Les problèmes actuels de transplantation hépatique nécessitent la mise en œuvre de grands modèles animaux. Ce protocole décrit la technique de transplantation hépatique orthotopique porcine sans pontage veino-veineux. Cette technique réduit considérablement la complexité logistique et technique de la procédure.
De plus, en greffant des foies après 20 heures d’entreposage frigorifique statique, notre modèle simule des conditions de donneur à critères étendus. Commencez par placer le porc donneur anesthésié en décubitus dorsal et fixez les membres à la base de la table d’opération avec des bandes élastiques. Frottez la peau avec un agent antiseptique et couvrez l’animal avec des rideaux stériles.
Après avoir confirmé la perte du réflexe pétal, effectuer une laparotomie médiane commençant au processus xiphoïde en utilisant la cautérisation monopolaire et couper les ligaments falciformes et triangulaires à l’aide de ciseaux et de cautérisation bipolaire. Après un curage hépatique suffisant, inciser la partie gauche du diaphragme sur une distance de 5 à 10 centimètres à l’aide de ciseaux pour localiser le segment thoracique de l’aorte descendante. Encerclez et placez une ligature de polyfilament 3-0 sans serrer.
Inciser la partie droite du diaphragme sur une distance de 5 à 10 centimètres à l’aide de ciseaux et identifier la veine cave suprahépatique inférieure. Déplacez l’intestin en haut à gauche du donneur et entrez dans l’espace rétropéritonéal par incision transversale du péritoine sur une distance de 5 à 10 centimètres à l’aide de ciseaux. Placez deux ligatures polyfilamentaires 3-0 autour de l’aorte abdominale.
Un crânien de la bifurcation iliaque et un d’environ 3 centimètres crânienne sans resserrement. Placez une autre ligature autour de la veine cave infrahépatique inférieure sans serrer. Serrez la première ligature située caudale autour de l’aorte abdominale.
Après avoir obstrué crânienne l’aorte abdominale de la deuxième ligature, faites une incision transversale entre les deux ligatures à l’aide de ciseaux. Insérez la canule dans l’incision et fixez-la avec la ligature restante. À l’aide de ciseaux, sectionner la veine cave inférieure suprahépatique loin crânienement près de l’oreillette droite.
Après une perte de sang d’environ 1 500 à 2 000 millilitres, serrez le segment thoracique de l’aorte descendante en attachant la ligature et commencez la perfusion antégrade. Serrez la ligature placée autour de la veine cave infrahépatique inférieure. Inciser le vaisseau crânienne de la ligature et insérer l’aspirateur chirurgical.
Après perfusion avec 3 500 millilitres de solution de conservation pendant environ 10 à 15 minutes, couper la veine cave suprahépatique inférieure interne du porc donneur, puis sectionner la veine cave infrahépatique inférieure au niveau de la veine rénale gauche. Sectionner le canal biliaire crânien du tissu pancréatique entre deux ligatures polyfilamentaires 3-0 pour éviter les déversements de bile, puis sectionner la veine porte crânienne du pancréas. Localisez l’artère cœliaque après une préparation émoussée et suivez dorsalement jusqu’à l’aorte abdominale.
Extrayez le segment aortique respectif pour créer un patch pour la greffe. Extrayez le diaphragme autour de la veine cave superhépatique inférieure et coupez les adhérences restantes à l’aide de ciseaux. Extraire le foie et placer sur de la glace.
Effectuez une cholécystectomie ou resserrez une ligature autour du canal kystique, puis rincez le canal cholédoque avec au moins 20 millilitres de solution de conservation. Placez la canule de perfusion dans la veine porte et rincez le greffon avec 500 millilitres de solution de conservation. Placez le greffon dans un bol stérile placé sur de la glace.
Enlevez le tissu lymphatique du segment aortique et de l’artère hépatique, identifiant et obstruant ainsi les branches latérales artérielles et les vaisseaux lymphatiques avec des clips, des ligatures ou des sutures. Procédez de la même manière avec la veine porte. Effectuer le raccourcissement des vaisseaux et la préparation du patch aortique uniquement lors de la greffe et de la greffe pour tenir compte des circonstances anatomiques individuelles.
Identifier la veine cave super hépatique inférieure et placer des sutures autour des deux veines diaphragmatiques après avoir enlevé le tissu diaphragmatique environnant. Placer le porc receveur anesthésié en décubitus dorsal. Entrez dans la cavité abdominale et coupez les ligaments falciformes et triangulaires de l’animal anesthésié à l’aide de ciseaux et de cautérisation bipolaire comme démontré précédemment.
Après une dissection hépatique suffisante, encercler la veine cave inférieure supra et infrahépatique près du parenchyme hépatique. Inciser la couche péritonéale superficielle recouvrant le ligament hépatoduodénal et identifier les artères hépatiques avant d’entrer dans le parenchyme hépatique. Disséquer en utilisant une cautérisation bipolaire ou en plaçant les clips, les ligatures ou les sutures.
Disséquer et sectionner le canal cholédoque sous la jonction du canal kystique entre deux ligatures. Identifiez la veine porte et encerclez-la près du parenchyme hépatique. Identifier l’aorte abdominale après avoir incisé la couche avasculaire entre les muscles diaphragmatiques droit et gauche.
Préparer l’aorte pour l’anastomose aortique en enlevant le tissu environnant. Effectuer une hépatectomie du receveur en insérant une pince vasculaire traumatique sur la veine porte et en sectionnant la veine porte près du parenchyme hépatique suivie de la veine cave infrahépatique. Placez une pince vasculaire atraumatique sur la veine cave suprahépatique, y compris le diaphragme environnant, tout en rétractant caudalement le foie et en sectionnant le vaisseau près du parenchyme hépatique.
Retirez le foie receveur de la cavité abdominale. Placez le foie du donneur dans la cavité abdominale et raccourcissez la veine cave suprahépatique du donneur ou du receveur inférieure à une longueur adéquate tout en évitant le pliage ou une tension excessive sur l’anastomose. Placer une seule suture monofilament 5-0 comme fil de support adaptant le coin droit de la veine cave suprahépatique donneuse et receveuse inférieure.
Commencez la face dorsale de l’anastomose à partir du coin gauche des vaisseaux avec une suture de course monofilament à double bras 5-0. Retirez le fil de support lorsque vous atteignez le coin droit et fixez la suture en cours d’exécution avec une pince, puis continuez avec la face ventrale de l’anastomose, à nouveau, en commençant par le coin gauche des vaisseaux. Après avoir terminé la face ventrale de l’anastomose, serrez la suture avec plusieurs nœuds sans resserrer le diamètre du vaisseau pour éviter la sténose.
Effectuer une anastomose vasculaire de la veine porte donneuse et receveuse comme démontré précédemment à l’aide d’une suture monofilament 6-0 à double bras. Commencez la reperfusion veineuse porte en retirant la pince vasculaire, en obstruant la veine porte receveuse et en obstruant la veine cave infrahépatique inférieure du donneur avec une pince vasculaire après avoir drainé environ 200 à 400 millilitres de sang. Retirez lentement la pince vasculaire obstruant la veine cave hépatique inférieure supra hépatique receveuse et recherchez un saignement actif.
Raccourcir la veine cave infrahépatique donneuse et/ou receveuse inférieure. Effectuer ensuite une anastomose vasculaire de la veine cave inférieure inférieure du donneur et du receveur. Après avoir serré l’aorte abdominale et fait une incision pour s’adapter au patch, commencez l’anastomose aortique avec une suture de course monofilament à double bras 6-0 au coin crânien de l’incision ou du patch.
Lorsque vous atteignez le coin caudal, fixez la suture en cours d’exécution avec une pince et terminez à nouveau l’anastomose en commençant par le coin crânien. Serrez la suture avec plusieurs nœuds et retirez lentement la pince vasculaire après avoir vérifié toutes les anastomoses vasculaires. Placez un cathéter dans le canal cholédoque et fixez-le avec une seule ligature.
Fermez temporairement l’abdomen en adaptant le fascia musculaire et la peau avec une suture courante et couvrez l’abdomen avec un film collant ou des rideaux pour éviter les pertes thermiques. La durée moyenne de l’opération était de 103,50 minutes, y compris une phase moyenne et hépatique de 27,13 minutes. Seuls deux receveurs ont subi une phase anhépatique de plus de 30 minutes, tandis que tous les receveurs ont montré une baisse des concentrations sériques de lactate 4 heures après la reperfusion veineuse portale.
Les receveurs avaient besoin de concentrations accrues de noradrénaline immédiatement avant et pendant la phase hépatique pour stabiliser la pression artérielle moyenne à 60 millimètres de mercure ou plus. De faibles concentrations d’épinéphrine ont été utilisées simultanément pour augmenter le débit cardiaque au cours de cette période vulnérable. Après la greffe, la pression artérielle moyenne et les doses requises de vasopresseurs sont restées stables.
Les valeurs de LiMAx obtenues 6 heures après la reperfusion veineuse porte étaient comparables aux valeurs mesurées chez les donneurs de foie avant l’obtention d’organes chez tous les receveurs sauf un avec une phase hépatique de 34 minutes. Ce modèle peut être particulièrement intéressant en tant que lecture pour les bilans axés sur les mécanismes de l’ischémie et des lésions de reperfusion et le reconditionnement des organes donneurs à critères étendus.
