1. Fonctionnement des bailleurs de fonds <ol><li> Le rat donneur doit rester à jeun pendant 24 heures (accès libre à l&#39;eau / solution de glucose). </li><li> Pour induire une anesthésie par inhalation isoflurane, commencez avec 2% pulvérisateur standard, puis réduire à 1% après avoir effectué une laparotomie. Effectuer un pincement de l&#39;orteil pour vérifier la sédation. </li><li> Raser l&#39;abdomen et le nettoyer avec préparation de la peau 3 fois (Kodan). Effectuez ensuite une incision médiane après administration sous-cutanée de l&#39;analgésique. </li><li> Après la greffe est enveloppé dans de la gaze imbibée salée, séparer les adhérences physiologiques entre le pancréas et du côlon ascendant délicatement avec un coton-tige (sous le microscope chirurgical avec un grossissement de 6x). </li><li> Ligaturer et diviser les vaisseaux coliques iléo-cæcaux et droite et centre en utilisant 7-0 soie. Après le côlon ascendant est étalée sur le côté droit de la veine mésentérique supérieure (VMS), les vaisseaux coliques iléo-cæcaux, droite et centrale peuvent être identifiées pour la ligature et la division en utilisant 7-0 liens. </li><li> Rétracter l&#39;estomac vers le haut, de sorte que l&#39;ensemble de SMV est redressé et exposée. Utilisez une pince moustique de rachat. La pince est maintenue en masse à modeler mis en forme selon les besoins. </li><li> Ligaturer et diviser les veines pancréatico-duodénaux en provenance du SMV. Toutes les petites veines pancréatico-duodénaux provenant du SMV doit être soigneusement identifiée, ligaturé avec 7-0 soie et divisé avant que le tissu pancréatique peut être retiré de la greffe. </li><li> Ligaturer et diviser le tissu conjonctif perdent y compris tous les vaisseaux lymphatiques entre le SMV et de l&#39;aorte abdominale. Avec la greffe toujours sur le côté droit de l&#39;abdomen, la perte du tissu conjonctif, y compris tous les vaisseaux lymphatiques entre le SMV et de l&#39;aorte abdominale est accessible. Ce tissu conjonctif doit être ligaturés en utilisant 7-0 soie et divisée pour éviter lymphorrhée postopératoire du greffon intestinal. </li><li> Ligaturer et de diviser l&#39;artère rénale droite. Après le tissu conjonctif est divisé, l&#39;artère rénale droite est accessible et est ligaturée et sectionnée en utilisant 7-0 soie. </li><li> Systémique heparinise le rat en utilisant 200 unités d&#39;héparine iv dans la veine du pénis. </li><li> Ligaturer les artères marginales, et de diviser l&#39;intestin grêle à la jonction duodéno-jéjunale et à l&#39;iléon terminal. </li><li> L&#39;aorte est ligaturé proximale à l&#39;origine de la SMA. La veine porte est découpée à la confluence avec la veine splénique. Puis le greffon est récolté avec son pédicule vasculaire composé du SMA avec un segment aortique. </li></ol> 2. Procédure Backtable <ol><li> Perfuser le greffage utilisant 3 ml de solution de l&#39;Université du Wisconsin (UW) à 4 ° C par l&#39;intermédiaire du conduit aortique et irriguer la lumière intestinale à partir de la fin du jéjunum avec 30 ml d&#39;Uro-Nebacetin solution de N à 4 ° C (lumen d&#39;irrigation est obligatoire) . </li></ol> Immédiatement après l&#39;extraction de la greffe, le conduit aortique est utilisé pour la perfusion avec 3 ml solution UW réfrigérés. Pour cela, un cathéter 20 G iv surune seringue de 10 ml est utilisé. La perfusion doit être observé pour s&#39;écouler librement de la veine porte divisée. Pour l&#39;irrigation intestinale avec Nebacetin, une seringue de 50 ml est utilisé. <ol start="2"><li> Stocker le greffage en solution UW à 4 ° C au cours de la préparation du destinataire. </li></ol> 3. Fonctionnement du destinataire <ol><li> Le rat receveur doit rester à jeun pendant 24 heures (accès libre à l&#39;eau / solution de glucose). </li><li> Pour induire une anesthésie par inhalation isoflurane, commencez avec 2% pulvérisateur standard, puis réduire à 1% après avoir effectué une laparotomie. Effectuer un pincement de l&#39;orteil pour vérifier la sédation. </li><li> Raser l&#39;abdomen et le nettoyer avec préparation de la peau 3 fois (Kodan). Effectuez ensuite une incision médiane après administration sous-cutanée de carprofène 5 mg / kg sc peropératoire analgésie. </li><li> Enroulez le destinataire dans l&#39;intestin normal de gaze imbibée solution saline et le placer sur la poitrine du destinataire. </li><li> Ouvrez le rétropéritoine carrément avec Q-tips, et exposer le abdominal aorte et la veine cave inférieure juste au-dessous des artères rénales vers le bas au niveau des vaisseaux iliaques, le cas échéant également utiliser microciseaux. Ligaturer les tribuaries petites lombaires et la colonne vertébrale de l&#39;aorte et la veine cave en utilisant 7-0 soie pour éviter la perte de sang. (Pour ce faire, modifiez le zoom à 16x microscope chirurgical.) </li><li> Clampage de l&#39;aorte et la veine cave inférieure au-dessous des vaisseaux rénaux proximal gauche et au-dessus de la bifurcation iliaque distal à l&#39;aide des clips de microvaisseaux. Une seule pince est utilisée proximale distale ainsi que pour serrer les deux navires simultanément. Inciser les deux navires antérieurement en utilisant un microknife et laver le sang restant. </li><li> Créer une anastomose termino-latérale entre le segment aortique et aorte greffé le destinataire à l&#39;aide d&#39;un fil de suture continue 10-0 Prolene .. Initialement, le greffon est placé sur le côté droit de l&#39;abdomen (la tête du rat placé à 12 heures) pour effectuer les points paroi arrière de l&#39;anastomose artérielle et attachant de la suture inférieure séjour. Then, le greffon est mis sur le côté gauche de l&#39;abdomen (la tête du rat placé à 9 heures) afin d&#39;exposer et de suturer la paroi avant de l&#39;anastomose. </li><li> Une anastomose termino-latérale entre la veine porte et IVC greffé du destinataire s&#39;effectue également à l&#39;aide de fils de suture en cours d&#39;exécution 10-0 Prolene. Avec le rat fixes situées sur le côté (tête en position 9 heures), le greffon est positionné sur le côté gauche de l&#39;abdomen et une suture inférieure séjour est placé. L&#39;anastomose est démarré avec la paroi arrière de l&#39;intérieur du récipient. Après la suture inférieure séjour est liée, les points paroi avant peut être effectuée à partir de l&#39;extérieur. </li><li> Retirer les pinces distales d&#39;abord, puis par les pinces supérieures. Tout saignement anastomotique est contrôlée par la pression directe à l&#39;aide de coton-tiges. Le greffon doit être vérifiée reperfusion égale et rapide. </li><li> Réséquer l&#39;intestin grêle du destinataire entière après la ligature des vaisseaux mésentériques. Les bénéficiaires subissent entérectomie montant, la préservation de 2-3 cm de projéjunum ximal et 1 cm d&#39;iléon distal. </li><li> Rétablir la continuité entérique par proximale (jéjuno-jéjunostomie) et distale (iléo-iléostomie) de bout en bout à l&#39;aide d&#39;une anastomose intestinale interrompu une couche de suture avec 6-0 Monocryl. Environ 16 points de suture sont nécessaires pour compléter les anastomoses. </li><li> Rincer la cavité péritonéale avec une solution saline normale jusqu&#39;à ce que propre. Administrer 2 ml de sérum physiologique par voie intrapéritonéale pour le remplacement des liquides. Ensuite, fermez l&#39;abdomen à l&#39;aide d&#39;un surjet de Vicryl 3-0 avec la couche musculaire en plus d&#39;une suture cutanée continue. </li><li> Dans la période postopératoire, les rats doivent être conservés à jeun (avec accès à l&#39;eau et une solution de glucose) pour un autre h 24 puis redémarré le rat standard chow et eau ad libitum. Analgésie avec carprofène doit être administré pendant 3 jours (voir posologie ci-dessous). </li></ol>

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M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intestinal+transplantation.">Intestinal transplantation.</a> N. Engl. J. Med. 361 (10), 998 (2009).</li><li>Hernandez, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Is+portal+venous+outflow+better+than+systemic+venous+outflow+in+small+bowel+transplantation?+Experimental+study+in+syngeneic+rats.">Is portal venous outflow better than systemic venous outflow in small bowel transplantation? Experimental study in syngeneic rats.</a> J. Pediatr. Surg. 40 (2), 336 (2005).</li><li>Monchik, G. J., Russell, P. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transplantation+of+small+bowel+in+the+rat:+technical+and+immunological+considerations.">Transplantation of small bowel in the rat: technical and immunological considerations.</a> Surgery. 70 (5), 693 (1971).</li><li>Murase, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Graft-versus-host+disease+after+brown+Norway-to-Lewis+and+Lewis-to-Brown+Norway+rat+intestinal+transplantation+under+FK506.">Graft-versus-host disease after brown Norway-to-Lewis and Lewis-to-Brown Norway rat intestinal transplantation under FK506.</a> Transplantation. 55 (1), 1 (1993).</li><li>Murase, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immunomodulation+of+intestinal+transplant+with+allograft+irradiation+and+simultaneous+donor+bone+marrow+infusion.">Immunomodulation of intestinal transplant with allograft irradiation and simultaneous donor bone marrow infusion.</a> Transplant Proc. 31 (1-2), 565 (1999).</li><li>Pech, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Perioperative+infliximab+application+ameliorates+acute+rejection+associated+inflammation+after+intestinal+transplantation.">Perioperative infliximab application ameliorates acute rejection associated inflammation after intestinal transplantation.</a> Am. 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Transplant.</a> Proc. 38 (6), 1821 (2006).</li><li>Schaefer, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Acute+rejection+and+the+muscularis+propria+after+intestinal+transplantation:+the+alloresponse,+inflammation,+and+smooth+muscle+function.">Acute rejection and the muscularis propria after intestinal transplantation: the alloresponse, inflammation, and smooth muscle function.</a> Transplantation. 85 (10), 1465 (2008).</li><li>Xue, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Surgical+experience+of+refined+3-cuff+technique+for+orthotopic+small-bowel+transplantation+in+rat:+a+report+of+270+cases.">Surgical experience of refined 3-cuff technique for orthotopic small-bowel transplantation in rat: a report of 270 cases.</a> Am. J. Surg. 198 (1), 110 (2009).</li><li>Zhang, X. Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Simplified+techniques+in+rat+heterotopic+small+bowel+transplantation.">Simplified techniques in rat heterotopic small bowel transplantation.</a> Transplant. Proc. 38 (6), 1840 (2006).</li><li>Zhao, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+establishment+of+a+new+en+bloc+combined+liver-small+bowel+transplantation+model+in+rats.+Transplant.">The establishment of a new en bloc combined liver-small bowel transplantation model in rats. Transplant.</a> Proc. 39 (1), 278 (2007).</li></ol>

Aucun conflit d&#39;intérêt déclaré.

Bien que les modèles de transplantation intestinale chez le rat ont été décrits dès le 5 1970ies dans la plupart des modèles récemment utilisés impliquent hétérotopique transplantation intestinale en utilisant des techniques différentes 13. Bien que les procédures hétérotopiques en général ont l&#39;avantage de techniques de microchirurgie plus facile et plus facile accessibilité de la greffe d&#39;évaluation, hétérotopique transplantation intestinale a le gros inconvénient de ...

<table border="1"><tbody><tr><td> Nom du réactif </td><td> Entreprise </td><td> Numéro de catalogue </td><td> Commentaires (optionnel) </td></tr><tr><td> Université du Wisconsin (UW) solution (ViaSpan) </td><td> Bristol-Myers Squibb </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Uro-Nebacetin solution de N </td><td> Nycomed </td><td> 6967855 </td><td></td></tr><tr><td> Ampicilline </td><td> Ratiopharm </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Carprofène (Rimadyl) </td><td> Pfizer </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Prolene 10-0 suture unresorbable </td><td> Ethicon </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Monocryl fil résorbable 6-0 </td><td> Ethicon </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Vicryl 3-0 suture résorbable </td><td> Ethicon </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Cathéter IV G 20 mm 1.1x33 </td><td> Braun </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Cathéter iv G 22 0.9x25 mm </td><td> Braun </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Kodan peau Prep </td><td> Schülke </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Une solution de NaCl 0,9% perfusion </td><td> Braun </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Pince courbes petite </td><td> FineScienceTools </td><td> 11009-13 </td><td></td></tr><tr><td> Micropincettes courbe </td><td> AESCULAP </td><td> BD 333 </td><td></td></tr><tr><td> Micropincettes courbe </td><td> AESCULAP </td><td> FD281R </td><td></td></tr><tr><td> Micro Pince droite 1 </td><td> WPI </td><td> 5 </td><td></td></tr><tr><td> Micro Pince droite 2 </td><td> WPI </td><td> 2 </td><td></td></tr><tr><td> Porte-aiguille micro </td><td> WPI </td> &lt;td&gt; 14081 </td><td></td></tr><tr><td> Ciseaux Micro </td><td> FineScienceTools </td><td> 15006-09 </td><td></td></tr><tr><td> Micro scalpel </td><td> MANI </td><td> Couteau ophtalmique </td><td></td></tr><tr><td> Micro pinces </td><td> AESCULAP </td><td> FB329R </td><td></td></tr></tbody></table>

orthotopic small bowel transplantation in rats

Transplantation d&#39;intestin grêle est devenue une option clinique acceptée pour les patients atteints du syndrome de l&#39;intestin court et l&#39;échec de la nutrition parentérale (insuffisance intestinale irréversible). Dans les centres spécialisés amélioration opérationnelle et les stratégies de gestion ont conduit à un excellent court et à moyen terme patient et la survie du greffon tout en offrant une qualité de vie élevée 1,3. Contrairement à la transplantation plus fréquente d&#39;autres organes solides (c.-à-cœur, le foie), de nombreux mécanismes sous-jacents de la fonction du greffon et des modifications immunologiques induites par la transplantation intestinale ne sont pas entièrement connues 6,7. Les épisodes de rejet aigu, septicémie et l&#39;insuffisance chronique du greffon sont les principaux obstacles encore qui contribuent à moins favorable des résultats à long terme et d&#39;entraver un emploi plus répandu de la procédure en dépit d&#39;un nombre croissant de patients sous nutrition parentérale à domicile qui pourraient potentiellement bénéficier d&#39;une telle greffe. L&#39;intestin grêle contientun grand nombre de leucocytes passagers communément appelé dans le cadre de l&#39;intestin système lymphoïde associé (GALT), cette partie étant la raison de la forte immunogénicité du greffon intestinal. La présence et la proximité de nombreux commensaux et pathogènes dans l&#39;intestin, explique la sévérité des épisodes de septicémie fois greffe intégrité de la muqueuse est compromise (par exemple par le rejet). Pour faire avancer le domaine de l&#39;informatique intestinales et la transplantation multiviscérale plus générés à partir de modèles animaux fiables et réalisables est nécessaire. Le modèle proposé ici combine à la fois la fiabilité et la faisabilité une fois établi dans une manière normalisée et peuvent fournir de précieuses informations sur les sous-jacents complexes moléculaires, les mécanismes cellulaires et fonctionnels qui sont déclenchés par transplantation intestinale. Nous avons utilisé avec succès et affiné la procédure décrite depuis plus de 5 ans dans notre laboratoire 8-11. Le JoVE basé sur la vidéo format est particulièrement utile pour démontrer la procédure complexeDure et éviter les pièges initiaux pour les groupes envisagent d&#39;établir un modèle de rongeur orthotopique enquête transplantation intestinale.

Cours normal des activités post-opératoire Les animaux transplantés devrait se remettre rapidement de la procédure sous une lampe chauffante pendant environ 1 h. L&#39;hypothermie est une cause majeure de mortalité postopératoire et doit être soigneusement évité intra-et postopératoire. Pertes liquidiennes intra-opératoires doivent être remplacés par injection sous-cutanée de 2,5 ml solution saline normale et de 2,5 ml de glucose 5% tous les 8 heures, pendant les 24 premières heu...

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Orthotopic Small Bowel Transplantation in Rats

Transplantation d&#39;intestin grêle est devenue une option thérapeutique reconnue pour les patients atteints d&#39;insuffisance intestinale irréversible. Notre modèle expérimental de transplantation de l&#39;intestin chez les rats petite orthotopique est un outil fiable pour répondre immunologique sous-jacente et les processus inflammatoires qui compliquent la transplantation intestinale.

Orthotopique transplantation d&#39;intestin grêle chez le rat

Small  bowel transplantation has become an accepted clinical option for patients with  short gut syndrome and failure of parenteral nutrition ...

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Research

JoVE Journal

Medicine

14.1K vues.  University of Bonn, Germany. Transplantation d'intestin grêle est devenue une option thérapeutique reconnue pour les patients atteints d'insuffisance intestinale irréversible. Notre modèle expérimental de transplantation de l'intestin chez les rats petite orthotopique est un outil fiable pour répondre immunologique sous-jacente et les processus inflammatoires qui compliquent la transplantation intestinale.

Vidéo: Orthotopic Small Bowel Transplantation in Rats

Development of Obliterative Bronchiolitis in a Murine Model of Orthotopic Lung Transplantation

Orthotopic lung transplantation in rats was first reported by Asimacopoulos and colleagues in 1971 1. Currently, this method is well accepted and standardized not only for the study of allo-rejection but also between syngeneic strains for examining mechanisms of ischemia-reperfusion injury after lung transplantation. Although the application of the rat and other large animal model 2 contributed significantly to the elucidation of these studies, the scope of those investigations is limited by the scarcity of knockout and transgenic rats. Due to no effective therapies for obliterative bronchiolitis, the leading cause of death in lung transplant patients, there has been an intensive search for pre-clinical models that replicate obliterative bronchiolitis. The tracheal allograft model is the most widely used and may reproduce some of the histopathologic features of obliterative bronchiolitis 3. However, the lack of an intact vasculature with no connection to the recipient's conducting airways, and incomplete pathologic features of obliterative bronchiolitis limit the utility of this model 4. Unlike transplantation of other solid organs, vascularized mouse lung transplants have only recently been reported by Okazaki and colleagues for the first time in 2007 5. Applying the basic principles of the rat lung transplant, our lab initiated the obliterative bronchiolitis model using minor histoincompatible antigen murine orthotopic single-left lung transplants which allows the further study of obliterative bronchiolitis immunopathogenesis6.

Obliterative bronchiolitis is the key impediment to the long-term survival of lung transplant recipients and the lack of a robust preclinical model precludes examining obliterative bronchiolitis immunopathogenesis. Unlike other solid organ transplants, vascularized mouse lung transplantation has only recently been developed. Here we show our independently developed obliterative bronchiolitis model after murine orthotopic single-lung transplantation.

Développement de la bronchiolite oblitérante dans un modèle murin de transplantation pulmonaire orthotopique

Orthotopic lung transplantation in rats was first reported by Asimacopoulos and colleagues in 1971 1. Currently, this method is well accepted and ...

Recherche

Médecine

Orthotopic Liver Transplantation in Rats

Clinical progress in the field of liver transplantation has been largely supported by animal models1,2. Since the publication of the first orthotopic rat liver transplantation in 1979 by Kamada et al.3, this model has remained the gold standard despite various proposed alternative techniques4. Nevertheless, its broader use is limited by its steep learning curve5.
In this video paper, we show a simple and easy-to-establish revision of Kamada's two-cuff technique. The suprahepatic vena cava anastomosis is performed manually with a running suture, and the vena porta and infrahepatic vena cava anastomoses are performed utilizing a quick-linker cuff system6. Manufacturing the quick-linker kit is shown in a separate video paper.

We present an easy-to-establish revision of the classical two-cuff technique for orthotopic liver transplantation in rat.

Une transplantation hépatique orthotopique chez le rat

Clinical progress in the field of liver transplantation has been largely supported by animal models1,2. Since the publication of the first orthotopic rat ...

Orthotopic Aortic Transplantation in Mice for the Study of Vascular Disease

Vascular procedures involving anastomoses in the mouse are generally thought to be difficult and highly dependent on the skill of the individual surgeon. This is largely true, but there are a number of important principles that can reduce the difficulty of these procedures and enhance reproducibility. Orthotopic aortic transplantation is an excellent procedure in which to learn these principles because it involves only two end-to-end anastomoses, but requires good suturing technique and handling of the vessels for consistent success. This procedure begins with the procurement of a length of abdominal aorta from a donor animal, followed by division of the native aorta in the recipient. The procured aorta is then placed between the divided ends of the recipient aorta and sutured into place using end-to-end anastomoses. To accomplish this objective successfully requires a high degree of concentration, good tools, a steady hand, and an appreciation of how easily the vasculature of a mouse can be damaged, resulting in thrombosis. Learning these important principles is what occupies most of the beginner's time when learning microsurgery in small rodents. Throughout this protocol, we refer to these important points. This model can be used to study vascular disease in a variety of different experimental systems1-8. In the context shown here, it is most often used for the study of post-transplant vascular disease, a common long-term complication of solid organ transplantation in which intimal hyperplasia occurs within the allograft. The primary advantage of the model is that it facilitates quantitative morphometric analyses and the transplanted vessel lies contiguous to the endogenous vessel, which can serve as an additional control9. The technique shown here is most often used for mice weighing 18-25 grams. We have accumulated most of our experience using the C57BL/6J, BALB/cJ, and C3H/HeJ strains.

We describe a technique in which a section of the abdominal aorta from a mouse is transplanted orthotopically to just below the renal arteries in an allogeneic or syngeneic recipient. This technique can be useful in studies in which transplantation of large arteries of uniform size is deemed advantageous.

Transplantation orthotopique aortique chez la souris pour l&#39;étude des maladies vasculaires

Vascular procedures involving anastomoses in the mouse are generally thought to be difficult and highly dependent on the skill of the individual surgeon. ...

Orthotopic Hind Limb Transplantation in the Mouse

In vivo animal model systems, and in particular mouse models, have evolved into powerful and versatile scientific tools indispensable to basic and translational research in the field of transplantation medicine. A vast array of reagents is available exclusively in this setting, including mono- and polyclonal antibodies for both diagnostic and interventional applications. In addition, a vast number of genotyped, inbred, transgenic, and knock out strains allow detailed investigation of the individual contributions of humoral and cellular components to the complex interplay of an immune response and make the mouse the gold standard for immunological research. 
Vascularized Composite Allotransplantation (VCA) delineates a novel field of transplantation using allografts to replace "like with like" in patients suffering traumatic or congenital tissue loss. This surgical methodological protocol shows the use of a non-suture cuff technique for super-microvascular anastomosis in an orthotopic mouse hind limb transplantation model. The model specifically allows for comparison between established paradigms in solid organ transplantation with a novel form of transplants consisting of various different tissue components. Uniquely, this model allows for the transplantation of a viable vascularized bone marrow compartment and niche that have the potential to exert a beneficial effect on the balance of immune acceptance and rejection. This technique provides a tool to investigate alloantigen recognition and allograft rejection and acceptance, as well as enables the pursuit of functional nerve regeneration studies to further advance this novel field of transplantation.

This novel model for orthotopic hind limb transplantation in the mouse, applying a non-suture cuff technique for super-microvascular anastomosis, provides a powerful tool for in&#160;vivo mechanistic immunological research related to vascularized composite allotransplantation (VCA).

Orthotopique Hind Limb transplantation chez la souris

In vivo animal model systems, and in particular mouse models, have evolved into powerful and versatile scientific tools indispensable to basic and ...

A Pre-Clinical Porcine Model of Orthotopic Heart Transplantation

Fifty-years following the first successful report, cardiac transplantation remains the gold-standard treatment for eligible patients with advanced heart failure. Multiple small-animal models of heart transplantation have been used to study the acute and long-term effects of novel therapies. However, few are tested and demonstrated success in clinical trials. It is of critical importance to evaluate new therapies in a clinically relevant large-animal model for efficient and reliable translation of basic studies&#39;&#160;findings. Here, we describe a pre-clinical large-animal (porcine) model of orthotopic heart transplantation that has been firmly established and previously used to investigate novel cardioprotective strategies. This procedure focuses on acute ischemia-reperfusion injury and is a reliable method to investigate novel interventions which have been tested and validated in smaller experimental models, such as the murine model. We demonstrate its usefulness in assessing cardiac performance during the early post-transplantation period and other potential possibilities enabled by the model.

Here, we describe a pre-clinical large-animal (porcine) model of orthotopic heart transplantation that has been firmly established and utilized to investigate novel cardioprotective strategies.

Un modèle porcin préclinique de transplantation orthotopic de coeur

Fifty-years following the first successful report, cardiac transplantation remains the gold-standard treatment for eligible patients with advanced heart ...

Orthotopic Rat Kidney Transplantation: A Novel and Simplified Surgical Approach

Kidney transplantation offers increased survival rates and improved quality of life for patients with end-stage renal disease, as compared to any type of renal replacement therapy. Over the past few decades, the rat kidney transplantation model has been used to study the immunological phenomena of rejection and tolerance. This model has become an indispensable tool to test new immunomodulatory pharmaceuticals and regimens prior to proceeding with expensive preclinical large animal studies.
This protocol provides a detailed overview of how to reliably perform orthotopic kidney transplantation in rats. This protocol includes three distinctive steps that increase the probability of success: perfusion of the donor kidney by flushing through the portal vein and the use of a cuff system to anastomose the renal veins and ureters, thereby decreasing cold and warm ischemia times. Using this technique, we have achieved survival rates beyond 6 months with normal serum creatinine in animals with syngeneic or tolerant kidney transplants. Depending on the aim of the study, this model can be modified by pre- or posttransplant treatments to study the acute, chronic, cellular, or antibody-mediated rejection. It is a reproducible, reliable, and cost-effective animal model to study different aspects of kidney transplantation.

The purpose of this manuscript and protocol is to explain and demonstrate in detail the surgical procedure of orthotopic kidney transplantation in rats. This method is simplified to achieve the correct perfusion of the donor kidney and shorten the reperfusion time by using the venous and ureteral cuff anastomosis technique.

Greffe orthotopique de rein de rat: une approche chirurgicale nouvelle et simplifiée

Kidney transplantation offers increased survival rates and improved quality of life for patients with end-stage renal disease, as compared to any type of ...

Reduced Complications after Arterial Reconnection in a Rat Model of Orthotopic Liver Transplantation

The rat orthotopic liver transplantation (OLT) model is a powerful tool to study acute and chronic rejection. However, it is not a complete representation of human liver transplantation due to the absence of arterial reconnection. Described here is a modified transplantation procedure that includes the incorporation of hepatic artery (HA) reconnection, leading to a marked improvement in transplant outcomes. With a mean anhepatic time of 12 min and 14 s, HA reconnection results in improved perfusion of the transplanted liver and an increase in long-term recipient survival from 37.5% to 88.2%. This protocol includes the use of 3D-printed cuffs and holders to connect the portal vein and infrahepatic inferior vena cava. It can be implemented for studying multiple aspects of liver transplantation, from immune response and infection to technical aspects of the procedure. By incorporating a simple and practical method for arterial reconnection using a microvascular technique, this modified rat OLT protocol closely mimics aspects of human liver transplantation and will serve as a valuable and clinically relevant research model.

The goal of this study is to modify the rat orthotopic liver transplant model to better represent human liver transplantation and improve recipient survival. The presented method reestablishes hepatic arterial inflow by connecting the donor liver&#39;s common hepatic artery to the recipient liver&#39;s proper hepatic artery.

Complications réduites après reconnexion artérielle dans un modèle de rat de transplantation orthotopique de foie

The rat orthotopic liver transplantation (OLT) model is a powerful tool to study acute and chronic rejection. However, it is not a complete representation ...

Left Lung Orthotopic Transplantation in a Juvenile Porcine Model for ESLP

Lung transplantation is the gold-standard treatment for end-stage lung disease, with over 4,600 lung transplantations performed worldwide annually. However, lung transplantation is limited by a shortage of available donor organs. As such, there is high waitlist mortality. Ex situ lung perfusion (ESLP) has increased donor lung utilization rates in some centers by 15%-20%. ESLP has been applied as a method to assess and recondition marginal donor lungs and has demonstrated acceptable short- and long-term outcomes following transplantation of extended criteria donor (ECD) lungs. Large animal (in vivo) transplantation models are required to validate ongoing in vitro research findings. Anatomic and physiologic differences between humans and pigs pose significant technical and anesthetic challenges. An easily reproducible transplant model would permit the&#160;in vivo&#160;validation of current ESLP strategies and the preclinical evaluation of various interventions designed to improve donor lung function. This protocol describes a porcine model of orthotopic left lung allotransplantation. This includes anesthetic and surgical techniques, a customized surgical checklist, troubleshooting, modifications, and the benefits and limitations of the approach.

This protocol describes a juvenile porcine model of orthotopic left lung allotransplantation designed for use with ESLP research. Focus is made on anesthetic and surgical techniques, as well as critical steps and troubleshooting.

Transplantation orthotopique du poumon gauche dans un modèle porcin juvénile pour l’ESLP

Lung transplantation is the gold-standard treatment for end-stage lung disease, with over 4,600 lung transplantations performed worldwide annually. ...

A Rat Orthotopic Renal Transplantation Model for Renal Allograft Rejection

Renal allograft rejection limits the long-term survival of patients after renal transplantation. Rat orthotopic renal transplantation is an essential model to investigate the mechanism of renal allograft rejection in pre-clinical studies and could aid in the development of novel approaches to improve the long-term survival of renal allografts. Donor kidney implantation in rat orthotopic renal transplantation is commonly performed by end-to-side anastomosis to recipients' aorta and inferior vena cava. In this model, the donor's kidney was implanted using end-to-end anastomosis to the recipients' renal artery and renal vein. The donor's ureter was anastomosed to the recipient's bladder in an end-to-side 'tunnel' method. This model contributes to better healing of ureter-bladder anastomosis and increases the recipients' survival by avoiding interference with blood supply and venous reflux of the lower body. This model can be used to investigate the mechanisms of acute and chronic immune and pathologic rejection of renal allografts. Here, the study describes the detailed protocols of this orthotopic renal transplantation between rats.

The rat orthotopic renal transplantation model contributes to investigating the mechanism of renal allograft rejection. The current model increases the recipients' survival without interference with blood supply and venous reflux of the lower body using an end-to-end anastomosis of kidney implantation and an end-to-side "tunnel" method of ureter-bladder anastomosis.

Un modèle de transplantation rénale orthotopique de rat pour le rejet de l’allogreffe rénale

Renal allograft rejection limits the long-term survival of patients after renal transplantation. Rat orthotopic renal transplantation is an essential ...

Studying Murine Small Bowel Mechanosensing of Luminal Particulates

Gastrointestinal (GI) motility is critical for normal digestion and absorption. In the small bowel, which absorbs nutrients, motility optimizes digestion and absorption. For this reason, some of the motility patterns in the small bowel include segmentation for mixing of luminal contents and peristalsis for their propulsion. Physical properties of luminal contents modulate the patterns of small bowel motility. The mechanical stimulation of GI mechanosensory circuits by transiting luminal contents and underlying gut motility initiate and modulate complex GI motor patterns. Yet, the mechanosensory mechanisms that drive this process remain poorly understood. This is primarily due to a lack of tools to dissect how the small bowel handles materials of different physical properties. To study how the small bowel handles particulates of varying sizes, we have modified an established in vivo method to determine small bowel transit. We gavage live mice with fluorescent liquid or tiny fluorescent beads. After 30 minutes, we dissect out the bowels to image the distribution of fluorescent contents across the entirety of the GI tract. In addition to high-resolution measurements of the geometric center, we use variable size binning and spectral analysis to determine how different materials affect small bowel transit. We have explored how a recently discovered "gut touch" mechanism affects small bowel motility using this approach.

To study how the small bowel handles particulates of varying sizes, we have modified an established in vivo method to determine small bowel transit.

Étude de la mécanodétection de l’intestin grêle murin des particules luminales

Gastrointestinal (GI) motility is critical for normal digestion and absorption. In the small bowel, which absorbs nutrients, motility optimizes digestion ...