Le carcinome rénal clair de cellules ou CCRCC, est le sous-type le plus commun de cancer du rein. Localiser CCRCC a des résultats favorables avec la chirurgie. Cependant, un tiers des patients de CCRCC développeront la métastase éloignée au poumon.
Ce qui conduit à un très mauvais résultat pour les patients. Malheureusement, aucune thérapie n’est disponible pour cette étape mortelle. Comme le mécanisme moléculaire de la métastase reste allusif.
Le but de ce protocole est d’introduire et de comparer les deux modèles animaux récemment établis pour le CCRCC métastatique. Le premier modèle est la souris de l’implantation du sujet. Dans ce modèle murin, ccrcc hétérogène est implanté à la capsule rénale de la souris.
La croissance de tumeur et la métastase sont l’actif après 10 semaines. Le deuxième modèle est le modèle de membrane chorioallantoic de poulet, ou modèle cam. Dans ce modèle de poulet, le CCRCC hétérogène est implanté dans l’œuf.
La croissance tumorale et les cellules tumorales circulants sont des atouts après 10 jours d’implantation avant l’éclosion de l’embryon. La métastase pulmonaire est un atout après 24 jours d’implantation. C’est-à-faire deux semaines après l’éclosion.
Ces deux nouveaux modèles seront utiles pour étudier plus avant le mécanisme moléculaire derrière la métastase dans CCRCC. Veuillez noter que la procédure CAM n’est pas présentée dans cette vidéo. Le protocole détaillé du modèle CAM est décrit et filmé dans un autre article de Trove par Sharrow et coll.
Après anesthésier une souris, désinfecter le dos de la souris entièrement avec povidone-iode pour trois fois. Suivez à 70% ethnol une fois, et essuyez-le à sec avec des cotons-tiges stériles. Appliquez ensuite trois pansements médicaux stériles couvrant séquentiellement l’ensemble du dos afin de créer un champ chirurgical ainsi que d’immobiliser la souris.
Avant l’opération, les opérateurs doivent désinfecter leurs doigts avec de la povidone-iode. Placez la souris en position couchée. Et, utilisez les doigts pour localiser le rein gauche juste sous le flanc gauche.
Utilisez une paire de forceps contondants et de ciseaux pour ouvrir la peau et la couche musculaire sous l’emplacement spécifié. Utilisez des cotons-tiges stériles et des forceps pour extérioriser partiellement le rein gauche de l’abdomen. Chargez soit une seringue à insuline, soit une seringue Hamilton personnalisée avec la suspension cellulaire tumorale préparée séparément.
Injecter 20 microlitres de suspension cellulaire sous la capsule rénale. Retirez lentement l’aiguille afin de solidifier la solution de matrice cellulaire supplémentaire. Ainsi que pour prévenir les hémorragies ou les fuites de cellules tumorales.
Et puis, utilisez un coton-tige stérile pour repousser le rein dans l’abdomen. Utilisez la suture pour coudre la couche musculaire. Désinfecter la peau avec de la povidone-iode.
Et, fermez la peau avec des auto-clips enroulés. La pose orthotopique a planté des cellules de tumeur avec succès a grandi sur le rein de souris comme confirmé par BLI. Bien qu’il n’y ait eu aucune différence dans la croissance primaire, seulement la tumeur métastatique hétérogène a eu la métastase robuste au poumon.
La métastase a également été confirmée par immunohistochimie. De même, les comptes circulants de cellules de tumeur étaient plus élevés dans les souris portant la tumeur métastatique que ceux portant la tumeur non métastatique. En concordance avec le modèle de souris, le modèle CAM n’a également montré aucune différence de croissance entre les tumeurs métastatiques et non métastatiques.
D’autre part, le nombre de cellules tumorales circulant était significativement plus élevé dans les oeufs avec des tumeurs métastatiques. Des métastases histologiquement détectables ont été observées dans les poumons du poulet éclos. En conclusion, ce protocole a illustré deux nouveaux modèles animaux pour le CCRCC métastatique.
La souris et les modèles de poulet ont fidèlement récapitulé la métastase pulmonaire observée dans la clinique. Ces deux modèles précliniques seront utiles pour élargir la compréhension du mécanisme moléculaire derrière la métastase. Ainsi que de découvrir de nouveaux traitements pour le CCRCC métastatique.
