骨肉腫モデルマウスにおける漢方薬の煎じ薬の強制経口投与戦略

要約

プロトコルは例として骨肉腫のマウス モデルのYiqi Jieduの煎じ薬の煎じ薬の煎じ薬の方式および強制経口の技術の詳しい標準化プロセスを提供する。動物保護について説明し、研究データの信頼性を向上させ、in vivoでの煎じ薬処方の治療効果と分子メカニズムを調査するための効果的な戦略を提供します。

要約

煎じ薬は、伝統的な漢方薬で最も一般的に使用されている剤形であり、経口投与によって何千年もの間臨床診療に適用されており、患者の特定の症候群に基づいて迅速な効果、吸収の容易さ、および個別化された治療を特徴としています。煎じ薬の品質は、伝統的な漢方薬の臨床効果に直接関係しています。したがって、主観的要因によって引き起こされる煎じ薬の品質の違いを避けるために、煎じ薬処方の標準化プロセスが重要です。一方、臨床実験の実施には限界があるため、マウスなどのヒトの病気を媒介とする小動物は、漢方薬の煎じ薬を含むさまざまな介入の治療効果と包括的なメカニズムを調査するために医学研究によく使用されます。したがって、経口投与法として重要な経口投与法として、食道の損傷や薬剤のこぼれを防ぐために熟練した強制経口投与技術が特に重要であり、これにより、各モデル動物に均等な量の薬が投与され、正確な実験結果が得られます。さらに、煎じ薬調製剤の標準化された方法と熟練した強制経口投与戦略は、動物福祉を保護し、使用される動物の数を最小限に抑えるために必要です。ここでは、骨肉腫マウスモデルにおけるYiqi Jiedu煎じ薬を用いた煎じ薬処方と強制経口投与技術の詳細な標準化プロセスを報告しました。有効性は腫瘍体積によって評価された。従ってこのプロトコルは動物保護を最大にし、研究データの信頼性を改善し、生体 内の従来の漢方薬のための煎じ薬の方式の治療効果そして分子メカニズムを将来調査するための有効な作戦を提供する。

概要

煎じ薬は、伝統的な漢方薬と液体の薬の最も一般的に使用される剤形です^1,2。伝統的な漢方薬の煎じ薬は、ハーブを水に浸した後、水で煎じ、濾過してかすを捨てることによって処理されます。

煎じ薬の処方は、特に伝統的な中国医学における証拠に基づく治療の特徴に沿って、臨床的必要性に基づいて個別化できるため、経口投与によるこの剤形は、何千年もの間臨床診療に適用され、具体的でかけがえのない利点があります^3,4.煎じ薬の品質は、臨床効果に直接関係しています。したがって、煎じ薬処方は、有効成分が最大限に抽出され^{、保護されるように}、標準化された煎じ薬法の原則に基づいて調製する必要があります3。一方、煎じ薬対応薬は、臨床診療で使用される生の漢方薬の主な形態です。処方された煎じ薬の品質基準と製造方法は、中国薬局方²の規定に準拠している必要があります。さらに、処方された煎じ薬は、冷たい飲料水に少なくとも30分間浸してから^{、加熱して}特別な医薬品ポットで煎じる必要があります5。研究によると、ほとんどの有効成分は2回煎....

プロトコル

このプロトコルはサンプルとしてYiqi Jieduの煎じ薬の使用によって骨肉腫モデルマウスの詳しい強制経口の技術を記述する。この実験では、生後4週間の雄の胸腺マウス(BALB/cヌード)を使用し、上海中医薬大学実験動物センターのSPFグレードの飼育室で飼育しました。すべての動物実験は、上海中医薬大学動物管理委員会によって承認され、実験動物倫理綱領(動物倫理承認番号:PZSHUTCM2304060007)に準拠し、実験動物に関する国際的な要件に厳密に従って実施されました。

1. 素材

1. 漢方薬(高麗人参42g、 Hedyotis diffusa 52.5g、有刺鉄線スカルキャップハーブ31.5g)、1mLシリンジ、12G/55mm肘強制経口注射針を入手します(図1)。

2.投与量の決定

1. 標準体重60kgの成人の1日投与量は、高麗人参12g、 Hedyotis diffusa 15g、とげのある頭蓋骨ハーブ9gで、合計36gの煎じ薬、つまり0.6gの煎じ薬/ kg体重です。体表面積¹¹によると、標準体重60kgの成体と標準体重25gのマウスの等価用量12倍、低用量6倍....

ディスカッション

伝統的な漢方薬で処方されたハーブの臨床効果は、投与量と剤形に大きく関連しています。したがって、標準化された煎じ薬戦略および熟練した投与プロセスの確立は、臨床診療において、ならびに実験結果の信頼性を向上させるためにも必要である。

この研究では、まず、伝統的な漢方薬の臨床診療で使用される漢方薬の標準化された煎じ薬の詳細な戦略を提供し、?.......

資料

Name	Company	Catalog Number	Comments
143B cell line	ATCC	CRL-8303	osteosarcoma cell line
Anesthesia machine	Shenzhen RWD Life Technology Co.,Ltd	R500IP	The Equipment of Anesthesia mice
Automatic cell counter	Shanghai Simo Biological Technology Co., Ltd	IC1000	Counting cells
BALB/c athymic mice	Shanghai SLAC Laboratory Animal Co, Ltd.	Male	Animal
Barbed skullcap herb	Shanghai Yanghetang Traditional Chinese Medicine Tablet Co., Ltd.	20230606	Decoction-ready medicines
Basement Membrane Matrix	Shanghai Uning BioscienceTechnology Co., Ltd	356234, BD, Matrigel	re-suspende cells
Centrifuge tube (15 mL)	Shanghai YueNian Biotechnology Co., Ltd	430790, Corning	Centrifuge the cells
Elbow gavage needle (12-gauge/ 55 mm)	RWD Life Science Co., Ltd.	C21014-12	Component of gastric perfusion device
Gauze	Haishi Hainuo Group Co., Ltd.	LC45	Decoction filter
Ginseng	Shanghai Wanshicheng Pharmaceutical Co., Ltd.	20220704-2	Decoction-ready medicines
Hedyotis diffusa	Shanghai Yanghetang Traditional Chinese Medicine Tablet Co., Ltd.	2023071107	Decoction-ready medicines
isoflurane	Shenzhen RWD Life Technology Co., Ltd	VETEASY	Anesthesia mice
Micro-volume syringe	Shanghai high pigeon industry and trade Co., Ltd	0-50 μL	Inject precise cells into the tibia
Phosphate-buffered saline	Beyotime Biotechnology	ST447	wash the human osteosarcoma cells
Rubber bands	Shanghai Hengfei Biotechnology Co., Ltd.	XPJ	Fixing gauze on the measuring cup
Syringe (1 mL )	Shanghai Mishawa Medical Industry Co., Ltd.	SBM0040	Component of gastric perfusion device
Trypsin (0.25%)	Shanghai YueNian Biotechnology Co., Ltd	25200056, Gibco	trypsin treatment of cells