Estrategia de sonda nasogástrica para la fórmula de decocción de la medicina tradicional china en ratones modelo de osteosarcoma

Resumen

El protocolo proporciona un proceso de estandarización detallado de la fórmula de decocción y la técnica de sonda nasogástrica con la decocción de Yiqi Jiedu en el modelo de ratón con osteosarcoma como ejemplo. Describe la protección de los animales y mejora la fiabilidad de los datos de investigación, proporcionando estrategias eficaces para investigar la eficacia terapéutica y los mecanismos moleculares de las fórmulas de decocción in vivo.

Resumen

La fórmula de decocción es la forma de dosificación más utilizada en la medicina tradicional china y se ha aplicado en la práctica clínica durante miles de años mediante administración transoral, que se caracteriza por un efecto rápido, una fácil absorción y un tratamiento individualizado basado en los síndromes específicos de los pacientes. La calidad de la fórmula de decocción es directamente responsable de la eficacia clínica de la medicina tradicional china; Por lo tanto, el proceso de estandarización de la fórmula de decocción es importante para evitar diferencias en la calidad de la decocción causadas por factores subjetivos. Mientras tanto, debido a las limitaciones de la realización de experimentos clínicos, los pequeños animales portadores de enfermedades humanas, como los ratones, se utilizan a menudo en la investigación médica para explorar la eficacia terapéutica y los mecanismos integrales de diferentes intervenciones, incluida la fórmula de decocción para la medicina tradicional china. En consecuencia, como método importante de administración transoral, la técnica de sonda nasogástrica especializada es particularmente importante para evitar posibles daños en el esófago y derrames de fármacos, lo que garantizará que se administre una cantidad igual de medicamento a cada animal modelo, lo que conducirá a resultados experimentales precisos. Además, el método estandarizado de preparación de la fórmula de decocción y la estrategia de sonda nasogástrica calificada son necesarios para proteger el bienestar animal y minimizar el número de animales utilizados. Aquí, informamos un proceso de estandarización detallado de la fórmula de decocción y la técnica de sonda nasogástrica con la decocción de Yiqi Jiedu en un modelo de ratón con osteosarcoma como ejemplo. La eficacia se evaluó por el volumen tumoral. Este protocolo maximizará la protección animal y mejorará la fiabilidad de los datos de investigación, proporcionando así estrategias eficaces para futuras investigaciones sobre la eficacia terapéutica y los mecanismos moleculares de la fórmula de decocción para la medicina tradicional china in vivo.

Introducción

La fórmula de decocción es la forma de dosificación más utilizada de la medicina tradicional china y los medicamentos líquidos ^1,2. La fórmula de decocción de la medicina tradicional china se procesa decociendo las hierbas en agua después de remojarlas, seguidas de un filtrado para desechar las heces.

Debido a que la fórmula de decocción puede individualizarse en función de las necesidades clínicas, especialmente en línea con las características del tratamiento basado en la evidencia en la medicina tradicional china, esta forma farmacéutica por vía transoral se ha aplicado ....

Protocolo

Este protocolo describe la técnica detallada de sonda nasogástrica en ratones modelo de osteosarcoma utilizando la decocción de Yiqi Jiedu como muestra. En este experimento se utilizaron ratones atímicos machos de cuatro semanas de edad (BALB/c desnudos) y se mantuvieron en la sala de cría de grado SPF del Centro de Animales de Laboratorio de la Universidad de Medicina Tradicional China de Shanghai. Todos los experimentos con animales fueron aprobados por el Comité de Manejo de Animales de la Universidad de Medicina Tradicional China de Shanghái, cumplieron con el Código de Ética para Animales de Laboratorio (Número de Aprobación de Ética Animal: PZSHUTCM2304060007) y....

Discusión

La eficacia clínica de las hierbas prescritas en la medicina tradicional china se asocia en gran medida con la dosis administrada y la forma farmacéutica; Por lo tanto, el establecimiento de una estrategia de decocción estandarizada y un proceso de administración calificado son necesarios en la práctica clínica, así como en la mejora de la confiabilidad de los resultados experimentales.

En este estudio, primero proporcionamos una estrategia detallada para la decocción estandarizada de .......

Materiales

Name	Company	Catalog Number	Comments
143B cell line	ATCC	CRL-8303	osteosarcoma cell line
Anesthesia machine	Shenzhen RWD Life Technology Co.,Ltd	R500IP	The Equipment of Anesthesia mice
Automatic cell counter	Shanghai Simo Biological Technology Co., Ltd	IC1000	Counting cells
BALB/c athymic mice	Shanghai SLAC Laboratory Animal Co, Ltd.	Male	Animal
Barbed skullcap herb	Shanghai Yanghetang Traditional Chinese Medicine Tablet Co., Ltd.	20230606	Decoction-ready medicines
Basement Membrane Matrix	Shanghai Uning BioscienceTechnology Co., Ltd	356234, BD, Matrigel	re-suspende cells
Centrifuge tube (15 mL)	Shanghai YueNian Biotechnology Co., Ltd	430790, Corning	Centrifuge the cells
Elbow gavage needle (12-gauge/ 55 mm)	RWD Life Science Co., Ltd.	C21014-12	Component of gastric perfusion device
Gauze	Haishi Hainuo Group Co., Ltd.	LC45	Decoction filter
Ginseng	Shanghai Wanshicheng Pharmaceutical Co., Ltd.	20220704-2	Decoction-ready medicines
Hedyotis diffusa	Shanghai Yanghetang Traditional Chinese Medicine Tablet Co., Ltd.	2023071107	Decoction-ready medicines
isoflurane	Shenzhen RWD Life Technology Co., Ltd	VETEASY	Anesthesia mice
Micro-volume syringe	Shanghai high pigeon industry and trade Co., Ltd	0-50 μL	Inject precise cells into the tibia
Phosphate-buffered saline	Beyotime Biotechnology	ST447	wash the human osteosarcoma cells
Rubber bands	Shanghai Hengfei Biotechnology Co., Ltd.	XPJ	Fixing gauze on the measuring cup
Syringe (1 mL )	Shanghai Mishawa Medical Industry Co., Ltd.	SBM0040	Component of gastric perfusion device
Trypsin (0.25%)	Shanghai YueNian Biotechnology Co., Ltd	25200056, Gibco	trypsin treatment of cells