A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.
Method Article
הפרוטוקול הנוכחי קובע מודל חולדה של פגיעה בעצב הפנים באמצעות מיקרוסקופיה כדי לחקור את המנגנונים האבחנתיים והטיפוליים של שיתוק פנים אידיופטי
שיתוק פנים אידיופטי הוא הסוג הנפוץ ביותר של פגיעה בעצב הפנים, המהווה כ-70% ממקרי שיתוק הפנים ההיקפי. מחלה זו יכולה לא רק להוביל לשינוי בהבעות הפנים אלא גם להשפיע מאוד על הפסיכולוגיה של החולים. במקרים חמורים, זה יכול להשפיע על העבודה והחיים הרגילים של המטופלים. לכן, למחקר על תיקון פגיעות עצב בפנים יש משמעות קלינית חשובה. על מנת לחקור את המנגנון של מחלה זו, יש צורך לבצע ניסויים רלוונטיים בבעלי חיים, ביניהם המשימה החשובה ביותר היא להקים מודל של בעלי חיים עם אותה פתוגנזה כמו מחלות אנושיות. הדחיסה של עצב הפנים בתוך העצם הפטרוזית, במיוחד תא המטען העצבי בצומת הקצה הדיסטלי של תעלת השמע הפנימית ומקטע המבוך, היא הפתוגנזה של שיתוק פנים אידיופטי על מנת לדמות מחלה שכיחה זו, נקבע במחקר זה מודל פגיעת דחיסה של המקטע החוץ-גולגולתי העיקרי של עצב הפנים. הנזק הנוירולוגי הוערך על ידי בדיקה התנהגותית, נוירו-אלקטרופיזיולוגית והיסטולוגית. לבסוף, כוח קבוע של 50 גרם ופגיעת מהדק של 90 שניות נבחרו כפרמטרי הפציעה לבניית מודל שיתוק פנים אידיופטי יציב.
כסוג של שיתוק פנים היקפי, שיתוק פנים אידיופטי אופייני לאטיולוגיה לא ידועה, הופעה חריפה ומהלך הגבלה עצמית 1,2. האטיולוגיה והפתוגנזה של שיתוק פנים אידיופטי עדיין אינם ודאיים3. נכון להיום, קיימות שיטות טיפול שונות לשיתוק פנים4, ומגוון הטיפולים משקף את היעדר אפשרויות הטיפול האופטימליות. שימוש בטכניקות של ביולוגיה תאית ומולקולרית לחקר מנגנון הפגיעה בעצב הפנים הוא הבסיס לביסוס שיטות טיפול יעילות לשיתוק פנים. לכן, חשוב במיוחד מודל מתאים ויציב לפגיעה בעצב הפנים.
נכון לעכשיו, אין שיטה סטנדרטית להקמת מודל פגיעה בעצב הפנים. שיטות ההכנה הנוכחיות כוללות חיסון וירוסים5, חתך6, גירוי קור7 ודחיסה8. הוא האמין כי זיהום ויראלי, כלי דם נוירוטרופובלסטיים, דלקת אוטואימונית וכו', כולם עלולים לגרום לאיסכמיה מקומית, ניוון ובצקת של עצב הפנים 9,10,11. יתר על כן, כל הגורמים לעיל יכולים לגרום לדחיסה של תא המטען הראשי של עצב הפנים בתעלת עצב הפנים הגרמית הצרה12,13. בנוסף, הפגיעות העצביות ההיקפיות השכיחות ביותר שזוהו במהלך פרוצדורות כירורגיות היו דחיסה וחבלה14. בהתבסס על התיאוריות והתופעות הקליניות לעיל, אנו מאמינים כי הכנת מודל הפגיעה בעצב הפנים באמצעות פגיעת דחיסה היא סבירה יותר. עם זאת, רוב השיטות הנוכחיות ליישום פציעות דחיסה אינן מספקות פרמטרים כמותיים של כוח וזמן. במחקר זה, כימתנו את הכוח ומשך פגיעת הדחיסה כדי לשפר את יכולת השחזור של המודל שהוקם.
כל הניסויים בבעלי חיים אושרו ופיקוחו על ידי ועדת האתיקה של בעלי חיים של בית החולים שינחואה המסונף לבית הספר לרפואה של אוניברסיטת שנחאי ג'יאוטונג (XHEC-F-2023-061). חולדות זכר Sprague-Dawley, 200-300 גרם, שימשו למחקר הנוכחי. בעלי החיים הושגו ממקור מסחרי (ראו טבלת חומרים). החולדות חולקו באופן אקראי לארבע קבוצות (n = 10): קבוצת ניתוח דמה, קבוצת פציעות של 30 שניות, קבוצת פציעות של 60 שניות וקבוצת פציעות של 90 שניות.
1. אינדוקציה של הרדמה והכנת בעלי חיים
2. קביעת מודל פגיעת ריסוק מקומי של תא המטען החוץ-גולגולתי של עצב הפנים
הערה: עקר את כל הציוד לפני השימוש. כל הניתוחים בוצעו בחדר הניתוח.
3. בדיקות התנהגותיות
הערה: תפקוד עצב הפנים של החולדות הוערך לפני הניתוח ו-48 שעות לאחר הניתוח (איור 1). הציונים של רפלקס המצמוץ, תנועת המישוש ומיקום קצה האף חושבו15. ככל שהציון הכולל גבוה יותר, כך דרגת הפגיעה בעצב הפנים חמורה יותר (טבלה 1).
4. זיהוי נוירו-אלקטרופיזיולוגי
הערה: אלקטרוגרפיה של הפנים (ENoG) בוצעה לפני הפציעה, מיד לאחר הניתוח ו-48 שעות לאחר הניתוח (איור 2, טבלה 2, טבלה 3 וטבלה 4).
5. בדיקה היסטולוגית
בדיקות התנהגותיות
לפני הניתוח, הציונים של רפלקס מצמוץ, תנועת מישוש ומיקום קצה האף היו 0 נקודות בכל חולדות הניסוי, מה שמצביע על כך שלכל החולדות היה תפקוד עצב פנים שלם. בהערכת תפקוד עצב הפנים 48 שעות לאחר הניתוח, נמצא כי הציונים האישיים של חולדות בכל קבוצת פציעה גד?...
יש צורך ללמוד את מנגנון התיקון של פגיעה בעצב הפנים בחולים עם שיתוק פנים אידיופטי17. מידת הפגיעה בעצב הפנים צריכה לעמוד בדרישות הבאות. ראשית, דרגת הפגיעה בעצב הפנים לא צריכה להיות קלה מדי, כמו סנדרלנד דרגה 1דרגה 18, שיכולה לתקן את עצמה לחלוטין ...
המחברים הצהירו כי לא קיימים ניגודי אינטרסים מתחרים.
עבודה זו נתמכה על ידי מענקי פרויקט מהקרן הלאומית למדעי הטבע של סין (82203637) והקרן לפיתוח מדע וטכנולוגיה של האוניברסיטה הרפואית נאנג'ינג (NMUB20210220).
Name | Company | Catalog Number | Comments |
4% paraformaldehyde fixing solution | Beyotime Biotechnology | P0099 | |
Clean bench | Airtech | ||
Electronic balance | Shanghai Precision Instrument Factory | AS909 | |
Freezing microtome | Leica | CM1900 | |
Hematoxylin eosin (HE) staining kit | Beyotime Biotechnology | C0105S | |
Ketamine | Sigma | 57074-21-2 | |
Optical photographic microscope | Olympus | IX90 | |
Pentobarbital sodium | ChemSrc | 57-33-0 | |
Quantitative peripheral nerve injury forceps | In-house | Patent number: CN20082015530.3 | |
Sprague-Dawley rats | Jiangsu Jicui Yaokang Biotechnology Co., Ltd | ||
Surgical operating microscope | OPMI 1FR proergo | ZEISS |
Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article
Request PermissionThis article has been published
Video Coming Soon
Copyright © 2025 MyJoVE Corporation. All rights reserved