This protocol follows any and all animal care and use guidelines and regulations set by IACUC at the University of Cincinnati. This work is funded by NIH/NINDS NS07722 and the Gardner Family Center for Parkinson&#8217;s Disease and Movement Disorders.

Todos los pasos del protocolo siguen el cuidado de los animales y el uso de las directrices y normas establecidas por el IACUC de la Universidad de Cincinnati. 1. Consideraciones generales <ol><li> Si es posible, pruebe los ratones durante su fase activa en el ciclo de oscuridad. Por lo general, realizar pruebas con poca luz y por lo menos 1 hora en la oscuridad ciclo. Sin embargo, si las pruebas en el ciclo de oscuridad no es posible, realice las tres pruebas durante el ciclo de luz. Tenga en cuenta que los tiempos sniffing puede disminuir cuando los ratones se ponen a prueba durante su ciclo de sueño. NOTA: Si bien las pruebas se pueden realizar durante el ciclo de sueño de los ratones pueden mostrar menos interés en el sedimento enterrado, bloques, o cartucho perfumado. </li><li> Con el fin de reducir cualquier efecto de fuera de señales olfativas, llevar un par de bases de guantes en todo momento a lo largo de cada prueba y luego colocar un par de guantes limpios en el par de bases para cada ratón y cada ensayo. Como norma general, en caso de duda, se puso un conjunto de guantes limpios. Tiene una caja de guantes de leerily disponible ya que serán cambiados con frecuencia. NOTA: Nosotros usamos guantes de nitrilo para toda manipulación de animales. </li><li> Limpieza de los materiales de prueba y las jaulas entre los sujetos con un desinfectante / esterilizante es también un paso importante en esta serie de pruebas con el fin de reducir las posibilidades de propagación de enfermedades, así como eliminar las señales olfativas deseadas. </li></ol> 2. Buried Prueba Pellet <ol><li> Al menos dos días antes de la prueba, se registra el peso de cada ratón y luego alimentos restringir a 90% del peso corporal. Antes de la prueba y durante la restricción de alimentos, dar a cada ratón 1-2 piezas de los pellets que se utilizarán durante la prueba (por ejemplo, un pedazo de cereal azucarado). No se salte este paso porque los ratones son neofóbicos con los alimentos y pueden no buscar la pastilla durante la prueba, si no han comido los gránulos previamente. </li><li> En todos los días de prueba, habituar a los ratones durante 1 hora antes de la prueba mediante la colocación de su jaula en la sala de pruebas sin botella de agua o en el alimentador ben. ellos casa en su jaula con sólo una tapa superior del filtro. </li><li> Durante la habituación, llenar un ratón jaula limpia ~ 3 cm de alto con ropa de cama limpia asegurándose de la ropa de cama se distribuye uniformemente a través de la jaula. Establecer un temporizador durante 5 min. </li><li> Después de 1 hr de la habituación, enterrar 1 endulzadas de pellets de cereales 0,5 cm por debajo de la ropa de cama de manera que no es visible. </li><li> Retire el ratón de prueba de su jaula hogar, lugar en el centro de la jaula de ensayo, colocar la tapa superior del filtro en la jaula y iniciar el temporizador. </li><li> Detener el temporizador cuando el ratón descubre el pellet y comienza comerlo. Tenga en cuenta el tiempo para descubrir el sedimento enterrado. </li><li> Si el ratón no encuentra el sedimento en 5 minutos, poner fin al juicio y tenga en cuenta una puntuación de 300 segundos para que el ratón. Mueva el pellet a la parte superior de la ropa de cama por lo que el ratón tiene acceso a ella, y permitir que el ratón para comer la pastilla. </li><li> Tras el juicio, devuelva el ratón a su jaula. </li><li> Vacíe la ropa de cama de la jaula de prueba y limpiar el cedad con una solución de limpieza de habitaciones animal. </li><li> Repita los pasos 2.4 a 2.9 para cada ratón, y cambiar los guantes antes y después de cada ratón. </li><li> Después de todos los ratones se ponen a prueba, les dan suficiente comida para mantenerlos a 90% del peso corporal. </li><li> Realizar pruebas en los días 2-5 del mismo modo que los días de prueba 1 con una excepción; enterrar el precipitado en un lugar diferente en la jaula para cada ensayo. </li><li> El día de la prueba 6, realice el juicio pellet superficie. </li><li> Para el ensayo de pellets superficie, siga el mismo procedimiento que para el día de la prueba 1, pero en lugar de enterrar el sedimento en el lugar de cama en la parte superior de la ropa de cama. Registre el tiempo para el ratón para encontrar y empezar a comer la pastilla. </li></ol> 3. Bloque de prueba <ol><li> Individualmente albergar ratones en jaulas limpias y colocar 5 bloques en la jaula (etiquetado AE), el cambio de los guantes antes de la creación de cada jaula. </li><li> Realice la prueba 24 horas más tarde. Mueva los ratones de prueba a la zona de la prueba, retire la bandeja de botella de agua y de alimentación, y coloque all 5 cuadras de la jaula, junto con un puñado de ropa de cama en una bolsa de plástico etiquetada con la identificación del animal. Coloque la bolsa de plástico sellada en la parte superior de la jaula de la casa del ratón. </li><li> Habituar a los animales en sus jaulas sin la botella de agua, bin alimentador, y los bloques durante 1 hora antes de la prueba. </li><li> Cámbiese los guantes entre cada jaula para que los olores no se intercambian entre los animales / bloques. </li><li> Alinear las jaulas de ratón al lado de otra, sobre una mesa con un mínimo de 10 cm entre cada jaula. Colocar una cámara de vídeo de manera que la parte delantera de la jaula (no el lado largo de la jaula) es a la vista. </li><li> Ajuste el temporizador de 30 segundos y la etiqueta de una tarjeta con los detalles importantes del experimento (fecha, ID del ratón, el juicio, etc). Videotape la etiqueta para 2-3 seg. </li><li> Retire los bloques de AD de la bolsa de plástico con la identificación de ese ratón y colocarlos en el centro de la jaula de manera que sean claramente visibles en la cámara de vídeo. Asegúrese de que hay ~ 1 cm of espacio entre cada uno de los bloques. Coloque la parte superior del filtro nuevo en la jaula. Inicie el temporizador y cintas de vídeo durante 30 segundos. </li><li> Después de 30 segundos, detenga la grabación y quitar los bloques de la jaula y colocarlos de nuevo en la bolsa de plástico. </li><li> Cambie los guantes y luego pasar a la siguiente ratón, repitiendo el mismo procedimiento utilizado para la primera prueba. Haga esto por un total de 6 pruebas para cada ratón asegurándose de que hay un intervalo entre ensayos de ~ 5 min. </li><li> En la prueba de 7 º, siga el mismo procedimiento para los ensayos 1-6 excepto que en lugar de colocar el bloque D de la propia jaula del ratón añadir bloque E de la jaula de otro ratón de manera que el ratón está expuesto a los bloques A, B, y C de su propia jaula de alojamiento y el bloque E de la jaula de otro ratón. Nota en el libro de laboratorio cuyos E bloque cada ratón está expuesto y alternativa en la que el bloque E se coloca en la jaula de cada ratón (por ejemplo, ABCE o AEBC). Tome bloque E de un ratón del mismo sexo, pero no de un cagemate originales. Videotape durante 30 segundos. </li><li> Después de los 7 ensayos, devuelva los animales a una nueva jaula limpia con sus compañeros de jaula originales. Bloques Limpie utilizados en el ensayo con un detergente suave y agua y dejar secar al aire para su uso en pruebas posteriores. </li></ol> 4. habituación / Deshabituación <ol><li> Realizar la prueba de habituación / deshabituación de una manera similar a la prueba de bloque, pero en lugar de utilizar bloques que tienen el olor de un ratón, utilice cartuchos de tejido de algodón que sostienen perfumado con diferentes pares de extractos. </li><li> Siga los pasos 3.1 a 3.4 utilizando un único cartucho, tejido sin perfume en lugar de los bloques. </li><li> Habituar a los ratones en la sala de ensayo. </li><li> Prepare los cartuchos de tejidos perfumados en una habitación separada. Coloque una pequeña bola de algodón en un cartucho limpio y luego añadir 5 l de extracto (por ejemplo, extracto de almendra) en el algodón. Encaje la parte superior del cartucho sobre el algodón y colóquelo en un cuadro dedicado o bolsa etiquetada con ese olor. </li><li> Realice el mismo procedimiento fo una segunda aroma (por ejemplo, extracto de anís). Cambiar los guantes entre el manejo de diferentes aromas. Asegúrese de que la bola de algodón está completamente encerrado en el cartucho de tejido. NOTA: Expuesto fibras de la bola de algodón pueden causar que el animal tiene interés en la bola de algodón para fines de anidación en lugar de la propia esencia. </li><li> A continuación, siga los pasos 3.6 a 3.10 utilizando un cartucho de papel fragrante durante los primeros seis ensayos, y el segundo cartucho tejido perfumada para el séptimo juicio. </li></ol> 5. Análisis de cintas de vídeo <ol><li> Para el bloque y las pruebas de habituación / deshabituación, tiene una persiana rater a condición experimental medir el tiempo olfateando cada bloque, con sniffing definido como contacto nasal con ese bloque. Si se desea, medir otros comportamientos tales como el tiempo para acercarse a la novela bloque (E) durante la prueba de 7 y la actividad total (el número de movimientos realizados a lo largo de la longitud y la anchura de la jaula de alojamiento) durante cada ensayo. Puntuar el tiempo dedicado olfateando unatiempo d acercarse desde la cinta de vídeo utilizando un cronómetro. </li><li> De manera similar, para la prueba de habituación / deshabituación, tienen un evaluador ciego a condición experimental medir el tiempo empleado olfateando el cartucho, tiempo para acercarse al cartucho, y la actividad locomotora. </li></ol> 6. Estadísticas <ol><li> Analizar la prueba pellet enterrados utilizando estadística no paramétrica porque la latencia para encontrar el pellet puntuaciones tienden a mostrar la heterogeneidad de la varianza. Promediar la latencia para localizar el sedimento a través de los días 3-5 y luego comparar entre grupos de ratones usando una prueba U de Mann-Whitney. Del mismo modo, para la parte de pellets superficie de la prueba, analizar la latencia para encontrar el sedimento usando una prueba U de Mann-Whitney para comparar los genotipos. </li><li> Para la prueba de bloque, analizar los datos de prueba de 7 (introducción del bloque de novela con aroma). Típicamente, emplear análisis no paramétricos para tener en cuenta la heterogeneidad de la varianza. Con el fin de analizar las diferencias en el tiempo dedicado olfateando ªbloque novela electrónico, así como el tiempo para acercarse a los bloques para los diferentes grupos experimentales, utilice la prueba U de Mann-Whitney. Utilice la prueba de Rango Firmado Wilcoxon para comparar el tiempo dedicado olfateando la novela bloque de tiempo dedicado a oler los bloques familiares. </li><li> Para la prueba de habituación / deshabituación, conducta paramétrico análisis sobre ensayos 1, 6 y 7, similar a estudios previos 20. Si ratones muestran poco o ningún sniffing, utilice los análisis no paramétricos. </li></ol>

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We have no conflicts of interest.

Cada una de las pruebas que se describen en este estudio miden diferentes aspectos de la función olfativa en ratones. La prueba de pellets enterrado mide la motivación aspecto de alimentos del olfato, poniendo a prueba la capacidad de hambre (alimentos restringido, no privados de alimentos) ratones para detectar una pieza aceptable de cereal endulzada enterrado bajo la ropa de cama. La prueba mide el bloque más del aspecto social de la función olfativa, probando la capacidad de los ratones para discriminar entre su propio olor y la de una misma especie. La prueba de habituación / deshabituación evalúa la capacidad del ratón para discriminar entre olores inocuos conocidos y novedosos,. El uso de múltiples pruebas es importante la hora de caracterizar un nuevo modelo, ya que las anomalías en la motivación de alimentos o el miedo pueden contribuir a las diferencias observadas en los ratones mutantes en comparación con los controles. Por ejemplo, si sólo se realiza la prueba de bloque y la disminución de la inhalación del bloque que se ha observado es el olor de otro ratón, no está claro si hay una Olfactdéficit de memoria o una mejor respuesta de miedo a la misma especie que puede conducir a la evitación de ese bloque. Cuando se realizan varias pruebas y los déficits se observan en todas las pruebas, que apoya firmemente una interpretación de deterioro olfativo. Sin embargo, si se observan diferencias en una sola prueba, pero no los otros, entonces puede haber un deterioro olfativo más sutil pero será esencial para descartar otras explicaciones (por ejemplo, el miedo mayor o menor motivación de los alimentos). Factores importantes adicionales a tener en cuenta al probar ratones funciones olfativas incluyen la cepa de fondo y el sexo de los ratones. Diferentes cepas fondo genético (es decir, C57BL / 6, DBA, etc) pueden tener profundos efectos en el comportamiento del ratón, por lo tanto, se recomienda adaptar cada protocolo en ratones de tipo salvaje de la misma fondo antes de realizar todo el experimento. También se recomienda que los ratones macho y hembra comprobarse por separado el uno del otro porque el sistema olfativo masculino es altomente sensible a las hembras en la detección de celos y olfativa de una hembra en estro podría interferir con el rendimiento en las tres pruebas. Algunos pasos son absolutamente críticos para seguir al probar el olfato en ratones. Es importante ser consciente de los olores el experimentador está introduciendo a los animales. El uso de guantes para los procedimientos es se requiere cambio esencial y frecuente de guantes entre los animales. Siempre es una buena práctica que el experimentador no usar colonia o perfume en días de exámenes olfato. Mientras que algunas partes del procedimiento son inflexibles, hay otras partes que pueden ser modificados y adaptados sin reducir la validez o la sensibilidad de la prueba. Por ejemplo, el número de ensayos de habituación puede aumentarse o disminuirse dependiendo de la cepa de ratones se está probando y la rapidez con que se habitúan a los estímulos. La principal limitación de estas pruebas es que todos ellos están impulsados ​​por una cierta forma de motivación, ya sea comida o social, por lo quedifícil descartar por completo las anomalías en la motivación como una explicación cuando una alteración de la respuesta observada. Esto puede ser minimizado mediante el análisis de parámetros adicionales, tales como la actividad durante las pruebas y el tiempo de acercarse a los estímulos. Una vez dominado, las pruebas se pueden utilizar fácilmente al examinar el fenotipo de modelos novedosos ratón de la enfermedad neurodegenerativa. Además, las pruebas que tienen la mayor potencia pueden ser incluidos en los estudios preclínicos de prueba posibles terapias (para un ejemplo véase la ref. 25).

Disfunción olfativa está vinculada a una serie de trastornos neurodegenerativos como la enfermedad de Parkinson (PD), enfermedad de Alzheimer, y enfermedad de Huntington 1. En la EP, alteraciones olfatorias incluyen déficits en la identificación del olor, la detección y la discriminación y se encuentran hasta en el 70-95% de los pacientes 2-5. Estos déficits pueden preceder a los síntomas motores de la EP por el cardenal de hasta 4 años, lo que indica que la disfunción olfativa puede ser señal de las primeras etapas de la DP 6-10. La aparición temprana de los déficits olfativos en la EP ha generado un gran interés en la disfunción olfativa y los mecanismos subyacentes implicados. En estudios preclínicos en roedores, disfunción olfativa podría ser una medida de resultado sensible para predecir el potencial terapéutico de nuevas estrategias terapéuticas. Muchas pruebas han sido diseñados y ampliamente utilizado para caracterizar alteraciones sensoriomotoras en modelos de roedores de PD y de TESt el potencial terapéutico de los tratamientos novedosos 11-15. A pesar de que los déficits olfativos están bien documentados en la EP, la función olfativa no se ha medido rutinariamente en muchos modelos. Esta visión está cambiando, aunque con el descubrimiento de formas genéticas de la EP y la noción más aceptada que la EP es una enfermedad sistémica que afecta a algo más que la función sensoriomotora. Actualmente, hay numerosos estudios en modelos genéticos de ratón de la EP y otros trastornos neurodegenerativos que ahora incluyen análisis de olfato en la caracterización 16-24. Dado el creciente interés de la disfunción olfatoria en los trastornos neurodegenerativos, hemos tratado de reunir una serie de pruebas olfativas que pueden ser utilizados para caracterizar nuevos modelos de neurodegeneración, así como las pruebas posibles terapias modificadoras de la enfermedad en los estudios preclínicos. Los ensayos descritos en el presente estudio se han utilizado tanto en la caracterización y estudios preclínicos 18,25. Las pruebas highlighted en este estudio se ha demostrado que ser sensible en la detección de la disfunción olfativa en una utilizado con frecuencia alfa-sinucleína modelo de ratón que sobreexpresa de la enfermedad de Parkinson 18. Ellos incluyen la prueba enterrado pellet 26,27, una versión adaptada de la prueba de bloque de 23,24,28,29, y la prueba de habituación / deshabituación 30. Es importante tener en cuenta que hay varias adaptaciones de las pruebas descritas en este estudio que son medidas sensibles de la función olfativa en ratones, los que se destacan en este estudio son las pruebas de nuestro laboratorio tiene la mayor experiencia con y utilizar de forma rutinaria.

<table><tbody><tr><td>Cap&#039;n Crunch</td><td>Quaker Oats</td><td>30000065310</td><td></td></tr><tr><td>Wooden Blocks</td><td>Lara&#039;s Crafts</td><td>10144</td><td></td></tr><tr><td>Almond Flavor Extract</td><td>Kroger</td><td>011110664716</td><td></td></tr><tr><td>Anise Flavor Extract</td><td>Kroger</td><td>011110615619</td><td></td></tr><tr><td>Banana Flavor Extract</td><td>Kroger</td><td>011110669919</td><td></td></tr><tr><td>Coconut Flavor Extract</td><td>Kroger</td><td>011110669889</td><td></td></tr><tr><td>Lemon Flavor Extract</td><td>Kroger</td><td>011110669957</td><td></td></tr><tr><td>Orange Flavor Extract</td><td>Kroger</td><td>0011110669964</td><td></td></tr><tr><td>Tissue Cartridges</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>Z672122-500EA</td><td>Manufactured by Simport no: M490-2</td></tr><tr><td>Cotton Balls</td><td>Kroger</td><td>11110793119</td><td></td></tr><tr><td>Mouse Cages</td><td>Ancare</td><td></td><td>19 x 29 x 12.7 cm</td></tr><tr><td>Camcorder</td><td>Sony</td><td>HDR-HC9</td><td></td></tr><tr><td>MiniDV Tapes</td><td>Sony DVC premium</td><td>27242523432</td><td>60 minute long play</td></tr></tbody></table>

olfactory assays for mouse models of neurodegenerative disease

In many neurodegenerative diseases and particularly in Parkinson&#8217;s disease, deficits in olfaction are reported to occur early in the disease process and may be a useful behavioral marker for early detection. Earlier detection in neurodegenerative disease is a major goal in the field because this is when neuroprotective therapies have the best potential to be effective. Therefore, in preclinical studies testing novel neuroprotective strategies in rodent models of neurodegenerative disease, olfactory assessment could be highly useful in determining therapeutic potential of compounds and translation to the clinic. In the present study we describe a battery of olfactory assays that are useful in measuring olfactory function in mice. The tests presented in this study were chosen because they measure olfaction abilities in mice related to food odors, social odors, and non-social odors. These tests have proven useful in characterizing novel genetic mouse models of Parkinson&#8217;s disease as well as in testing potential disease-modifying therapies.

Los pellets, bloques, y las pruebas de habituación / deshabituación enterrados son evaluaciones altamente ventajosas del olfato en ratones. El uso de estas pruebas, hemos encontrado cambios significativos en el olfato en varios modelos de ratón genético de la enfermedad de Parkinson, incluyendo sobreexpresión de alfa-sinucleína (Thy1-Asyn) 18 y ratones knockout ATP13A2. Ambos ratones knockout Thy1-Asyn y ATP13A2 tardan más en encontrar el pellet enterrados que los controles 18. Figuras 1-3 muestran los datos recogidos de los ratones de tipo salvaje y ATP13A2 knockout. En la prueba de sedimento enterrado, ratones knockout muestran un aumento ATP13A2 latencia para encontrar el sedimento enterrado en comparación con los ratones de control de tipo salvaje (Figura 1). En la prueba de bloque, tanto de tipo salvaje y ratones knockout ATP13A2 olfatean la novela cuadra de la jaula de otro ratón en comparación con manzanas de su propia jaula (Figura 2). En los ratones de tipo salvaje prueba habituación / deshabituación mostrar habituación a un olor y<html> luego aumentó oler cuando una novela olor se introduce (Figura 3). <img alt="Figura 1" fo:content-width="5in" src="/files/ftp_upload/51804/51804fig1highres.jpg" width="500" /> Figura 1. Buried pellet de prueba. Latencia para encontrar el pellet en de tipo salvaje (n = 10) y ATP13A2 KO (n = 14) a 20-27 m de edad. * P &lt;0,05, Mann-Whitney U. <img alt="Figura 2" fo:content-width="5in" src="/files/ftp_upload/51804/51804fig2highres.jpg" width="500" /> Figura 2. prueba Tiempo entre calzos olfateando la novela bloque (E) en la prueba de bloque de tipo salvaje (n = 10) y ATP13A2 KO (n = 12) en ratones hembra a 20 -. 27m de edad. ΔΔ representa p &lt;0,01 en comparación con los bloques A, B, y C de la misma genotipo. Mann-Whitney U. &quot;Src =&quot; / files / ftp_upload / 51804 / 51804fig3highres.jpg &quot;width =&quot; 500 &quot;/&gt; Figura 3. prueba de habituación / deshabituación. Tiempo olfateando un cartucho perfumado en ratones de tipo salvaje media (9 m edad, n = 7) a través de 6 pruebas y la introducción de un cartucho con una novela olor a juicio 7.

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Olfactory Assays for Mouse Models of Neurodegenerative Disease

Impairment in olfactory function is a common feature in many neurodegenerative disorders including Parkinson, Alzheimer, and Huntington diseases. In the present article, we describe a set of tests for assessing olfaction discrimination and detection in mice that can be used to measure olfactory abilities in mouse models of neurodegenerative diseases.

Los ensayos olfativos para modelos de ratón de Enfermedades Neurodegenerativas

In many neurodegenerative diseases and particularly in Parkinson&#8217;s disease, deficits in olfaction are reported to occur early in the disease process ...

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21.9K vistas.  University of Cincinnati. Impairment in olfactory function is a common feature in many neurodegenerative disorders including Parkinson, Alzheimer, and Huntington diseases. In the present article, we describe a set of tests for assessing olfaction discrimination and detection in mice that can be used to measure olfactory abilities in mouse models of neurodegenerative diseases.

Video: Olfactory Assays for Mouse Models of Neurodegenerative Disease

Assessment of Sensorimotor Function in Mouse Models of Parkinson's Disease

Sensitive and reliable behavioral outcome measures are essential to the evaluation of potential therapeutic treatments in preclinical trials for many neurodegenerative diseases. In Parkinson's disease, sensorimotor tests sensitive to varying degrees of nigrostriatal dysfunction are fundamental for testing the efficacy of potential therapeutics. Reliable and quite elegant sensorimotor measures exist for rats, however many of these tests measure sensorimotor asymmetry within the rat and are not entirely suitable for the newer genetic mouse models of PD. We have put together a battery of sensorimotor tests inspired by the sensitive tests in rats and adapted for mice. The test battery highlighted in this study is chosen for a) its sensitivity in a wide variety of mouse models of PD, b) its ease in implementing into a study, and c) its low expense. These tests have proven useful in characterizing novel genetic mouse models of PD as well as in testing potential disease-modifying therapies.

In Parkinson's disease and movement disorders in general, sensitive and reliable behavioral assays are essential for testing novel potential therapeutics. Here, we describe a manageable battery of sensorimotor tests for mice that are sensitive to varying degrees of injury to the nigrostriatal system and useful for preclinical studies.

Evaluación de la función sensoriomotora en modelos de ratón de la enfermedad de Parkinson

Sensitive and  reliable behavioral outcome measures are essential to the evaluation of  potential therapeutic treatments in preclinical trials for many  ...

Investigación

Comportamiento

Testing for Odor Discrimination and Habituation in Mice

This video demonstrates a technique to establish the presence of a normally functioning olfactory system in a mouse. The test helps determine whether the mouse can discriminate between non-social odors and social odors, whether the mouse habituates to a repeatedly presented odor, and whether the mouse demonstrates dishabituation when presented with a novel odor. Since many social behavior tests measure the experimental animal&#8217;s response to a familiar or novel mouse, false positives can be avoided by establishing that the animals can detect and discriminate between social odors. There are similar considerations in learning tests such as fear conditioning that use odor to create a novel environment or olfactory cues as an associative stimulus. Deficits in the olfactory system would impair the ability to distinguish between contexts and to form an association with an olfactory cue during fear conditioning. 
In the odor habitation/dishabituation test, the mouse is repeatedly presented with several odors. Each odor is presented three times for two minutes. The investigator records the sniffing time directed towards the odor as the measurement of olfactory responsiveness. A typical mouse shows a decrease in response to the odor over repeated presentations (habituation). The experimenter then presents a novel odor that elicits increased sniffing towards the new odor (dishabituation). After repeated presentation of the novel odor the animal again shows habituation. This protocol involves the presentation of water, two or more non-social odors, and two social odors. In addition to reducing experimental confounds, this test can provide information on the function of the olfactory systems of new knockout, knock-in, and conditional knockout mouse lines.

This manuscript describes a protocol to examine the olfactory system of rodents. The olfactory habituation/dishabituation test will allow investigators to determine whether a mouse habituates to a repeatedly presented odor and whether the mouse demonstrates dishabituation when presented a novel odor.

Las pruebas para detectar olor Discriminación y habituación en ratones

This video demonstrates a technique to establish the presence of a normally functioning olfactory system in a mouse. The test helps determine whether the ...

Assaying Locomotor, Learning, and Memory Deficits in Drosophila Models of Neurodegeneration

Advances in genetic methods have enabled the study of genes involved in human neurodegenerative diseases using Drosophila as a model system1. Most of these diseases, including Alzheimer's, Parkinson's and Huntington's disease are characterized by age-dependent deterioration in learning and memory functions and movement coordination2. Here we use behavioral assays, including the negative geotaxis assay3 and the aversive phototaxic suppression assay (APS assay)4,5, to show that some of the behavior characteristics associated with human neurodegeneration can be recapitulated in flies. In the negative geotaxis assay, the natural tendency of flies to move against gravity when agitated is utilized to study genes or conditions that may hinder locomotor capacities. In the APS assay, the learning and memory functions are tested in positively-phototactic flies trained to associate light with aversive bitter taste and hence avoid this otherwise natural tendency to move toward light. Testing these trained flies 6 hours post-training is used to assess memory functions. Using these assays, the contribution of any genetic or environmental factors toward developing neurodegeneration can be easily studied in flies.

Assaying Locomotor, Learning, and Memory Deficits in Drosophila Models of Neurodegeneration

Behavior assays for measuring locomotor functions, learning, and memory abilities in Drosophila.

Locomotor ensayo, aprendizaje, memoria y déficit en Drosophila Los modelos de neurodegeneración

Advances in genetic methods have enabled the study of genes involved in human neurodegenerative diseases using Drosophila as a model system1. Most of ...

Neurociencias

Simple and Computer-assisted Olfactory Testing for Mice

Olfaction is highly conserved among species and is required for reproduction and survival.
In humans, olfaction is also one of the senses that is affected with aging and is a strong predictor of neurodegenerative diseases. Thus, olfaction testing is used as a non-invasive diagnostic method to detect neurological deficits early on. In order to understand the mechanisms underlying olfactory network susceptibility, olfactory research in rodents has gained momentum in the past decade.
Here, we present a very simple, time efficient and reproducible olfactory testing method of innate odor perception and sensitivity in mice without the need of any prior food or water restriction. The tests are performed in a familiar environment to the mice, require only the scents and a 2 min session of odorant exposure. The analysis is performed, post-hoc, using computer-assisted commands on ImageJ and can be, therefore, carried out from start to end by one researcher.
This protocol does not require any special hardware or setup and is indicated for any laboratory interested in testing olfactory perception and sensitivity.

We present a simple and unbiased olfactory test in mice. With this protocol olfactory discrimination, preference, avoidance and sensitivity to a novel odor as compared to water can be assessed in single behavioral sessions. This method is indicated for a single experimenter and analysis is based on computer-assisted video processing.

Simple y asistida por ordenador de pruebas olfativas para Ratones

Olfaction is highly conserved among species and is required for reproduction and survival.
In humans, olfaction is also one of the senses that is affected ...

Olfactory Behavioral Testing in the Adult Mouse

The rodent olfactory system is of increasing interest to scientists, studied, in part, in systems biology because of its stereotyped, yet accessible circuitry. In addition, this area's unique ability to generate new neurons throughout an organism's lifetime makes it an attractive system for developmental and regenerative biologists alike. Such interest necessitates a means for a quick, yet reliable assessment of olfactory function. Many tests of olfactory ability are complex, variable or not specifically designed for mice. Also, some tests are sensitive to memory deficits as well as defects in olfactory abilities, confounding obtained results.
Here, we describe a simple battery of tests designed to identify defects in olfactory sensitivity and preference. First, an initial general health assessment allows for the identification of animals suitable for further testing. Second, mice are exposed to various dilutions of scents to ascertain whether there is a threshold difference. Third, mice are presented with various scents, both attractive and aversive, that allow for the assessment of olfactory preference. These simple studies should make the initial characterization of olfactory behavior accessible for labs of varied resources and expertise.

Fundamental, yet unique properties of the rodent olfactory system have led to its increasing study among biologists. A relatively simple assessment of its function is then also needed. Here we describe sensitive tests for the characterization of mouse olfactory sensitivity and preference.

Pruebas del comportamiento olfativo en el ratón adulto

The rodent olfactory system is of increasing interest to scientists, studied, in part, in systems biology because of its stereotyped, yet accessible ...

Biología

Assessment of Social Transmission of Food Preferences Behaviors

Olfactory recognition deficits are suggested to be able to serve as clinical marker to differentiate Alzheimer&#39;s disease (AD) subjects from healthy aging groups. For example, olfactory dysfunction in AD can present as impairment in olfactory recognition, emerging during early stages of the disease and worsening while the disease progresses. The social transmission of food preferences (STFP) task is based on a rudimentary form of communication between rodents concerning distant foods dependent on the transmission of olfactory cues. Healthy wild-type mice would prefer to eat a novel, flavored food that was previously cued by a conspecific, and this food preference would be hampered in transgenic AD mice, such as the APP/PS1 model. Indeed, a strong preference for the cued food in C57Bl6/J mice of 3 months of age was found, and this was reduced in 3 months old transgenic APP/PS1 mice. In summary, STFP task could be a powerful measure to be integrated in present subclinical detection assays of AD.

This paper presents a protocol for the investigation of social transmission of food preference in mice. The advantages and possible applications for this procedure, for instance, in detecting early changes in AD mouse models, are highlighted. To conclude, interpretation of the results in light of critical details are discussed.

Evaluación de la transmisión Social de comportamientos de preferencias de alimentos

Olfactory recognition deficits are suggested to be able to serve as clinical marker to differentiate Alzheimer&#39;s disease (AD) subjects from healthy ...

Evaluación del deterioro olfativo en ratones debido a la inhalación de contaminantes ambientales

Studying the Effects of Inhaled Environmental Pollutants on Olfactory Function in Mice

Olfactory impairment is a significant public health problem and independently predicts the risk of neurodegenerative diseases. Inhaled environmental pollutants exposure may impair olfaction; thereby, there is an urgent need for methods to evaluate the effects of inhaled environmental pollutants exposure on olfaction. Mice are ideal models for olfactory experiments because of their highly developed olfactory system and behavioral characteristics. To assess the effects of inhaled environmental pollutants exposure on olfactory function in mice, a detailed buried food test and social odor discrimination experiment is provided, including the experiment preparation, the selection and construction of experimental facilities, the testing process, and indexes of time. Meanwhile, timekeeping equipment, operational details, and the experimental environment are discussed to ensure the success of the assay. Zinc sulfate is used as the treatment to demonstrate the feasibility of the experimental approach. The protocol provides a simple and clear operational process for assessing the effects of inhaled environmental pollutants on olfactory function in mice.

Autor destacado: Evaluación de los efectos olfativos de los contaminantes en el aire: alimentos enterrados y pruebas de olor social

This paper provides a detailed description of the buried food test and social odor discrimination experiment to assess the effects of inhaled environmental pollutants exposure on olfactory function in mice.

Estudio de los efectos de los contaminantes ambientales inhalados sobre la función olfativa en ratones

Olfactory impairment is a significant public health problem and independently predicts the risk of neurodegenerative diseases. Inhaled environmental ...

Medio ambiente

<meta charset="utf8"></head><body>Diseño de un olfatómetro flexible y rentable para experimentos olfativos con roedores

Constructing an Olfactometer for Rodent Olfactory Behavior Studies

The use of olfactometers to study rodent behavior and brain activity during olfactory tasks is crucial for understanding brain circuits. These sophisticated devices allow researchers to precisely control and deliver odor stimuli, enabling the investigation of complex olfactory processes in rodents. Although commercially available olfactometers are convenient, they present challenges when technical issues arise, often requiring costly assistance and potentially disrupting research timelines. This article details the construction of a custom olfactometer specifically designed for mouse olfactory behavior experiments, providing a comprehensive list of parts and step-by-step instructions. The olfactometer is controlled through MATLAB, offering a user-friendly interface for researchers. Importantly, the open-source code allows users to modify and adapt the system, tailoring behavioral tasks to meet specific experimental needs. Building a customized olfactometer empowers users with the knowledge and capability to perform custom experimental design and troubleshooting independently, saving both time and resources. This approach not only enhances research flexibility but also fosters a deeper understanding of the equipment's functionality, ultimately leading to more robust and reliable olfactory studies in rodents.

<meta charset="utf8"></head><body>Construcción de un olfatómetro para estudios de comportamiento olfativo de roedores, espectroscopia de infrarrojo cercano, estudio de hiperescaneo en asesoramiento

This protocol describes the construction of an olfactometer for go/no-go olfactory behavior experiments. Step-by-step instructions, along with images, are provided to ensure the successful construction of the olfactometer. Information for troubleshooting issues encountered during the process is also included.

Los ensayos olfativos para modelos de ratón de Enfermedades Neurodegenerativas

Resumen

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Capítulos en este video

Evaluación de la función sensoriomotora en modelos de ratón de la enfermedad de Parkinson

Las pruebas para detectar olor Discriminación y habituación en ratones

Locomotor ensayo, aprendizaje, memoria y déficit en Drosophila Los modelos de neurodegeneración

Simple y asistida por ordenador de pruebas olfativas para Ratones

Pruebas del comportamiento olfativo en el ratón adulto

Evaluación de la transmisión Social de comportamientos de preferencias de alimentos

Estudio de los efectos de los contaminantes ambientales inhalados sobre la función olfativa en ratones

Estudio de los efectos de los contaminantes ambientales inhalados sobre la función olfativa en ratones

Estudio de los efectos de los contaminantes ambientales inhalados sobre la función olfativa en ratones

Construcción de un olfatómetro para estudios de comportamiento olfativo de roedores