Instaurazione di arresto circolatorio ipotermico profondo nel ratto. Arresto circolatorio ipotermico profondo, DHCA viene applicato di routine durante interventi chirurgici di cardiopatia congenita complessa e malattia dell'arco aortico. Il presente studio mira a fornire un metodo per stabilire il DHCA nei ratti.
I protocolli hanno ricevuto una revisione istituzionale e hanno ottenuto l'approvazione del Comitato istituzionale per la cura e l'uso degli animali, dell'ospedale Fuwai, dell'Accademia cinese delle scienze mediche. Lavori preparatori. Assicurarsi che i circuiti CPB contengano un serbatoio modificato dal contagocce morphs, dalla pompa a rulli, dallo scambiatore di calore, dall'ossigenatore a membrana, dal tubo di collegamento e da un serbatoio dell'acqua collegato al circuito e produca 12 millilitri di amido idrossi con un millilitro di eparina sodica e un millilitro di soluzione salina innescando il circuito con una soluzione di adescamento da 40 millilitri con la pompa a rulli che ruota delicatamente.
Due, anestesia e incannulamento. Collegare il tubo con il ventilatore e i parametri laterali. Metti una coperta elettrica e la destra e affronta la destra con del nastro adesivo.
Applicare unguento oftalmico agli occhi per prevenire la secchezza. Rasare i capelli sulla regione inguinale destra, sulla regione cervicale destra e sulla coda con il rasoio. Quindi disinfettare la pelle con aldeide e alcool.
Tagliare la pelle e la regione inguinale sinistra e sezionare il muscolo e tessuto molle osseo per esporre la vena femorale sinistra e l'arteria. Separare attentamente l'arteria. Cannulare catetere endovenoso calibro 22 nell'arteria femorale sinistra.
Arteria e catetere legati con seta. Utilizzare soluzione salina contenente eparina per lavare la cannula per evitare la coagulazione. Collegare il catetere con il sensore di pressione per monitorare la pressione sanguigna.
Tagliare la pelle della coda e poi utilizzare un bisturi per tagliare la specia superficiale dell'arteria caudale per esporre l'arteria della coda che si trova nel mezzo del campo chirurgico. Cannulare l'arteria caudale con il catetere endovenoso di gauge 22. Arteria ligata e catetere con seta.
Utilizzare soluzione salina contenente eparina per lavare il catetere per evitare la coagulazione. Tagliare la pelle della giugulare destra della vena, quindi separare muscolo e tessuto per esporre la vena. Inserire un catetere endovenoso multiage fatto in casa di 16 gauge nella giugulare esterna destra della vena e inserirlo nella vena cava inferiore destra o nell'atrio destro con attenzione.
Somministrare eparina sodica dove la vena esterna destra copre ogni regione cannulata con palline umide per evitare la contaminazione. Tre, collegare il circuito con il catetere nell'arteria della coda e mantenere la pompa bassa velocità da uno a due millilitri al minuto. Quindi collegare il serbatoio con il catetere nella vena giugulare esterna destra.
Assicurati che ci sia sempre un livello ematico di circa un centimetro nel serbatoio. Accendere il serbatoio dell'acqua e impostare prima la temperatura dell'acqua a 37 gradi centigradi. Dopo che la pressione sanguigna è stabile, aumentare delicatamente la pompa di flusso fino a 80-100 millilitri al minuto.
Quattro, raffreddamento. Impostare la temperatura ambiente a circa 20 gradi centigradi. Metti i cubetti di ghiaccio in questi guanti monouso e poi mettili sulla testa e sui lati giusti.
La temperatura della vasca è stata suggerita in tempo reale in base alla temperatura rettale del riso. Modificare correttamente i parametri rilevanti del ventilatore in base ai risultati dell'analisi dei gas del sangue. Cinque, arresto circolatorio di ipotermia profonda.
Quindi la temperatura rettale scende a 15-20 gradi centigradi. Cambiare l'impacco di ghiaccio e smaltire i guanti per garantire il mantenimento dell'ipotermia profonda durante l'arresto circolatorio. Arrestare la pompa a rulli.
Mantenere il serbatoio a contatto con l'ambiente e drenare lentamente il sangue dalla vena giugulare esterna al serbatoio. Presta attenzione alla riforma della pressione sanguigna. Dopo che non c'è pressione sanguigna e battito cardiaco, interrompere il drenaggio e tenere chiuso il serbatoio.
Spegnere il ventilatore. Sei, riscaldamento e riperfusione. Rimuovere tutti i guanti monouso e aumentare la temperatura ambiente a 25 gradi centigradi.
Ripristinare la memoria ossigeno inter ventilazione mantenendo il taglio del tubo di drenaggio venoso. Accendere la pompa a rulli per assicurarsi che il sangue nel serbatoio torni lentamente al corpo destro. Accendere il ventilatore dopo che il livello del sangue nel serbatoio rimane un centimetro.
Utilizzando il tubo di drenaggio e drenare lentamente il sangue dall'atrio destro al serbatoio. Accendere la lampada riscaldante, la piastra elettrica e il serbatoio dell'acqua. Impostare la temperatura del serbatoio dell'acqua su 25 gradi centigradi.
Quindi regolarlo tempestivamente sulla temperatura sinistra. Rimuovere la lampada riscaldante dopo che la temperatura rettale è tornata a 34 gradi centigradi. Sette, svezzamento dalla CPB.
Ridurre lentamente e gradualmente il rullo della portata della pompa e regolare la velocità del genere vena nella portata ridurre a un millilitro al minuto. Mantenere il serbatoio a contatto con l'ambiente. Infondere il sangue rimanente in un circuito con una portata di un millilitro al minuto.
Arrestare l'ossigenazione della memoria e la pompa a rulli. Eutanasia dopo un periodo di ventilazione meccanica e anestesia profonda. Risultati rappresentativi.
Come gruppo di controllo, la temperatura normale CPB, NtCPB, ratto. Senza l'arresto circolatorio ha mostrato una MAP della pressione arteriosa media stabile e la temperatura corporea durante l'intera procedura. Mentre la MAP dei ratti DHCA è diminuita durante l'arresto cardiaco.
La temperatura dei ratti DHCA è scesa rapidamente durante la fase di raffreddamento e si è ripresa gradualmente durante la fase di rotazione. Lo svezzamento del circuito DHCA la temperatura dei ratti DHCA è tornata alla normalità. I dati di cui sopra hanno indicato che la nostra procedura DHCA ha imitato i cambiamenti effettivi della temperatura e della MAP dei pazienti nelle cliniche.
L'effetto del processore DHCA e dell'aumento è stato studiato mediante analisi dei gas ematici. Dopo il contatto dell'intero sangue con la soluzione primaria, la concentrazione di emoglobina era superiore a sei grammi per decilitter in entrambi i gruppi. Lo svezzamento dalla superficie del DHCA, è aumentato a nove grammi per decilitter a causa della reinfusione del sangue rimanente nel circuito CPB nella destra.
L'ematocrito, HCT, ha mostrato la tendenza simile a HB. Dopo la riperfusione del DHCA l'acido lattato è aumentato rapidamente, il che è stato più pronunciato nel gruppo DHCA. Il pH è diminuito dopo la procedura DHCA, che era molto probabilmente il risultato dell'accumulo di acido lattato. Durante l'intero esperimento, la concentrazione di sodio, cloruro, ioni potassio e glucosio non ha mostrato differenze significative ogni 10 punti.
Questo risultato suggerisce che il DHCA ha solo indotto l'aumento dell'acido lattato, ma non ha influenzato il pH del sangue e la concentrazione di emoglobina, ematocrito, ioni sodio, ioni cloruro, ioni potassio e glucosio. Al fine di valutare l'impatto del DHCA sull'autofagia neuronale, abbiamo usato il microscopio elettronico a trasmissione e sorprendentemente abbiamo trovato e aumentato il numero di autofagosomi nell'ippocampo dei ratti DHCA. I dati di cui sopra hanno indicato che il nostro modello DHCA ha imitato i cambiamenti effettivi della temperatura e della MAP dei pazienti nelle cliniche.
Questo modello può essere applicato per studiare la sindrome da risposta infiammatoria sistemica, la neuroinfiammazione, eccetera.
