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Immunology and Infection

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Construcción de mutantes en el serotipo 1 Streptococcus pneumoniae cepa 519/43

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•

06:06 min

•

September 11th, 2020

DOI :

10.3791/61594-v

September 11th, 2020

•

Vanessa S. Terra¹, Charles D. Plumptre², Emma C. Wall³, Jeremy S. Brown², Brendan W. Wren¹

¹Faculty of Infections and Tropical Diseases, Department of Infection Biology, London School of Hygiene and Tropical Medicine, ²Division of Medicine, University College London, ³Division of Infection and Immunity, University College London UCL

Resumen

Aquí, describimos una cepa 519/43 del serotipo 1 de S. pneumoniae que puede modificarse genéticamente utilizando su capacidad para adquirir ADN de forma natural y un plásmido suicida. Como prueba de principio, se hizo un mutante isogénico en el gen de la neumolisina (ply).

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Capítulos en este video

0:05

Introduction

0:35

Generation of Plasmid pSD1 and Chemical Transformation of E. coli Dh5α

2:03

Plasmid DNA Extraction, Restriction Digestion of pSD1 and Spectinomycin Gene, and Assembly of pSD2

3:03

Transformation of S. pneumoniae Strain 519/43

4:46

Results: Confirmation of Mutagenesis

5:43

Conclusion

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