쥐에서 깊은 저체온 순환 정지의 확립. 심부 저체온 순환 정지, DHCA는 복잡한 선천성 심장병 및 대동맥 궁 질환의 수술 중에 일상적으로 적용됩니다. 본 연구는 래트에서 DHCA를 확립하는 방법을 제공하는 것을 목표로 한다.
이 프로토콜은 기관 검토를 받았으며 중국 의학원 Fuwai 병원의 기관 동물 관리 및 사용위원회의 승인을 받았습니다. 준비 작업. CPB 회로에 모프 스포이드, 롤러 펌프, 열교환기, 멤브레인 산소 공급기, 연결 튜브 및 회로를 연결하는 물 탱크로 수정된 저장소가 포함되어 있는지 확인하고 롤러 펌프가 부드럽게 회전하는 상태에서 40밀리리터 프라이밍 용액으로 12밀리리터의 하이드록시 전분과 1밀리리터의 식염수로 회로를 프라이밍합니다.
둘째, 마취와 캐뉼러. 튜브를 인공 호흡기 및 측면 매개 변수와 연결하십시오. 전기 난방 담요와 오른쪽을 놓고 테이프로 오른쪽을 향하십시오.
건조를 방지하기 위해 눈에 안과 용 연고를 바르십시오. 면도기로 오른쪽 사타구니 부위, 오른쪽 자궁 경부 및 꼬리의 머리카락을 면도하십시오. 그런 다음 알데히드와 알코올로 피부를 소독하십시오.
피부와 왼쪽 사타구니 부위를 자르고 근육과 조직 연골을 해부하여 왼쪽 대퇴 정맥과 동맥을 노출시킵니다. 동맥을 조심스럽게 분리하십시오. 22 게이지 정맥 카테터를 왼쪽 대퇴 동맥으로 캐뉼러합니다.
결찰 된 동맥과 실크 카테터. 응고를 피하기 위해 캐뉼라를 플러시하기 위해 헤파린이 함유 된 식염수를 사용하십시오. 카테터를 프레스 센서와 연결하여 혈압을 모니터링합니다.
꼬리의 피부를 자른 다음 메스를 사용하여 꼬리 동맥의 표면 종을 절단하여 수술 분야의 중간에있는 꼬리 동맥을 노출시킵니다. 22 게이지 정맥 카테터로 꼬리 동맥을 캐뉼러하십시오. 실크로 동맥과 카테터를 결찰하십시오.
응고를 피하기 위해 헤파린이 함유 된 식염수를 사용하여 카테터를 세척하십시오. 정맥의 오른쪽 경정맥의 피부를 자른 다음 근육과 조직을 분리하여 정맥을 노출시킵니다. 16 게이지 수제 다연령 정맥 카테터를 정맥의 오른쪽 외부 경정맥에 삽입하고 오른쪽 하대 정맥 또는 우심방에 조심스럽게 넣습니다.
오염을 피하기 위해 오른쪽 외부 정맥이 각 캐뉼러 부위를 촉촉한 공으로 덮는 곳에 헤파린 나트륨을 투여하십시오. 셋째, 꼬리 동맥의 카테터와 회로를 연결하고 펌프를 분당 1-2 밀리리터의 낮은 속도로 유지하십시오. 그런 다음 저장소를 오른쪽 외부 경정맥의 카테터와 연결하십시오.
저수지에 항상 약 1 센티미터의 혈중 농도가 있는지 확인하십시오. 물 탱크를 켜고 먼저 수온을 섭씨 37도로 설정하십시오. 혈압이 안정되면 분당 80-100 밀리리터까지 부드럽게 펌프를 증가시킵니다.
넷, 냉각. 실내 온도를 섭씨 20도 정도로 설정하십시오. 이 일회용 장갑에 얼음 조각을 넣은 다음 오른쪽 머리와 옆에 놓습니다.
탱크의 온도는 쌀의 직장 온도에 따라 실시간으로 제안되었습니다. 혈액 가스 분석 결과에 따라 인공 호흡기의 관련 매개 변수를 적절하게 변경하십시오. 다섯, 깊은 저체온증 순환 정지.
그런 다음 직장 온도가 섭씨 15도에서 20도까지 떨어집니다. 순환 정지 중에 깊은 저체온증을 유지하기 위해 얼음 팩을 교체하고 장갑을 폐기하십시오. 롤러 펌프를 중지하십시오.
저장소가 환경과 접촉하도록 유지하고 외부 경정맥에서 저장소로 혈액을 천천히 배출하십시오. 혈압 개혁에주의하십시오. 혈압과 심장 박동이 없으면 배수를 멈추고 저수지를 닫아 두십시오.
인공 호흡기를 끕니다. 여섯, 워밍업 및 재관류. 일회용 장갑을 모두 제거하고 실내 온도를 섭씨 25도까지 올립니다.
정맥 배액관 클리핑을 유지하면서 메모리 산소 간 환기를 복원하십시오. 롤러 펌프를 켜서 저장소의 혈액이 천천히 올바른 몸으로 돌아가는지 확인합니다. 저수지의 혈중 농도가 1 센티미터로 유지 된 후 인공 호흡기를 켜십시오.
배수관을 사용하여 우심방에서 저수지로 혈액을 천천히 배출하십시오. 가열 램프, 가열 패드 및 물 탱크를 켭니다. 물 탱크의 온도를 섭씨 25도로 설정합니다.
그런 다음 적시에 왼쪽 온도로 조정하십시오. 직장 온도가 섭씨 34도까지 돌아온 후 가열 램프를 제거하십시오. 일곱, CPB를 끊습니다.
천천히 그리고 점차적으로 펌프 유량의 롤러를 줄이고 유속으로 대정맥 속 속도를 조정하여 분당 1 밀리리터로 줄입니다. 저수지를 환경과 접촉하도록 유지하십시오. 회로에 남아있는 혈액을 분당 1 밀리리터의 유속으로 주입하십시오.
메모리 산소 공급과 롤러 펌프를 중지하십시오. 기계 환기와 깊은 마취 후 안락사. 대표 결과.
대조군으로서는 상온 CPB, NtCPB, 랫트 등이 있다. 순환기 정지 없이 전체 시술 동안 안정적인 평균 동맥 혈압 MAP 및 체온을 보였다. 반면 DHCA 래트의 MAP는 심정지 동안 감소하였다.
DHCA 쥐의 온도는 냉각 단계에서 빠르게 떨어졌고 회전 단계에서 점차적으로 회복되었습니다. DHCA 회로의 이유식은 DHCA 랫트의 온도를 정상으로 되돌렸다. 위의 데이터는 우리의 DHCA 절차가 클리닉에서 환자의 실제 온도 및 MAP 변화를 모방했음을 나타냅니다.
DHCA 프로세서의 상승 및 효과는 혈액 가스 분석에 의해 조사되었다. 전혈을 1 차 용액과 접촉 한 후, 헤모글로빈의 농도는 두 그룹 모두에서 데실 리터 당 6 그램보다 높았다. DHCA 표면에서 이유식을, CPB 회로에 남아있는 혈액을 우측으로 재주입하기 때문에 데실리터당 9그램으로 증가하였다.
헤마토크릿 인 HCT는 HB와 유사한 경향을 보였다. DHCA 재관류 후 젖산은 빠르게 증가하여 DHCA 그룹에서 더 두드러졌습니다. DHCA 절차 후 pH가 감소했는데, 이는 젖산 축적의 결과일 가능성이 큽니다. 전체 실험 동안 나트륨, 염화물, 칼륨 이온 및 포도당의 농도는 각 10 점에서 큰 차이를 나타내지 않았습니다.
이러한 결과는 DHCA가 락테이트산으로의 증가만을 유도하였을 뿐 혈중 pH 및 헤모글로빈, 헤마토크릿, 나트륨 이온, 클로라이드 이온, 칼륨 이온 및 글루코스의 농도에는 영향을 미치지 않았음을 시사한다. DHCA가 신경 자가포식에 미치는 영향을 평가하기 위해 투과 전기 현미경을 사용했으며 놀랍게도 DHCA 쥐의 해마에서 자가포식소체의 수를 발견하고 증가시켰습니다. 위의 데이터는 우리의 DHCA 모델이 클리닉에서 환자의 실제 온도 및 MAP 변화를 모방했음을 나타냅니다.
이 모델은 전신 염증 반응 증후군, 신경 염증 등을 조사하는 데 적용될 수 있습니다.
