Stratégie de gavage pour la formule de décoction de la médecine traditionnelle chinoise chez les souris modèles d’ostéosarcome

Résumé

Le protocole fournit un processus de standardisation détaillé de la formule de décoction et de la technique de gavage avec la décoction de Yiqi Jiedu dans le modèle murin d’ostéosarcome comme exemple. Il décrit la protection des animaux et améliore la fiabilité des données de recherche, fournissant des stratégies efficaces pour étudier l’efficacité thérapeutique et les mécanismes moléculaires des formules de décoction in vivo.

Résumé

La formule de décoction est la forme posologique la plus couramment utilisée en médecine traditionnelle chinoise et appliquée dans la pratique clinique depuis des milliers d’années par administration trans-orale, qui se caractérise par un effet rapide, une absorption facile et un traitement individualisé basé sur les syndromes spécifiques des patients. La qualité de la formule de décoction est directement responsable de l’efficacité clinique de la médecine traditionnelle chinoise ; Par conséquent, le processus de normalisation de la formule de décoction est important pour éviter les différences de qualité de décoction causées par des facteurs subjectifs. Pendant ce temps, en raison des limites de la réalisation d’expériences cliniques, les petits animaux porteurs de maladies humaines, tels que les souris, sont souvent utilisés dans la recherche médicale pour explorer l’efficacité thérapeutique et les mécanismes complets de différentes interventions, y compris la formule de décoction pour la médecine traditionnelle chinoise. Par conséquent, en tant que méthode d’administration trans-orale importante, la technique de gavage qualifié est particulièrement importante pour éviter les dommages potentiels à l’œsophage et le déversement de médicaments, ce qui garantira une quantité égale de médicament administrée à chaque animal modèle, conduisant à des résultats expérimentaux précis. De plus, la méthode standardisée de préparation de la formule de décoction et la stratégie de gavage qualifiée sont nécessaires pour protéger le bien-être des animaux et minimiser le nombre d’animaux utilisés. Ici, nous avons rapporté un processus de standardisation détaillé de la formule de décoction et de la technique de gavage avec la décoction de Yiqi Jiedu dans un modèle murin d’ostéosarcome comme exemple. L’efficacité a été évaluée par le volume tumoral. Ce protocole maximisera la protection des animaux et améliorera la fiabilité des données de recherche, fournissant ainsi des stratégies efficaces pour l’étude future de l’efficacité thérapeutique et des mécanismes moléculaires de la formule de décoction pour la médecine traditionnelle chinoise in vivo.

Introduction

La formule de décoction est la forme posologique la plus couramment utilisée de la médecine traditionnelle chinoise et des médicaments liquides ^1,2. La formule de décoction de la médecine traditionnelle chinoise est traitée en décoctant les herbes dans de l’eau après avoir été trempées, puis filtrées pour éliminer la lie.

Parce que la formule de décoction peut être individualisée en fonction des besoins cliniques, en particulier en fonction des caractéristiques du traitement fondé sur des preuves dans la médecine traditionnelle chinoise, cette forme posologique par administ....

Protocole

Ce protocole décrit la technique détaillée du gavage chez des souris modèles d’ostéosarcome en utilisant la décoction Yiqi Jiedu comme échantillon. Des souris athymiques mâles âgées de quatre semaines (BALB/c nude) ont été utilisées dans cette expérience et gardées dans la salle d’élevage de qualité SPF du Laboratory Animal Center de l’Université de médecine traditionnelle chinoise de Shanghai. Toutes les expériences sur les animaux ont été approuvées par la gestion des animaux et le comité de l’Université de médecine traditionnelle chinoise de Shanghai, conformes au Code d’éthique pour les animaux de laboratoire (numéro d’approbation de l’éthique animale : PZSHUTCM23....

Discussion

L’efficacité clinique des herbes prescrites en médecine traditionnelle chinoise est largement associée à la dose administrée et à la forme posologique ; Par conséquent, l’établissement d’une stratégie de décoction standardisée et d’un processus d’administration qualifié sont nécessaires dans la pratique clinique, ainsi que pour améliorer la fiabilité des résultats expérimentaux.

Dans cette étude, nous avons d’abord fourni une stratégie détaillée pour la décoct.......

matériels

Name	Company	Catalog Number	Comments
143B cell line	ATCC	CRL-8303	osteosarcoma cell line
Anesthesia machine	Shenzhen RWD Life Technology Co.,Ltd	R500IP	The Equipment of Anesthesia mice
Automatic cell counter	Shanghai Simo Biological Technology Co., Ltd	IC1000	Counting cells
BALB/c athymic mice	Shanghai SLAC Laboratory Animal Co, Ltd.	Male	Animal
Barbed skullcap herb	Shanghai Yanghetang Traditional Chinese Medicine Tablet Co., Ltd.	20230606	Decoction-ready medicines
Basement Membrane Matrix	Shanghai Uning BioscienceTechnology Co., Ltd	356234, BD, Matrigel	re-suspende cells
Centrifuge tube (15 mL)	Shanghai YueNian Biotechnology Co., Ltd	430790, Corning	Centrifuge the cells
Elbow gavage needle (12-gauge/ 55 mm)	RWD Life Science Co., Ltd.	C21014-12	Component of gastric perfusion device
Gauze	Haishi Hainuo Group Co., Ltd.	LC45	Decoction filter
Ginseng	Shanghai Wanshicheng Pharmaceutical Co., Ltd.	20220704-2	Decoction-ready medicines
Hedyotis diffusa	Shanghai Yanghetang Traditional Chinese Medicine Tablet Co., Ltd.	2023071107	Decoction-ready medicines
isoflurane	Shenzhen RWD Life Technology Co., Ltd	VETEASY	Anesthesia mice
Micro-volume syringe	Shanghai high pigeon industry and trade Co., Ltd	0-50 μL	Inject precise cells into the tibia
Phosphate-buffered saline	Beyotime Biotechnology	ST447	wash the human osteosarcoma cells
Rubber bands	Shanghai Hengfei Biotechnology Co., Ltd.	XPJ	Fixing gauze on the measuring cup
Syringe (1 mL )	Shanghai Mishawa Medical Industry Co., Ltd.	SBM0040	Component of gastric perfusion device
Trypsin (0.25%)	Shanghai YueNian Biotechnology Co., Ltd	25200056, Gibco	trypsin treatment of cells