Establecimiento de paro circulatorio hipotérmico profundo en rata. Paro circulatorio hipotérmico profundo, DHCA se aplica rutinariamente durante cirugías de cardiopatía congénita compleja y enfermedad del arco aórtico. El presente estudio tiene como objetivo proporcionar un método para establecer DHCA en ratas.
Los protocolos recibieron una revisión institucional y obtuvieron la aprobación del Comité Institucional de Cuidado y Uso de Animales, Hospital Fuwai, Academia China de Ciencias Médicas. Trabajos preparatorios. Asegúrese de que los circuitos CPB contengan un depósito modificado de gotero morfo, bomba de rodillos, intercambiador de calor, oxigenador de membrana, tubo de conexión y un tanque de agua conectado al circuito y produzca 12 mililitros de hidroxialmidón con un mililitro de heparina sódica y un mililitro de solución salina que prepare el circuito con una solución de cebado de 40 mililitros con la bomba de rodillos girando suavemente.
Dos, anestesia y canulación Conecte el tubo con el ventilador y los parámetros laterales. Coloque una manta calefactora eléctrica y la derecha y mire hacia la derecha con cinta adhesiva.
Aplique ungüento oftálmico en los ojos para evitar la sequedad. Afeite el pelo en la región inguinal derecha, la región cervical derecha y la cola con la afeitadora. Luego desinfecte la piel con aldehído y alcohol.
Corte la piel y la región inguinal izquierda y disecte el músculo y el tejido blando del hueso para exponer la vena femoral izquierda y la arteria. Separe la arteria cuidadosamente. Catéter intravenoso calibre 22 en la arteria femoral izquierda.
Arteria ligada y catéter con seda. Use solución salina que contenga heparina para enjuagar la cánula y evitar la coagulación. Conecte el catéter con el sensor de prensa para controlar la presión arterial.
Corte la piel de la cola y luego use un bisturí para cortar la especie superficial de la arteria de la cola para exponer la arteria de la cola que se encuentra en el medio del campo quirúrgico. Canular la arteria de la cola con el catéter intravenoso calibre 22. Arteria de liga y catéter con seda.
Use solución salina que contenga heparina para enjuagar el catéter y evitar la coagulación. Corte la piel de la yugular derecha de la vena y luego separe el músculo y el tejido para exponer la vena. Inserte un catéter intravenoso multiedad casero calibre 16 en la yugular externa derecha de la vena y colóquelo cuidadosamente en la vena cava inferior derecha o en la aurícula derecha.
Administre heparina sódica donde la vena externa derecha cubra cada región canulada con bolas húmedas para evitar la contaminación. Tres, conecte el circuito con el catéter en la arteria de la cola y mantenga la bomba baja de uno a dos mililitros por minuto. Luego conecte el reservorio con el catéter en la vena yugular externa derecha.
Asegúrese de que siempre haya un nivel sanguíneo de aproximadamente un centímetro en el depósito. Encienda el tanque de agua y ajuste la temperatura del agua a 37 grados centígrados primero. Después de que la presión arterial sea estable, aumente suavemente la bomba de flujo hasta 80 a 100 mililitros por minuto.
Cuatro, enfriamiento. Ajuste la temperatura ambiente a alrededor de 20 grados centígrados. Ponga cubitos de hielo en estos guantes desechables y luego colóquelos en la cabeza y los lados correctos.
La temperatura del tanque se sugirió en tiempo real de acuerdo con la temperatura rectal del arroz. Cambie los parámetros relevantes del ventilador correctamente de acuerdo con los resultados del análisis de gases en sangre. Cinco, hipotermia profunda paro circulatorio.
Luego, la temperatura rectal desciende de 15 a 20 grados centígrados. Cambie la bolsa de hielo y deseche los guantes para garantizar el mantenimiento de la hipotermia profunda durante el paro circulatorio. Detenga la bomba de rodillos.
Mantenga el reservorio en contacto con el medio ambiente y drene la sangre lentamente desde la vena yugular externa hasta el reservorio. Preste atención a la reforma de la presión arterial. Después de que no haya presión arterial ni latidos cardíacos, detenga el drenaje y mantenga el reservorio cerrado.
Apague el ventilador. Seis, calentamiento y reperfusión. Retire todos los guantes desechables y aumente la temperatura ambiente a 25 grados centígrados.
Restaure la interventilación de oxígeno de memoria mientras mantiene el recorte del tubo de drenaje venoso. Encienda la bomba de rodillos para asegurarse de que la sangre en el depósito regrese lentamente al cuerpo correcto. Encienda el ventilador después de que el nivel de sangre en el depósito permanezca un centímetro.
Usar el tubo de drenaje y drenar la sangre desde la aurícula derecha hasta el reservorio lentamente. Encienda la lámpara de calefacción, la almohadilla térmica y el tanque de agua. Ajuste la temperatura del tanque de agua a 25 grados centígrados.
Luego ajústelo a la temperatura izquierda oportunamente. Retire la lámpara de calefacción después de que la temperatura rectal haya vuelto a 34 grados centígrados. Siete, destete de CPB.
Reduzca lenta y gradualmente el rodillo del caudal de la bomba y ajuste la velocidad del género de la vena en la velocidad de flujo reducida a un mililitro por minuto. Mantener el depósito en contacto con el medio ambiente. Infundir la sangre restante en un circuito con un caudal de un mililitro por minuto.
Detenga la oxigenación de la memoria y la bomba de rodillos. Eutanasia después de un período de ventilación mecánica y anestesia profunda. Resultados representativos.
Como grupo de control, la temperatura normal CPB, NtCPB, rata. Sin el paro circulatorio mostró una presión arterial media estable PAM y temperatura corporal durante todo el procedimiento. Mientras que la PAM de las ratas DHCA disminuyó durante el paro cardíaco.
La temperatura de las ratas DHCA bajó rápidamente durante la fase de enfriamiento y se recuperó gradualmente durante la fase giratoria. El destete del circuito de DHCA la temperatura de las ratas DHCA volvió a la normalidad. Los datos anteriores indicaron que nuestro procedimiento DHCA imitó la temperatura real y los cambios de PAM de los pacientes en las clínicas.
El efecto del procesador DHCA y el aumento se investigó mediante análisis de gases en sangre. Después del contacto de sangre total con la solución primaria, la concentración de hemoglobina fue superior a seis gramos por decilitter en ambos grupos. El destete de la superficie de DHCA, aumentó a nueve gramos por decilitter debido a la reinfusión de la sangre restante en el circuito CPB hacia la derecha.
El hematocrito, HCT, mostró una tendencia similar a HB. Después de la reperfusión de DHCA, el ácido lactato aumentó rápidamente, lo que fue más pronunciado en el grupo de DHCA. El pH disminuyó después del procedimiento DHCA, que probablemente fue el resultado de la acumulación de ácido lactato. Durante todo el experimento, la concentración de sodio, cloruro, iones de potasio y glucosa no mostró diferencias significativas en cada punto 10.
Este resultado sugiere que DHCA solo indujo el aumento de ácido lactato, pero no influyó en el pH de la sangre y la concentración de hemoglobina, hematocrito, iones de sodio, iones cloruro, iones de potasio y glucosa. Para evaluar el impacto de DHCA en la autofagia neuronal, utilizamos el electromicroscopio de transmisión y sorprendentemente encontramos y aumentamos el número de autofagosomas en el hipocampo de ratas DHCA. Los datos anteriores indicaron que nuestro modelo DHCA imitó la temperatura real y los cambios de MAP de los pacientes en las clínicas.
Este modelo se puede aplicar para investigar el síndrome de respuesta inflamatoria sistémica, la neuroinflamación, etc.
