Estabelecimento de parada circulatória hipotérmica profunda em ratos. Parada circulatória hipotérmica profunda, o DHCA é rotineiramente aplicado durante cirurgias de cardiopatia congênita complexa e doença do arco aórtico. O presente estudo tem como objetivo fornecer um método para o estabelecimento de DHCA em ratos.
Os protocolos receberam uma revisão institucional e obtiveram aprovação do Comitê Institucional de Cuidados e Uso de Animais, Hospital Fuwai, Academia Chinesa de Ciências Médicas. Trabalhos preparatórios. Certifique-se de que os circuitos de CEC contenham um reservatório modificado a partir de transformadores conta-gotas, bomba de rolos, trocador de calor, oxigenador de membrana, tubo de conexão e um tanque de água conectado ao circuito e faça 12 mililitros de hidroxiamido com um mililitro de heparina sódica e um mililitro de solução salina preparar o circuito com solução de escorva de 40 mililitros com a bomba de rolos girando suavemente.
Dois, anestesia e canulação. Conecte o tubo com o ventilador e os parâmetros laterais. Coloque um cobertor de aquecimento elétrico e o direito e encare o direito com fita adesiva.
Aplique pomada oftálmica nos olhos para evitar a secura. Raspe o cabelo na região inguinal direita, região cervical direita e a cauda com o barbeador. Em seguida, desinfete a pele com aldeído e álcool.
Corte a pele e a região inguinal esquerda e disseque o músculo e o tecido osso mole para expor a veia e artéria femoral esquerda. Separe a artéria com cuidado. Canulado cateter intravenoso calibre 22 na artéria femoral esquerda.
Artéria ligada e cateter com seda. Use solução salina contendo heparina para lavar a cânula para evitar a coagulação. Conecte o cateter com o sensor de pressão para monitorar a pressão arterial.
Corte a pele da cauda e, em seguida, use um bisturi para cortar a amostra superficial da artéria da cauda para expor a artéria da cauda que está no meio do campo cirúrgico. Anular a artéria caudal com o cateter intravenoso calibre 22. Artéria e cateter ligados.
Use solução salina contendo heparina para lavar o cateter para evitar a coagulação. Corte a pele da jugular direita da veia e, em seguida, separe o músculo e o tecido para expor a veia. Insira um cateter intravenoso multiidade de calibre 16 na jugular externa direita da veia e coloque-o na veia cava inferior direita ou no átrio direito com cuidado.
Administrar heparina sódica onde a veia externa direita cobre cada região canulada com bolas úmidas para evitar a contaminação. Três, conecte o circuito com o cateter na artéria da cauda e mantenha a bomba baixa taxa de um a dois mililitros por minuto. Em seguida, conecte o reservatório com o cateter na veia jugular externa direita.
Certifique-se de que há sempre um nível sanguíneo de cerca de um centímetro no reservatório. Ligue o tanque de água e defina a temperatura da água em 37 centígrados primeiro. Depois que a pressão arterial estiver estável, aumente suavemente a bomba de fluxo até 80 a 100 mililitros por minuto.
Quatro, arrefecimento. Defina a temperatura ambiente para cerca de 20 centígrados. Coloque cubos de gelo nestas luvas descartáveis e, em seguida, coloque-os na cabeça e nos lados direitos.
A temperatura do tanque foi sugerida em tempo real de acordo com a temperatura retal do arroz. Alterar os parâmetros relevantes do ventilador adequadamente de acordo com os resultados da análise de gases no sangue. Cinco, hipotermia profunda parada circulatória.
Em seguida, a temperatura retal cai para 15 a 20 centígrados. Troque o bloco de gelo e descarte as luvas para garantir a manutenção da hipotermia profunda durante a parada circulatória. Pare a bomba de roletes.
Mantenha o reservatório em contato com o ambiente e drene o sangue lentamente da veia jugular externa para o reservatório. Preste atenção à reforma da pressão arterial. Depois que não houver pressão arterial e batimentos cardíacos, pare a drenagem e mantenha o reservatório fechado.
Desligue o ventilador. Seis, aquecimento e reperfusão. Retire todas as luvas descartáveis e aumente a temperatura ambiente para 25 centígrados.
Restaure a memória de oxigênio interventilação, mantendo o corte do tubo de drenagem venosa. Ligue a bomba de roletes para se certificar de que o sangue no reservatório está lentamente de volta ao corpo direito. Ligue o ventilador depois que o nível sanguíneo no reservatório permanecer um centímetro.
Usando o tubo de drenagem e drene o sangue do átrio direito para o reservatório lentamente. Ligue a lâmpada de aquecimento, a almofada de aquecimento e o tanque de água. Defina a temperatura do tanque de água para 25 centígrados.
Em seguida, ajuste-o para a temperatura esquerda oportunamente. Remova a lâmpada de aquecimento depois que a temperatura retal retornar a 34 centígrados. Sete, desmame da CEC.
Reduza lenta e gradualmente o rolo da taxa de fluxo da bomba e ajuste a velocidade do gênero da veia na taxa de fluxo reduzida para um mililitro por minuto. Mantenha o reservatório em contato com o meio ambiente. Infundir o sangue restante em um circuito com uma taxa de fluxo de um mililitro por minuto.
Pare a oxigenação da memória e a bomba de roletes. Eutanasiado após um período de ventilação mecânica e anestesia profunda. Resultados representativos.
Como o grupo controle, a temperatura normal CEC, NtCPB, rato. Sem a parada circulatória houve média estável da PAM arterial arterial e da temperatura corporal durante todo o procedimento. Enquanto a PAM de ratos DHCA diminuiu durante a parada cardíaca.
A temperatura dos ratos DHCA caiu rapidamente durante a fase de resfriamento e se recuperou gradualmente durante a fase giratória. O desmame do circuito DHCA a temperatura dos ratos DHCA voltou ao normal. Os dados acima indicaram que nosso procedimento de DHCA imitou as mudanças reais de temperatura e PAM dos pacientes nas clínicas.
O efeito do processador e aumento de DHCA foi investigado pela análise de gases sanguíneos. Após o contato do sangue total com a solução primária, a concentração de hemoglobina foi superior a seis gramas por decilitor em ambos os grupos. O desmame da superfície do DHCA aumentou para nove gramas por decilitter por causa da reinfusão de sangue remanescente no circuito de CEC à direita.
O hematócrito, HCT, apresentou tendência semelhante à HB. Após a reperfusão de DHCA, o ácido lactato aumentou rapidamente, o que foi mais pronunciado no grupo DHCA. O pH diminuiu após o procedimento de DHCA, que provavelmente foi o resultado do acúmulo de ácido lactato. Durante todo o experimento, a concentração de sódio, cloreto, íons potássio e glicose não apresentou diferenças significativas em cada 10 pontos.
Este resultado sugere que o DHCA apenas induziu o aumento para ácido lactato, mas não influenciou o pH sanguíneo e a concentração de hemoglobina, hematócrito, íons sódio, íons cloreto, íons potássio e glicose. Para avaliar o impacto do DHCA na autofagia neuronal, utilizamos o eletromicroscópio de transmissão e surpreendentemente encontramos e aumentamos o número de autofagossomos no hipocampo de ratos DHCA. Os dados acima indicaram que nosso modelo DHCA imitou as mudanças reais de temperatura e PAM dos pacientes nas clínicas.
Este modelo pode ser aplicado para investigar a síndrome da resposta inflamatória sistêmica, neuroinflamação, etc.
