Установление глубокой гипотермической остановки кровообращения у крыс. Глубокая гипотермическая остановка кровообращения, DHCA обычно применяется во время операций по сложным врожденным порокам сердца и заболеванию дуги аорты. Настоящее исследование направлено на предоставление метода установления DHCA у крыс.
Протоколы получили институциональную оценку и одобрение Институционального комитета по уходу за животными и их использованию, больница Фувай, Китайская академия медицинских наук. Подготовительные работы. Убедитесь, что контуры CPB содержат резервуар, модифицированный из капельницы морфов, роликовый насос, теплообменник, мембранный оксигенатор, соединительную трубку и резервуар для воды, соединенный контуром и составляющий 12 миллилитр гидроксикрахмала с одним миллилитром гепарина натрия и одним миллилитром физиологического раствора в цепи с 40-миллилитровым грунтовочным раствором с плавно вращающимся роликовым насосом.
Во-вторых, анестезия и каннуляция. Подключите трубку с вентилятором и боковыми параметрами. Положите электрическое нагревательное одеяло и правое и лицом к правому с лентой.
Нанесите офтальмологическую мазь на глаза, чтобы предотвратить сухость. Сбрить волосы на правой паховой области, правой шейной области и хвосте бритвой. Затем продезинфицируйте кожу альдегидом и спиртом.
Отрежьте кожу и левую паховую область и рассекните мышечную и тканевую мягкую кость, чтобы обнажить левую бедренную вену и артерию. Отделите артерию тщательно. Каннулировать внутривенный катетер 22 калибра в левую бедренную артерию.
Перевязанная артерия и катетер с шелком. Используйте физиологический раствор, содержащий гепарин, для промывки канюли, чтобы избежать свертывания крови. Подключите катетер к пресс-датчику для контроля артериального давления.
Отрежьте кожу хвоста, а затем используйте скальпель, чтобы разрезать поверхностный вид хвостовой артерии, чтобы обнажить хвостовую артерию, которая находится в середине хирургического поля. Каннулировать хвостовую артерию с помощью внутривенного катетера 22 калибра. Лигатная артерия и катетер с шелком.
Используйте физиологический раствор, содержащий гепарин, для промывки катетера, чтобы избежать свертывания. Отрежьте кожу правой яремной вены, затем разделите мышцы и ткани, чтобы обнажить вену. Вставьте самодельный многоядерный внутривенный катетер 16 калибра в правую наружную яремную вену и аккуратно поместите его в правую нижнюю полую вену или правое предсердие.
Вводят гепарин натрия там, где правая наружная вена покрывает каждую канюлированную область влажными шариками, чтобы избежать загрязнения. В-третьих, соедините контур с катетером в хвостовой артерии и держите насос на низкой скорости от одного до двух миллилитра в минуту. Затем соедините резервуар с катетером в правой наружной яремной вене.
Убедитесь, что в резервуаре всегда есть уровень крови около одного сантиметра. Включите резервуар для воды и сначала установите температуру воды на уровне 37 градусов по Цельсию. После того, как артериальное давление стабилизируется, осторожно увеличьте насос потока до 80-100 миллилитров в минуту.
Четыре, охлаждение. Установите температуру в помещении около 20 градусов по Цельсию. Положите кубики льда в эти одноразовые перчатки, а затем положите их на правую голову и бока.
Температура резервуара была предложена в режиме реального времени в соответствии с ректальной температурой риса. Правильно измените соответствующие параметры вентилятора по результатам анализа газов крови. Пять, глубокая переохлаждение, остановка кровообращения.
Затем ректальная температура падает до 15-20 градусов по Цельсию. Смените пакет со льдом и утилизируйте перчатки, чтобы обеспечить поддержание глубокого переохлаждения во время остановки кровообращения. Остановите роликовый насос.
Держите резервуар в контакте с окружающей средой и медленно сливайте кровь из наружной яремной вены в резервуар. Обратите внимание на реформу артериального давления. После того, как не будет артериального давления и сердцебиения, остановите дренаж и держите резервуар закрытым.
Выключите вентилятор. Шестерка, разминка и реперфузия. Снимите все одноразовые перчатки и увеличьте температуру в помещении до 25 градусов по Цельсию.
Восстановите кислородную вентиляцию памяти, сохраняя при этом обрезание венозной дренажной трубки. Включите роликовый насос, чтобы убедиться, что кровь в резервуаре медленно возвращается в нужное тело. Включите аппарат ИВЛ после того, как уровень крови в водоеме останется на один сантиметр.
Используйте дренажную трубку и медленно сливайте кровь из правого предсердия в резервуар. Включите нагревательную лампу, грелку и бак для воды. Установите температуру резервуара для воды на 25 градусов по Цельсию.
Затем своевременно отрегулируйте его до левой температуры. Снимите нагревательную лампу после того, как ректальная температура вернется к 34 градусам по Цельсию. Семь, отлучение от КПБ.
Медленно и постепенно уменьшают расход ролика насоса и регулируют скорость вены рода, скорость потока уменьшают до одного миллилитра в минуту. Поддерживайте резервуар в контакте с окружающей средой. Вливайте оставшуюся кровь в контур со скоростью потока один миллилитр в минуту.
Остановите оксигенацию памяти и роликовый насос. Усыпляется после периода искусственной вентиляции легких и глубокой анестезии. Репрезентативные результаты.
Как и в контрольной группе, нормальная температура CPB, NtCPB, крыс. Без остановки кровообращения показано стабильное среднее артериальное давление артерии MAP и температура тела в течение всей процедуры. В то время как MAP DHCA у крыс уменьшался во время остановки сердца.
Температура крыс DHCA быстро снижалась во время фазы охлаждения и постепенно восстанавливалась во время фазы вращения. После отъема dhca цепи температура DHCA крыс вернулась к норме. Приведенные выше данные указывали на то, что наша процедура DHCA имитировала фактические изменения температуры и MAP пациентов в клиниках.
Влияние процессора и повышения DHCA было исследовано анализом газов крови. После контакта цельной крови с первичным раствором концентрация гемоглобина была выше шести грамм на децилитр в обеих группах. При отлучении от поверхности DHCA он увеличился до девяти граммов на децилитор из-за повторного закачки оставшейся крови в контуре CPB в правый.
Гематокрит, HCT, показал аналогичную тенденцию к HB. После реперфузии DHCA лактатная кислота быстро увеличивалась, что было более выражено в группе DHCA. pH снизился после процедуры DHCA, что, скорее всего, было результатом накопления лактатной кислоты. В течение всего эксперимента концентрация натрия, хлорида, ионов калия и глюкозы не показывала существенных различий в каждые 10 баллов.
Этот результат говорит о том, что DHCA только индуцировал повышение лактатной кислоты, но не влиял на рН крови и концентрацию гемоглобина, гематокрита, ионов натрия, ионов хлорида, ионов калия и глюкозы. Чтобы оценить влияние DHCA на нейрональную аутофагию, мы использовали трансмиссионный электромикроскоп и неожиданно обнаружили и увеличили количество аутофагосом в гиппокампе крыс DHCA. Приведенные выше данные показали, что наша модель DHCA имитировала фактические изменения температуры и MAP пациентов в клиниках.
Эта модель может быть применена для исследования синдрома системной воспалительной реакции, нейровоспаления и т. Д.
