在大鼠中建立深度低温循环停滞。DHCA深度低温循环停滞,常规应用于复杂先天性心脏病和主动脉弓疾病的手术。本研究旨在提供一种在大鼠中建立DHCA的方法。
该方案接受了机构审查,并获得了中国医学科学院阜外医院机构动物护理和使用委员会的批准。准备工作。确保CPB回路包含由变形滴管,辊泵,热交换器,膜氧合器,连接管和连接回路的水箱改编而成的储液器,并用1毫升肝素钠和1毫升盐水使12毫升羟基淀粉与40毫升灌注溶液一起,辊泵轻轻旋转。
二、麻醉和插管。将管子与呼吸机和侧面参数连接。放一个电加热毯和右边,用胶带面向右边。
将眼药膏涂抹在眼睛上以防止干燥。用剃须刀剃除右腹股沟区域、右颈椎区域和尾巴上的头发。然后用醛和酒精对皮肤进行消毒。
切开皮肤和左腹股沟区域,解剖肌肉和组织软骨,露出左股静脉和动脉。小心地分开动脉。插管 22 规静脉导管进入左股动脉。
结扎动脉和丝绸导管。使用含有肝素的生理盐水冲洗套管以避免凝血。将导管与按压传感器连接以监测血压。
切开尾部的皮肤,然后用手术刀切开尾动脉的浅表部分,露出位于手术视野中间的尾动脉。用 22 号静脉导管插管尾动脉。用丝绸结扎动脉和导管。
使用含有肝素的生理盐水冲洗导管以避免凝血。切开右颈静脉的皮肤,然后分离肌肉和组织以暴露静脉。将 16 号自制多龄静脉导管插入右颈外静脉,并小心地将其放入右下腔静脉或右心房。
给予肝素钠,其中右外静脉用湿球覆盖每个空心区域,以避免污染。三、将回路与尾动脉导管连接,保持泵每分钟一到两毫升的低速率。然后将储液器与右颈外静脉中的导管连接。
确保储液罐中的血液水平始终约为一厘米。打开水箱,先将水温设置为37摄氏度。血压稳定后,轻轻增加流量泵至每分钟80至100毫升。
四、降温。将室温设置为 20 摄氏度左右。将冰块放入这种一次性手套中,然后将它们放在右侧头部和侧面。
根据大米的直肠温度实时建议水箱的温度。根据血气分析结果适当改变呼吸机的相关参数。五、深部低温循环停滞。
然后直肠温度下降到15至20摄氏度。更换冰袋并丢弃手套,以确保在循环停滞期间维持深度体温过低。停止滚筒泵。
保持储液器与环境接触,并将血液从颈外静脉缓慢排出到储液器。注意血压改革。没有血压和心跳后,停止引流并保持储液器关闭。
关闭呼吸机。六、预热再灌注。摘下所有一次性手套,将室温升高至25摄氏度。
恢复记忆氧间通气,同时保持静脉引流管夹紧。打开滚筒泵,确保储液罐中的血液慢慢回到正确的身体。在储液罐中的血位保持一厘米后打开呼吸机。
使用引流管将血液从右心房缓慢引流到储液器。打开加热灯、加热垫和水箱。将水箱温度设置为25摄氏度。
然后及时将其调整到左侧温度。直肠温度恢复到34摄氏度后取下加热灯。七、断奶CPB。
缓慢而逐渐地降低泵的滚筒流量,并调整静脉属的速度,使流量降低到每分钟一毫升。保持储液罐与环境接触。将剩余的血液注入回路中,流速为每分钟一毫升。
停止记忆氧合和滚筒泵。经过一段时间的机械通气和深度麻醉后安乐死。具有代表性的结果。
作为对照组,常温CPB、NtCPB、大鼠。无循环骤停显示稳定的平均动脉血压MAP,整个过程中体温正常。虽然DHCA大鼠的MAP在心脏骤停期间下降。
DHCA大鼠的温度在冷却阶段快速下降,在旋转阶段逐渐恢复。DHCA断奶电路使DHCA大鼠体温恢复正常。以上数据表明,我们的DHCA程序模仿了诊所患者的实际温度和MAP变化。
通过血气分析研究了DHCA处理器和上升的影响。全血与初级溶液接触后,两组血红蛋白浓度均高于每分升6克。从DHCA表面断奶时,由于CPB回路中的剩余血液重新注入右侧,因此每分升增加至9克。
血细胞比容HCT显示出与HB相似的倾向。DHCA再灌注后乳酸快速增加,这在DHCA组中更为明显。DHCA手术后pH值下降,这很可能是乳酸积累的结果。在整个实验过程中,钠、氯化物、钾离子和葡萄糖的浓度在每10个点上没有表现出显着差异。
结果表明,DHCA仅诱导乳酸升高,而不影响血pH值和血红蛋白、血细胞比容、钠离子、氯离子、钾离子和葡萄糖的浓度。为了评估DHCA对神经元自噬的影响,我们使用透射电显微镜,令人惊讶地发现并增加了DHCA大鼠海马体中的自噬体数量。以上数据表明,我们的DHCA模型模仿了诊所患者的实际温度和MAP变化。
该模型可用于研究全身炎症反应综合征、神经炎症等。