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Quantification à haut débit basée sur l’image de la synthèse et de la distribution de l’ADN mitochondrial

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10:47 min

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May 5th, 2023

DOI :

10.3791/65236-v

May 5th, 2023

•

Lukasz S. Borowski¹^,², Karolina Kasztelan²^,³, Jolanta Czerwinska-Kostrzewska¹^,², Roman J. Szczesny²

¹Faculty of Biology, Institute of Genetics and Biotechnology, University of Warsaw, ²Institute of Biochemistry and Biophysics, Polish Academy of Sciences, ³International Institute of Molecular and Cell Biology in Warsaw

Transcription

Résumé

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5 bromo 2 d soxyuridine

microscopie fluorescence

criblage haute teneur

Chapitres dans cette vidéo

0:00

Introduction

1:21

Preparation of siRNA Mixture for Mitochondrial DNA Synthesis

2:00

Cell Transfection and 5‐Bromo‐2’‐Deoxyuridine (BrdU) Incorporation in HeLa Cells

3:14

5-Bromo-2'-Deoxyuridine (BrdU) Labeling of Mitochondrial DNA in HeLa Cells

4:51

HeLa Cell Fixation with Hoechst 33342 and Blocking

5:51

Addition of Primary and Secondary Antibodies to the Transfected HeLa Cells to Monitor the mtDNA Distribution

7:49

Quantitative Image Analysis to Measure the mtDNA and Gene Expression Levels in the Transfected HeLa Cells

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