bio-Rad	CFX96	real-time PCR detection system
ECL Western Blot Substrates	Merck, MA, USA	WBULP-10ML
Enalapril maleate folic acid tablets	Yangzijiang Pharmaceutical Company, China	20040991
FastStart SYBR Green Master	Sigma	FSSGMMRO
Fructus Trichosanthis	The First Affiliated Hospital of Changchun University of Traditional Chinese Medicine, China	No catalog number
Hirudo	The First Affiliated Hospital of Changchun University of Traditional Chinese Medicine, China	No catalog number
intelligent noninvasive sphygmomanometer	Beijing Softron Biotechnology company	BP-2010A
Lonicerae Japonicae Flos	The First Affiliated Hospital of Changchun University of Traditional Chinese Medicine, China	No catalog number
Methionine	Sigma, USA	M9500
Radix Angelicae Sinensis	The First Affiliated Hospital of Changchun University of Traditional Chinese Medicine, China	No catalog number
Radix et Rhizoma Glycyrrhizae	The First Affiliated Hospital of Changchun University of Traditional Chinese Medicine, China	No catalog number
Radix et Rhizoma Nardostachyos	The First Affiliated Hospital of Changchun University of Traditional Chinese Medicine, China	No catalog number
Radix et Rhizoma Rhodiolae Crenulatae	The First Affiliated Hospital of Changchun University of Traditional Chinese Medicine, China	No catalog number
Radix et Rhizoma Salviae Miltiorrhizae	The First Affiliated Hospital of Changchun University of Traditional Chinese Medicine, China	No catalog number
Radix Scrophulariae	The First Affiliated Hospital of Changchun University of Traditional Chinese Medicine, China	No catalog number
Rat Hcy ELISA Kits	Shanghai Meimian Industrial Company, China	MM-0293R2
RIPA buffer	Shanghai Beyotime Biotechnology company	P0013B