الآثار الخافضة للضغط وآليات Huotan Jiedu Tongluo ديكوتيون في الفئران مع ارتفاع ضغط الدم من النوع H

Summary

هنا ، نقدم بروتوكولا للحث على ارتفاع ضغط الدم من النوع H وتقييم الآثار الخافضة للضغط من Huotan Jiedu Tongluo ديكوتيون (HTJDTLD) تدار داخل المعدة. في الفئران المصابة بارتفاع ضغط الدم من النوع H ، كان ل HTJDTLD تأثيرات فعالة خافضة للضغط ، ربما ترتبط بتثبيط تنشيط مسار موت الخلايا المبرمج الناجم عن الإجهاد (ER).

Abstract

أصبح ارتفاع ضغط الدم من النوع H ، وهو شكل محدد من ارتفاع ضغط الدم يتميز بارتفاع مستويات الحمض الاميني في البلازما (Hcy) ، تحديا كبيرا للصحة العامة في جميع أنحاء العالم. بحثت هذه الدراسة في التأثيرات الخافضة للضغط والآليات الأساسية ل Huotan Jiedu Tongluo decoction (HTJDTLD) ، وهي تركيبة طبية صينية تقليدية فعالة للغاية تستخدم عادة لعلاج تضيق الأوعية الدموية. تم استخدام الميثيونين للحث على ارتفاع ضغط الدم من النوع H في الفئران ، وتم إعطاء HTJDTLD داخل المعدة. بعد ذلك ، تم قياس ضغط الدم الانقباضي والانبساطي للشريان الذيلي للفئران بواسطة قياس الضغط الذيلي غير الباضع للفئران. تم إجراء التقييم النسيجي للشريان الأورطي عن طريق تلطيخ الهيماتوكسيلين يوزين (HE). تم استخدام مقايسة الممتز المناعي المرتبط بالإنزيم (ELISA) لقياس مستويات Hcy ، وتم استخدام تفاعل البوليميراز المتسلسل للنسخ العكسي الكمي (qRT-PCR) والنشاف الغربي لتحديد مستويات mRNA والبروتين للبروتين التنظيمي للجلوكوز 78 (GRP78) ، عامل نخر الورم (TNF) العامل المرتبط بمستقبلات 2 (TRAF2) ، كينازات c-Jun N-terminal (JNK) ، و caspase-3. أظهرت النتائج أن HTJDTLD خفض ضغط الدم بشكل كبير ، وخفف من الآفات النسيجية المرضية ، وخفض مستويات Hcy بعد العلاج بالميثيونين. علاوة على ذلك ، يثبط HTJDTLD بشكل كبير التعبير الجيني والبروتيني ل GRP78 و JNK و TRAF2 و caspase 3 ، والتي تشارك بشكل رئيسي في مسار موت الخلايا المبرمج الناجم عن الإجهاد في الشبكة الإندوبلازمية (ER). بشكل عام ، أشارت النتائج إلى أن HTJDTLD كان له تأثيرات فعالة خافضة للضغط في الفئران المصابة بارتفاع ضغط الدم من النوع H وكشفت عن الآليات الخافضة للضغط المرتبطة بتثبيط تنشيط مسار موت الخلايا المبرمج الناجم عن الإجهاد ER.

Introduction

أصبح ارتفاع ضغط الدم ، وهو عامل خطر رئيسي للنوبات القلبية والسكتة الدماغية والفشل الكلوي ، تحديا كبيرا للصحة العامة يؤثر على مليار شخص في جميع أنحاء^{العالم 1}. الهوموسيستين (Hcy) ، وهو حمض أميني يحتوي على مجموعة ثيول ، هو وسيط استقلابي حيوي لاستقلاب الميثيونين. يتم تعريف ارتفاع ضغط الدم مع ارتفاع مستويات Hcy في البلازما على أنه ارتفاع ضغط الدم من النوع H ، والذي يمكن أن يكون عامل خطر كبير لحدوث وتكرار أمراض القلب والأوعية الدموية الدماغية مثل السكتة الدماغية ^2,3. أفادت الدراسات الحديثة أن الإقامة المشتركة لارتفاع ضغط الدم من النوع H يمكن أن تؤدي إلى تفاقم الآثار الجانبية للأمراض القلبية ا....

Protocol

تمت الموافقة على جميع التجارب على من قبل اللجنة المؤسسية لرعاية واستخدام (IACUC) بجامعة تشانغتشون للطب الصيني. يتم سرد المواد في جدول المواد.

1. والعلاج

1. قسم عشوائيا ما مجموعه 50 فأرا بالغا مصابا بارتفاع ضغط الدم تلقائيا (SHRs) (ذكر ، يبلغ من العمر 50 يوما) إلى خمس مجموعات ، بما في ذلك المجموعة الضابطة (CON) والميثيونين (MET) و MET + HTJDTLD + Enalapril maleate (EM) و MET + EM ومجموعات MET + HTJDTLD.
   ملاحظة: تم إيواء فئران التجارب في بيئة خاضعة للرقابة مصممة لضمان راحتهم ورفاهيتهم. يتميز المرفق بغرف يتم التحكم في درجة حرارتها عند 22 درجة مئوية ثابتة ، مع رطوبة نسبية تتراوح بين 40 و 60٪. كانت أقف....

النتائج

كما هو موضح في الجدول 4 والجدول 5 ، كان ضغط الدم الانقباضي (SBP) وضغط الدم الانبساطي (DBP) أكبر بكثير في مجموعة MET من تلك الموجودة في مجموعة CON من 1 إلى 4 أسابيع. بعد علاج HTJDTLD ، كان SBP و DBP للفئران أقل بكثير من تلك الموجودة في مجموعة MET. والجدير بالذكر أن الاستخدام المشترك ل HTJDTLD و EM ك?.......

Discussion

ارتفاع ضغط الدم هو واحد من أكثر اضطرابات القلب والأوعية الدموية شيوعا التي تؤثر على ثلث السكان البالغين وتزيد من خطر الإصابة بالسكتة الدماغية وأمراض القلب التاجية وفشل القلب والكلى⁸. ارتفاع ضغط الدم من النوع H هو نوع خاص من ارتفاع ضغط الدم يشير إلى تزامن ارتفاع ضغط الدم الأساس.......

Materials

Name	Company	Catalog Number	Comments
1st Strand cDNA Synthesis SuperMix for qPCR	Yeasen,China	11149ES	cDNA synthesis kit
Anti-beta-actin antibody	Bioss, China	bs-0061R
Anti-caspase-3 antibody	Bioss, China	bs-0081R
Anti-GPR78 antibody	Abcam, USA	ab108513
Anti-JNK antibody	Abcam, USA	ab76572
Anti-p-JNK antibody	Bioss, China	bsm-52462R
Anti-rabbit IgG antibody	Bioss, China	bs-0295G-HRP
Anti-TRAF2 antibody	Bioss, China	bs-22372R
Bio-Rad CFX96 Touch system	Bio-Rad	CFX96	real-time PCR detection system
ECL Western Blot Substrates	Merck, MA, USA	WBULP-10ML
Enalapril maleate folic acid tablets	Yangzijiang Pharmaceutical Company, China	20040991
FastStart SYBR Green Master	Sigma	FSSGMMRO
Fructus Trichosanthis	The First Affiliated Hospital of Changchun University of Traditional Chinese Medicine, China	No catalog number
Hirudo	The First Affiliated Hospital of Changchun University of Traditional Chinese Medicine, China	No catalog number
intelligent noninvasive sphygmomanometer	Beijing Softron Biotechnology company	BP-2010A
Lonicerae Japonicae Flos	The First Affiliated Hospital of Changchun University of Traditional Chinese Medicine, China	No catalog number
Methionine	Sigma, USA	M9500
Radix Angelicae Sinensis	The First Affiliated Hospital of Changchun University of Traditional Chinese Medicine, China	No catalog number
Radix et Rhizoma Glycyrrhizae	The First Affiliated Hospital of Changchun University of Traditional Chinese Medicine, China	No catalog number
Radix et Rhizoma Nardostachyos	The First Affiliated Hospital of Changchun University of Traditional Chinese Medicine, China	No catalog number
Radix et Rhizoma Rhodiolae Crenulatae	The First Affiliated Hospital of Changchun University of Traditional Chinese Medicine, China	No catalog number
Radix et Rhizoma Salviae Miltiorrhizae	The First Affiliated Hospital of Changchun University of Traditional Chinese Medicine, China	No catalog number
Radix Scrophulariae	The First Affiliated Hospital of Changchun University of Traditional Chinese Medicine, China	No catalog number
Rat Hcy ELISA Kits	Shanghai Meimian Industrial Company, China	MM-0293R2
RIPA buffer	Shanghai Beyotime Biotechnology company	P0013B