Ce protocole est l’un des protocoles de transplantation pulmonaire les plus simples pour les grands modèles animaux et fournit le plus de détails en termes de prise en charge chirurgicale. Les principaux avantages de cette technique sont la description de la chirurgie, l’évaluation de la fonction pulmonaire gauche isolée après la greffe et la stabilisation du porc pendant la chirurgie. La méthode est bénéfique dans la recherche sur la profusion pulmonaire ex-situ pour valider les résultats ex-situ avec un modèle de transplantation de reperfusion in vivo.
Le modèle de reperfusion in vivo de la transplantation pulmonaire est bénéfique pour tester les résultats de la profusion pulmonaire ex-situ et pourrait également être utilisé dans les tests d’organes artificiels, tels que les poumons bio-conçus ou mécaniques. Commencez par positionner le porc dans une position de décubitus latéral droit pour la thoracotomie latérale antérieure gauche. Identifiez ensuite l’extrémité de l’omoplate gauche dans l’apophyse xiphoïde, inférieure au sternum à la palpation, et reliez les deux points identifiés pour marquer le site d’incision de la thoracotomie de 20 centimètres de long.
Après avoir induit l’anesthésie, utilisez un scalpel pour faire une incision sur la peau, puis utilisez l’électrocautérisation pour disséquer les couches sous-cutanées et les couches musculaires de l’animal. Le grand dorsal doit être divisé. Après avoir identifié la côte immédiatement en dessous de l’incision, cautériser sur le dessus de la côte pour exposer les muscles intercostaux tout en évitant le faisceau neurovasculaire intercostal.
Utilisez un hémostatique anti-moustique pour percer les muscles intercostaux immédiatement au-dessus de la côte, puis palpez l’intérieur de la poitrine pour les adhérences avec un doigt. Pendant que le bord supérieur de la côte est cautérisé, repoussez le poumon à l’aide d’une aspiration de Yankauer pour étendre la thoracotomie antérieurement jusqu’à un pouce du sternum et postérieurement aux muscles paraspinaux. En insérant un écarteur sternal de Cooley, ouvrez la thoracotomie de 10 centimètres de large pour rétracter le poumon et exposer la veine hémiazygos gauche.
Utilisez des ciseaux Metzenbaum et un bas fin pour disséquer la veine hémiazygos gauche sur sa circonférence. En encerclant le vaisseau avec des liens de soie, ligaturez et transectez la veine. Disséquez l’artère pulmonaire gauche, ou PA, et les veines pulmonaires gauches, ou PV, avant d’encercler les veines dans les liens de soie.
Après cinq minutes d’administration d’héparine, clampez l’AP avec une pince croisée DeBakey, la PV antérieure gauche avec une pince Satinsky et la bronche gauche avec une pince Spoon Pots. Transectez l’AP, le PV inférieur gauche et la bronche gauche en laissant au moins 0,5 centimètre de brassard en tissu. Après avoir divisé le ligament pulmonaire inférieur gauche, retirez le poumon gauche.
Pour la transplantation, insérez le poumon du donneur dans la poitrine du receveur, en commençant par le lobe inférieur sans forcer le poumon à cet endroit. Effectuez ensuite l’anastomose bronchique à l’aide d’une suture Prolene 4.0 sur une aiguille TF. Pour évaluer l’anastomose bronchique dans les sécrétions d’aspiration, effectuez une bronchoscopie des poumons gauche et droit en insérant un bronchoscope dans le tube endotrachéal à l’aide d’un raccord adaptateur, puis connectez l’endoscope à l’aspiration avant de faire avancer le bronchoscope dans la bronche gauche.
Observez la respiration pulmonaire et inspectez les signes vitaux de l’anastomose bronchique. Répétez le processus sur le côté droit. Ensuite, utilisez une suture Prolene 6.0 sur des aiguilles BV-1 pour effectuer une anastomose de bout en bout de l’oreillette gauche ou de la LA, suivie d’une coupe de l’excès de tissu.
Après avoir incorporé les SVP donneurs dans l’anastomose PV inférieure et LA, complétez l’anastomose PA avec une suture Prolene 6.0 sur des aiguilles BV-1 à l’aide d’une anastomose de bout en bout courante. Plus tard, confirmez l’héparinisation et administrez un changement de potassium à l’animal. Ouvrez ensuite partiellement la pince PA pour désaérer et laissez le sang circuler à travers la ligne de suture.
Ensuite, relâchez la pince LA et laissez la ligne de suture saigner pour libérer davantage l’air emprisonné. Attachez le LA, puis retirez complètement la pince PA. Une fois cela fait, retirez la pince bronchique et augmentez les volumes courants jusqu’à atteindre 10 millilitres par kilogramme.
Après avoir inséré une sonde thoracique malléable 20 français, fermez la thoracotomie en trois couches. À l’aide de ciseaux de Metzenbaum, ouvrez la plèvre gauche pour prélever des échantillons de sang dans le lobe inférieur gauche. Ouvrez la plèvre droite pour disséquer l’artère pulmonaire droite.
Placez ensuite une pince pour arrêter la perfusion du poumon droit. Dirigez une aiguille de calibre 21 vers les veines pulmonaires gauches et loin de l’oreillette gauche commune pour prélever un échantillon de sang de l’anastomose LA afin d’évaluer la fonction pulmonaire gauche. Après le clampage, prélevez les échantillons de sang de l’anastomose PV gauche à l’aide d’une aiguille de calibre 21 dirigée vers le poumon gauche.
L’analyse représentative indique des changements typiques du rapport PF et la formation d’un œdème au cours du protocole de transplantation pulmonaire. Lors de la reperfusion, les rapports PF ont chuté d’environ 100 millimètres de mercure car le poumon gauche n’était pas immédiatement efficace pour l’oxygénation. Lors de l’évaluation du poumon gauche isolé à quatre heures, le rapport PF était stable.
Lors d’une greffe réussie, le poumon gauche pourrait subir un gain de poids d’environ 20 % à 50 % en raison du sang résiduel dans la circulation. Après 12 heures de greffe du poumon gauche, l’analyse des gaz du sang a été effectuée. Il a été observé que le taux de potassium était augmenté pendant 60 à 120 minutes de reperfusion.
Environ deux à quatre quarts de travail ont été nécessaires pendant quatre heures de reperfusion pour maintenir le potassium en dessous de cinq millimoles par litre. Au lieu de suturer les veines pulmonaires supérieures du receveur, les pinces à morsure latérales peuvent être utilisées pour le contrôle vasculaire et les vaisseaux peuvent être facilement cousus.
