Name: intrauterine telemetry to measure mouse contractile pressure in vivo
Uploaded: 2015-04-06T15:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 3 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Intrauterine Telemetry to Measure Mouse Contractile Pressure In Vivo at JoVE.com

This work was supported by funding from the March of Dimes FY12-133 (S.K.E.) and the National Institutes of Health R01HD037831 (S.K.E.). We would like to thank Dr. Deborah Frank for critical review of the manuscript.

הערה: כל נהלי בעלי החיים עמדו בהנחיות לטיפול ושימוש בבעלי החיים שנקבעו על ידי המכון הלאומי לבריאות. כל הפרוטוקולים אושרו על ידי ועדת בעלי החיים באוניברסיטת וושינגטון בסנט לואיס. הערה: חומרים ספציפיים וציוד לפרוטוקול זה מופיעים חומרים וציוד שולחן. 1. גידול מתוזמן של נקבות עכברים <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> גזע נשים בוגרות בין שניים לשישה חודשים של גיל בחלון זמן 2 hr עם זכרים. שעה רבייה ספציפית אין צורך כל עוד הם נשמרים עקביים למכלול הניסוי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאשר את ההריון על ידי הנוכחות של תקע הזדווגות. לייעד את היום ושעה שבו התקע נראה לראשונה כמו יום שלאחר משגל-0 (dpc0). זכור שעה מסוימת כאשר מתחיל הקלטת לחץ. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לבצע ניתוחים על dpc8-13. DPC המדויק תלוי בזן העכבר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כדי לקבוע אם עכבר הוא בהריון לפני הניתוח, PEההדמיה אולטרסאונד rform של הבטן עם בדיקה מערך ליניארי 40 MHz מצמידים את מערכת הדמיה לפני מתן הרדמה. זה יאפשר להדמיה של שקי הריון. אם מערכת אולטרסאונד אינה זמינה, השתמש במשקל של העכבר. הערה: עלייה במשקל של לפחות 2 גרם בין dpc0 וdpc8 והתנפחות של הבטן הוא אינדיקטור טוב להריון. </li></ol> 2. ניתוח טלמטריה Prep <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> השתמש החיטוי לעקר מכשירים, גזה, צמר גפן, וילונות כירורגי, וטיפים פיפטה בתוך 24 שעות לפני הניתוח. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> משטח ניתוח נקי עם אתנול 70%. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הפעל כרית חימום (מתמחה למכרסמים) ומעקר את החרוז. </li></ol> 3. ניתוח טלמטריה <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להרדמה, להשתמש 4-5% isoflurane עם קצב זרימת חמצן של 1-2 ליטר / דקה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חכה עד שהעכבר מראה סימנים של הרדמה ולאחר מכן להזריק תת עורי עם עצירות (משכך כאבים: 0.1 מיליליטר לכל 20 גרם). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לגלח את הבטן של העכבר מהחלק התחתון של הצלעות עד לשלפוחית ​​השתן. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להביא את העכבר לשולחן הניתוחים על כרית חימום מראש התחמם, ולכסות את עיניו של העכבר עם משחת עיניים כדי למנוע התייבשות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> תתחיל בטכניקה סטרילית. לשים על כפפות סטריליות ולשמור את העטיפה כמשטח סטרילי בו יש להציב סקראבס יוד ואתנול. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הסר את מַד מֶרְחָק מהחבילה או מלוח ולהשתמש במלקחיים סטרילי כדי למקם אותו בגזה סטרילית. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> השתמש במזרק (המסופק על ידי ספק מַד מֶרְחָק) כדי למלא את קצה הצנתר עם ג&#39;ל. יש ללחוץ בעדינות את הקטטר יצירת לחץ שלילי מספיק כדי למשוך את הג&#39;ל לקטטר. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הנח טיפ סטרילי בפיפטה. פיפטה 2 μl של דבק כירורגים ולהגדיר את פיפטה על משטח סטרילי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כדי לנקות את האתר כירורגית, ספוגית האזור עם יוד ולאחר מכן עם 70% אתנול. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חותך חור בווילון כירורגי פשוט הגדול מספיקלשטח הדרוש לחתך והמקום על העכבר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בצע קמצוץ רגל (תגובת דוושה) כדי להבטיח את העכבר הוא מורדם לחלוטין לפני ביצוע חתך. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לעשות חתך קו האמצע אנכי קטן. בשלב הבא, לעשות חתך דומה דרך קיר גוף השריר הבסיסי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> משוך בעדינות את הרחם אל מחוץ לחלל הגוף ולאתר את קרן הרחם המכילה את רוב הגורים שהם קיימא. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אופציונאלי - לתוספת של מירנה, להזריק וקטור נגיפי אל תוך שכבת שריר של רחם לפני החדרת מַד מֶרְחָק. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לעשות חתך קטן בקצה של קרן הרחם עם 3 מ&quot;מ חיתוך מספריים אביב קצה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> השחל את הצנתר, ללא סחיטה, בין דופן הרחם וצקים עובריים. הכנס את קטטר העבר כמה שקים כדי להפחית ההסרה המקרית שלה. ודא שקים העובריים אינם מופרעים על ידי ההכנסה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> פיפטה דבק כירורגים לאתר של הכנסת מַד מֶרְחָק לדבוק קטטר לuקרן terine ולמנוע את הקטטר מלהחליק מתוך קרן הרחם. חכה כמה שניות עד שהדבק להפוך נוקשה, ולאחר מכן למקם את הרחם בזהירות בחזרה בתוך חלל הגוף. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הנח את מַד מֶרְחָק בחלל הגוף בצד השני של אתר הכנסת קטטר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> תפר את חלל הגוף סגור עם 6.0 תפרים נספגים. ראשית, לעשות תפר תיק ולאחר מכן 03:57 תפרים בודדים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לתפור את העור על ידי שימוש באותה הטכניקה, אבל עם תפר 6-0 לא נספג. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> dibucaine ספוגית (משכך כאבים אקטואליים) משחה על אתר החתך. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הזרק 0.3-0.4 מיליליטר של תמיסת מלח סטרילית תת עורי כדי לעזור רעננותם של בעלי החיים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לפקח על בעלי החיים לאחר הניתוח עד שהוא ער לחלוטין. אל תניח את העכבר לכלוב שלו עד שהוא מסוגל להחזיק באופן חופשי את ראשה מעל לטבלת סוגים מסוימים של מצעים יכולים לחנוק את העכבר הרדים בכבדות. לעכבר שכבר הרדים במשך 30-45 דקות, יש לצפות העכבר e להיות ער באופן מלא על ידי 1 שעה ו -15 דקות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אם ביצוע ניתוחים נוספים, לנגב מכשירים עם אתנול 70% וחרוז לעקר לפני שימוש חוזר. </li></ol> -ניתוח ההודעה Recovery 4. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לעקוב אחר התקדמות לאחר ניתוח יומי ביומן. קטלוג עלייה במשקל והפסד ולצפות לעייפות, דימום, או סגירה חלקית של החתך הניתוחי. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להאכיל את אוכל העכבר התרכך עכבר (~ העקביות של רסק תפוחים) או מזון התאוששות דיאטה מיוחד. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בדוק את התפרים ולוודא שהם לא הוציאו, אבל מנסים לא להתמודד עם העכבר מוגזם. </li></ol></li></ol> 5. טלמטריה הקלטה <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ביום של עניין (לפחות 2-3 ימים לאחר העכבר התאושש מניתוח), למקם את מגנט ליד העכבר כדי להפעיל את מַד מֶרְחָק. שים את כלוב העכבר על המקלט. הנורית במקלט צריכה להפעיל אם מַד מֶרְחָק מופעל. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לכייל teleme החדש<html> ters עם כיולים מסוימים יצרן סיפק. מפרטי כיול מַד מֶרְחָק שימוש חוזר, יישמרו בתוכנה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בתוך התוכנה, להתחיל בהקלטה על ידי לחיצה ימנית על &quot;חיה&quot; ולחץ על &quot;התחל דגימה, רציפה,&quot; המאפשרת דגימה בשיעורים של עד 500 הרץ. ודא שהתוכנה מוגדרת כדי לשמור ולעקוב אחר. הערה: כאשר סמל עכבר הדגימה הופך ירוק, לחצים מתועדים. מטריד את העכבר במהלך הלידה יכולה להפריע או לשנות עבודה, כך להתבונן בזהירות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאחר תקופת לידה או זמן של עניין, לעצור את הקלטה על ידי לחיצה ימנית על &quot;בעל חיים&quot; ובחירה באפשרות &quot;להפסיק הקלטות, כל&quot;. השתמש במגנט כדי לכבות מַד מֶרְחָק כדי להציל את חיי סוללה, כסוללת מַד מֶרְחָק תהיה אחרונה בדרך כלל רק עבור 1.5 חודשים של הקלטה רציפה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להרדים את העכבר על ידי CO 2 יתר ולשחזר את מַד מֶרְחָק. גורים מומתים על ידי עריפת ראש. </li></ol>&quot;&gt; 6. עיקור מַד מֶרְחָק tle <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הנח את מַד מֶרְחָק בתמיסה של 1% חומר ניקוי אנזים במים למשך לילה deionized בטמפרטורת חדר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> יש לשטוף את מַד מֶרְחָק במים ללא יונים ולהסיר את כל הרקמה ודבק, נזהר שלא לסחוט את הקטטר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> דגירה מַד מֶרְחָק בglutaraldehyde 2% למשך 24 שעות בטמפרטורת חדר כדי לעקר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> יש לשטוף את מַד מֶרְחָק עם תמיסת מלח סטרילית ולאחסן אותו בתמיסת מלח סטרילית עד ההשתלה הבאה או להישלח חזרה ליצרן להיות משופץ. יש שופץ Telemeters אם רקמה ממוקמת בתוך קטטר לאחר עיקור. בדרך כלל ניתן להשתמש telemeters 4-5 פעמים לפני הצורך להיות משופצים. </li></ol>

<ol>
	<li>Slattery, M. M., Morrison, J. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Preterm+delivery.">Preterm delivery.</a> Lancet. 360, 1489-1497 (2002).</li><li>Goldenberg, R. L., Culhane, J. F., Iams, J. D., Romero, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Epidemiology+and+causes+of+preterm+birth.">Epidemiology and causes of preterm birth.</a> Lancet. 371, 75-84 (2008).</li><li>Keelan, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pharmacological+inhibition+of+inflammatory+pathways+for+the+prevention+of+preterm+birth.">Pharmacological inhibition of inflammatory pathways for the prevention of preterm birth.</a> Journal Of Reproductive Immunology. 88, 176-184 (2011).</li><li>Voltolini, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Understanding+spontaneous+preterm+birth:+from+underlying+mechanisms+to+predictive+and+preventive+interventions.">Understanding spontaneous preterm birth: from underlying mechanisms to predictive and preventive interventions.</a> Reproductive Sciences. 20, 1274-1292 (2013).</li><li>Ratajczak, C. K., Muglia, L. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Insights+into+parturition+biology+from+genetically+altered+mice.">Insights into parturition biology from genetically altered mice.</a> Pediatric research. 64, 581-589 (2008).</li><li>Rajakumar, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Placental+HIF-1+alpha,+HIF-2+alpha,+membrane+and+soluble+VEGF+receptor-1+proteins+are+not+increased+in+normotensive+pregnancies+complicated+by+late-onset+intrauterine+growth+restriction.">Placental HIF-1 alpha, HIF-2 alpha, membrane and soluble VEGF receptor-1 proteins are not increased in normotensive pregnancies complicated by late-onset intrauterine growth restriction.</a> American Journal Of Physiology. Regulatory, Integrative And Comparative Physiology. 293, (2007).</li><li>Whitesall, S. E., Hoff, J. B., Vollmer, A. P., D'Alecy, L. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+simultaneous+measurement+of+mouse+systolic+arterial+blood+pressure+by+radiotelemetry+and+tail-cuff+methods.+American+journal+of+physiology.">Comparison of simultaneous measurement of mouse systolic arterial blood pressure by radiotelemetry and tail-cuff methods. American journal of physiology.</a> Heart And Circulatory Physiology. 286, H2408-H2415 (2004).</li><li>Mackay, L. B., Shi, L. B., Maul, H. .., Maner, W. L., Garfield, R. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effect+of+bilateral+pelvic+neurectomy+on+cervical+ripening+in+pregnant+rats.">The effect of bilateral pelvic neurectomy on cervical ripening in pregnant rats.</a> Journal Of Perinatal Medicine. 37, 263-269 (2009).</li><li>Pierce, S. L., Kutschke, W., Cabeza, R., England, S. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+measurement+of+intrauterine+pressure+by+telemetry:+a+new+approach+for+studying+parturition+in+mouse+models.">In vivo measurement of intrauterine pressure by telemetry: a new approach for studying parturition in mouse models.</a> Physiol Genomics. 42, 310-316 (2010).</li><li>Imamura, T., Luedke, C. E., Vogt, S. K., Muglia, L. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Oxytocin+modulates+the+onset+of+murine+parturition+by+competing+ovarian+and+uterine+effects.">Oxytocin modulates the onset of murine parturition by competing ovarian and uterine effects.</a> American Journal Of Physiology. Regulatory, Integrative And Comparative Physiology. 279, R1061-R1067 (2000).</li><li>McCloskey, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+inwardly+rectifying+K++channel+KIR7.1+controls+uterine+excitability+throughout+pregnancy.">The inwardly rectifying K+ channel KIR7.1 controls uterine excitability throughout pregnancy.</a> EMBO Mol Med. 6 (9), 1161-1174 (2014).</li></ol>

The authors have nothing to disclose.

חקירות של התכווצות myometrial הסתמכו על מדידות vivo לשעבר של מתח שרירים. מתודולוגיה זו יכולה להיות שימושית לבדיקה בשלב מוקדם בתרופות חדשות שפותחו uterotonic שלא יכול להינתן לבעלי חיים. עם זאת, בvivo גישות נחוצות כדי להבין את ההתקדמות של עבודת מחקר לאורך זמן. מדידות in vivo...

לידה מוקדמת היא הסיבה המובילה לתחלואה והתמותה במדינות מפותחות סביב הלידה; הוא אחראי על 50% מתחלואה סבה-לידתית ו -75% מ1,2 תמותה סביב הלידה. צירים מוקדמים הוא רב פנים ויכולים להיות אידיופטית. למרות שמחקרים רבים התפתח במסלולים המולקולריים וחשמליים משנים את myometrium מרקמה שקטה להתכווצות אחד, הפתופיזיולוגיה של צירים מוקדמים המדויקת נותרת חמקמקה. האנדוקרינית, דלקתי, וויסות הגנים יש כל קשורות ללידה מוקדמת 3,4. עם זאת, חששות אתיים להגביל את היכולת לבצע מחקר על המנגנונים של צירים מוקדמים בבני אדם. בהתחשב במגבלות אלה, חוקרים רבים פנו לעכברים כמודל למערכת שבה לומד את הפיסיולוגיה של לידה. יש עכברי הריונות קצרים שנמשכו כשלושה שבועות והוא יכול בקלות להיות מניפולציות גנטית. בנוסף, יש לי מודלים עכבר גנטיים מרוביםפותח כדי לקבוע מסלולי האיתות כי הם חיוניים לעבודה 5. למרות הבדלים עיקריים בין העכבר והמלטת אדם, עכברים ובני אדם חולקים רבים של אותם המנגנונים שהם חיוניים לעבודה, כולל דלקת תוך רחמי וזיהום 6. כך, עכברים לשמש ככלי רב ערך לבחינת פעילות רחם. עד כה, את תקן הזהב למדידת התכווצות רחם בעכברים היו vivo לשעבר הקלטות מתח איזומטרי; עם זאת, זה מוגבל לנקודת זמן הריון אחד לכל ניסוי ודורש ההסרה של הרחם מהסביבה הפיזיולוגית שלה. גורם חשוב נוסף הוא המספר הגדול של בעלי חיים הנדרשים לחקירות אלה. לבסוף, מתודולוגיה זו אינה מאפשרת למחקרים ארוכי טווח בוחנים גיוס של הפתופיזיולוגיה עבודה ומוקדמת. הפיתוחים אחרונים שנעשו במכשירי טלמטריה רדיומטרי משמשים ללמוד לחץ דם משתנה 7 בעכברים וintלחץ rauterine בחולדות 8 התחנן השאלה אם באותה הטכנולוגיה יכולה לשמש כדי לחקור שינויים בלחץ תוך-רחמית בעכברים במהלך הריון. לאחר פתרון בעיות ראשוניות, שיטה פותחה בהצלחה למדידת אינדוקציה עבודה והתקדמות בעכבר. גישה זו in vivo יכולה למדוד את המעבר מהמדינה בלחץ הנמוך של הרחם שקט למדינה בלחץ גבוה מעידה על צירה לידה חזק. שיטה זו הייתה מסוגלת לזהות הבדלים משמעותיים בין לחץ עכברים הטרנסגניים עם תהליך לידה שנפרצו ועכברים סוג בר, הממחיש את ההשפעה הפיזיולוגית של ביטוי גנים 9 גם. פרוטוקול זה מספק בזמן אמת, בשיטת vivo ללמוד לחץ רחם עכבר בזמן ההריון.

<table><tbody><tr><td>Surgical Glue</td><td>3M Vetbond</td><td>1469SB</td><td>Tissue Adhesive--stored in Drierite</td></tr><tr><td>Absorbable 6-0 Sutures</td><td>Ethicon</td><td>J212H</td><td>Vicryl</td></tr><tr><td>Non-absorbable 6-0 Sutures</td><td>Ethicon</td><td>8706H</td><td>Prolene</td></tr><tr><td>Water Jacket Blanket + Heating Pad</td><td>Gaymer</td><td>T/Pump PN 11184-000 Blanket-66N111CC</td><td>Specialized for rodents</td></tr><tr><td>Bead sterilizer</td><td>Keller</td><td>Z378577</td><td>Steri 250 Sterilizer</td></tr><tr><td>Disecting Microscope</td><td>Nikon</td><td>SMZ754</td><td>Fibre optic gooseneck external light source</td></tr><tr><td>Sterile Surgical Gloves--Latex&amp;nbsp;</td><td>Cardinal Health Triflex</td><td>2D7253</td><td></td></tr><tr><td>PhysioTel PA-C10 Pressure Transmitter</td><td>&amp;nbsp;Data Sciences International</td><td>270-0135-001</td><td>TA11PA-C10</td></tr><tr><td>Telemeter Reciever</td><td>&amp;nbsp;Data Sciences International</td><td>272-6001-001</td><td>RPC-1</td></tr><tr><td>Dataquest ART 4.3.2 Analysis Platinum</td><td>&amp;nbsp;Data Sciences International</td><td>271-0147-141</td><td>Analysis software</td></tr><tr><td>Diet Recovery Gel</td><td>Clear H2O</td><td>72-01-5022</td><td>Purified Soft Diet for Rodents</td></tr><tr><td>Tergazyme</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>Z273287</td><td>Enzyme detergent</td></tr></tbody></table>

intrauterine telemetry to measure mouse contractile pressure in vivo

יש צורך באינטגרציה מורכבת של אותות מולקולריים וחשמליים להפוך רחם שקט לאיבר התכווצות בסוף ההריון. למרות הגילוי של רגולטורים מרכזיים של התכווצות רחם, תהליך זה הוא עדיין לא הבין באופן מלא. עכברים מהונדסים לספק מודל אידיאלי שבו ללמוד המלטה. בעבר, השיטה היחידה ללמוד התכווצות רחם בעכבר הייתה הקלטות vivo לשעבר איזומטרי מתח, שהם לא טובים מכמה סיבות. הרחם יש להסיר מן הסביבה הפיזיולוגית שלה, כמובן זמן מוגבל של חקירה אפשרי, והעכברים חייבים להיות קורבן. הפיתוח האחרון של טלמטריה רדיומטרי אפשר למדידות של לחץ תוך רחמי in vivo בעכברים אורך, בזמן אמת. כאן, ההשתלה של מַד מֶרְחָק תוך רחמי כדי למדוד שינויי לחץ ברחם העכבר מאמצע הריון ועד ללידה מתוארת. על ידי הבדלים בהשוואה לעיתונותures בין סוג בר עכברים הטרנסגניים, ההשפעה הפיזיולוגית של גן של עניין אפשר לבאר. טכניקה זו צריכה לזרז את פיתוח התרופה המשמש לטיפול בהפרעות myometrial במהלך הריון, כוללים צירים מוקדמים.

בזמן אמת בלחצים תוך רחמי vivo ניתן להקליט באמצעות מערכת רכישת telemetric. דגימת לחץ יחד עם הקלטת וידאו בו זמני של העכבר שימשה כדי ללכוד את מועד המסירה של כל גור המדויק ולתאם זמן אספקה ​​ללחץ תוך רחמי של האם. אז יכולה להיות זממו את כל נקודות הנתונים בכל ההקלטה כדי לי...

Watch this Scientific Journal Video about Intrauterine Telemetry to Measure Mouse Contractile Pressure In Vivo at JoVE.com

Intrauterine Telemetry to Measure Mouse Contractile Pressure In Vivo

This manuscript provides a protocol for implanting telemeters in the mouse for the purpose of measuring intrauterine pressures during pregnancy.

טלמטריה תוך רחמי למדידת לחץ עכבר התכווצות<em&gt; In vivo</em

A complex integration of molecular and electrical signals is needed to transform a quiescent uterus into a contractile organ at the end of pregnancy. ...

intrauterine-telemetry-to-measure-mouse-contractile-pressure-in-vivo

Research

JoVE Journal

Medicine

Intrauterine Telemetry to Measure Mouse Contractile Pressure In Vivo

9.6K Views.  Washington University in St. Louis. This manuscript provides a protocol for implanting telemeters in the mouse for the purpose of measuring intrauterine pressures during pregnancy. 

Video: Intrauterine Telemetry to Measure Mouse Contractile Pressure In Vivo

Measuring Left Ventricular Pressure in Late Embryonic and Neonatal Mice

Blood pressure increases significantly during embryonic and postnatal development in vertebrate animals. In the mouse, blood flow is first detectable around embryonic day (E) 8.51. Systolic left ventricular (LV) pressure is 2 mmHg at E9.5 and 11 mmHg at E14.52. At these mid-embryonic stages, the LV is clearly visible through the chest wall for invasive pressure measurements because the ribs and skin are not fully developed. Between E14.5 and birth (approximately E21) imaging methods must be used to view the LV. After birth, mean arterial pressure increases from 30 - 70 mmHg from postnatal day (P) 2 - 353. Beyond P20, arterial pressure can be measured with solid-state catheters (i.e. Millar or Scisense). Before P20, these catheters are too big for developing mouse arteries and arterial pressure must be measured with custom pulled plastic catheters attached to fluid-filled pressure transducers3 or glass micropipettes attached to servo null pressure transducers4.
Our recent work has shown that the greatest increase in blood pressure occurs during the late embryonic to early postnatal period in mice5-7. This large increase in blood pressure may influence smooth muscle cell (SMC) phenotype in developing arteries and trigger important mechanotransduction events. In human disease, where the mechanical properties of developing arteries are compromised by defects in extracellular matrix proteins (i.e. Marfan's Syndrome8 and Supravalvular Aortic Stenosis9) the rapid changes in blood pressure during this period may contribute to disease phenotype and severity through alterations in mechanotransduction signals. Therefore, it is important to be able to measure blood pressure changes during late embryonic and neonatal periods in mouse models of human disease.
We describe a method for measuring LV pressure in late embryonic (E18) and early postnatal (P1 - 20) mice. A needle attached to a fluid-filled pressure transducer is inserted into the LV under ultrasound guidance. Care is taken to maintain normal cardiac function during the experimental protocol, especially for the embryonic mice. Representative data are presented and limitations of the protocol are discussed.

Measuring left ventricular pressure (LV) in embryonic and neonatal mice is described. Pressure is measured by inserting a needle connected to a fluid-filled transducer into the LV under ultrasound guidance. Care must be taken to maintain normal cardiac function during the experimental protocol.

מדידת לחץ חדרית השמאל עכברים עובריים ילודים המאוחרת

Blood pressure increases significantly during embryonic and postnatal development in vertebrate animals. In the mouse, blood flow is first detectable ...

Bioengineering

Implantation of Radiotelemetry Transmitters Yielding Data on ECG, Heart Rate, Core Body Temperature and Activity in Free-moving Laboratory Mice

The laboratory mouse is the animal species of choice for most biomedical research, in both the academic sphere and the pharmaceutical industry. Mice are a manageable size and relatively easy to house. These factors, together with the availability of a wealth of spontaneous and experimentally induced mutants, make laboratory mice ideally suited to a wide variety of research areas.
In cardiovascular, pharmacological and toxicological research, accurate measurement of parameters relating to the circulatory system of laboratory animals is often required. Determination of heart rate, heart rate variability, and duration of PQ and QT intervals are based on electrocardiogram (ECG) recordings. However, obtaining reliable ECG curves as well as physiological data such as core body temperature in mice can be difficult using conventional measurement techniques, which require connecting sensors and lead wires to a restrained, tethered, or even anaesthetized animal. Data obtained in this fashion must be interpreted with caution, as it is well known that restraining and anesthesia can have a major artifactual influence on physiological parameters1, 2.
Radiotelemetry enables data to be collected from conscious and untethered animals. Measurements can be conducted even in freely moving animals, and without requiring the investigator to be in the proximity of the animal. Thus, known sources of artifacts are avoided, and accurate and reliable measurements are assured. This methodology also reduces interanimal variability, thus reducing the number of animals used, rendering this technology the most humane method of monitoring physiological parameters in laboratory animals3, 4. Constant advancements in data acquisition technology and implant miniaturization mean that it is now possible to record physiological parameters and locomotor activity continuously and in realtime over longer periods such as hours, days or even weeks3, 5.
Here, we describe a surgical technique for implantation of a commercially available telemetry transmitter used for continuous measurements of core body temperature, locomotor activity and biopotential (i.e. onelead ECG), from which heart rate, heart rate variability, and PQ and QT intervals can be established in freeroaming, untethered mice. We also present pre-operative procedures and protocols for post-operative intensive care and pain treatment that improve recovery, well-being and survival rates in implanted mice5, 6.

A surgical technique for implantation of commercially available telemetry transmitters used for continuous measurement of biopotential (one-lead ECG), heart rate, core body temperature and locomotor activity in freely moving mice is shown. Recommendations and protocols for post-operative care and pain relief, improving recovery, well being and survival rate are also presented.

השרשה של משדרי Radiotelemetry מניבים נתוני אק&quot;ג, קצב הלב, טמפרטורת הגוף Core ו פעילות חינם נעים עכברי מעבדה

The laboratory mouse is the animal species of choice for most biomedical research, in both the academic sphere and the pharmaceutical industry. Mice are a ...

In utero Measurement of Heart Rate in Mouse by Noninvasive M-mode Echocardiography

Congenital heart disease (CHD) is the most frequent noninfectious cause of death at birth. The incidence of CHD ranges from 4 to 50/1,000 births (Disease and injury regional estimates, World Health Organization, 2004). Surgeries that often compromise the quality of life are required to correct heart defects, reminding us of the importance of finding the causes of CHD. Mutant mouse models and live imaging technology have become essential tools to study the etiology of this disease. Although advanced methods allow live imaging of abnormal hearts in embryos, the physiological and hemodynamic states of the latter are often compromised due to surgical and/or lengthy procedures. Noninvasive ultrasound imaging, however, can be used without surgically exposing the embryos, thereby maintaining their physiology. Herein, we use simple M-mode ultrasound to assess heart rates of embryos at E18.5 in utero. The detection of abnormal heart rates is indeed a good indicator of dysfunction of the heart and thus constitutes a first step in the identification of developmental defects that may lead to heart failure.

In utero Measurement of Heart Rate in Mouse by Noninvasive M-mode Echocardiography

Ultra-high frequency ultrasound is a powerful live imaging tool to examine cardiac abnormalities in small animals. Its noninvasiveness allows maintaining the physiologic state of embryos. Herein, we show the use of M-mode ultrasound to measure the heart rates of embryos at E18.5 in utero.

במדידת רחם של קצב לב בעכבר על ידי אקו M-המצב פולשנית

Congenital heart disease (CHD) is the most frequent noninfectious cause of death at birth. The incidence of CHD ranges from 4 to 50/1,000 births (Disease ...

<meta charset="utf8"></head><body>שינויים אוטונומיים אימהיים של עכברים מהריון לגידול גורים

Analysis of Electrocardiograms and Behavior in Mice from Pregnancy to Lactation Period

Changes in the mother-offspring relationship are presumably accompanied by dynamic changes in the autonomic nervous system. Although temporal measurements of autonomic activity have been performed in human mothers and infants, the analysis of long-term changes remains unexplored. Mouse mothers can form social bonds with their pups and have a short period of pregnancy and lactation, which makes them useful for the examination of physiological changes from pregnancy to pup-rearing. Therefore, a telemetry system was used for several weeks to measure the changes in the autonomic nervous system and the behavior of mouse mothers. The current results showed that an electrocardiogram (ECG) could be stably recorded regardless of the movements of mothers and parturition. ECG analysis showed that the heart rate gradually decreased from pregnancy to lactation, and sympathetic activity sharply increased as the pups developed. Furthermore, the simultaneous recording of behavior and ECG in the home cage enabled us to understand the behavior-dependent influences on the ECG, thereby revealing the characteristics of autonomic nervous activity during each behavior. Thus, the present experimental method helps to understand how the physiological characteristics of mothers change from pregnancy through pup rearing, supporting the healthy development of pups.

<meta charset="utf8"></head><body>ניתוח אלקטרוקרדיוגרמות והתנהגות בעכברים מתקופת ההריון ועד ההנקה

A simultaneous recording of autonomic activity and detailed maternal behavior of mother mice from pregnancy to lactation was achieved using a telemetry system. This method helps to understand the dynamics of the physiological and behavioral characteristics in mothers from pregnancy to weaning.

ניתוח אלקטרוקרדיוגרמות והתנהגות בעכברים מתקופת ההריון ועד ההנקה

Changes in the mother-offspring relationship are presumably accompanied by dynamic changes in the autonomic nervous system. Although temporal measurements ...

Behavior

Long-term Blood Pressure Measurement in Freely Moving Mice Using Telemetry

During the development of new vasoactive agents, arterial blood pressure monitoring is crucial for evaluating the efficacy of the new proposed drugs. Indeed, research focusing on the discovery of new potential therapeutic targets using genetically altered mice requires a reliable, long-term assessment of the systemic arterial pressure variation. Currently, the gold standard for obtaining long-term measurements of blood pressure in ambulatory mice uses implantable radio-transmitters, which require&#160;artery cannulation. This technique eliminates the need for tethering, restraining, or anesthetizing the animals which introduce stress and artifacts during data sampling. However, arterial blood pressure monitoring in mice via catheterization can be rather challenging due to the small size of the arteries. Here we present a step-by-step guide to illustrate the crucial key passages for a successful subcutaneous implantation of radio-transmitters and carotid artery cannulation in mice. We also include examples of long-term blood pressure activity taken from freely moving mice after a period of post-surgery recovery. Following this procedure will allow reliable direct blood pressure recordings from multiple animals simultaneously.

The goal of this protocol is to assess systemic blood pressure in conscious freely moving mice using implantable radio-telemetry devices.

מדידת לחץ דם לטווח ארוך בעכברים לנוע בחופשיות באמצעות טלמטריה

During the development of new vasoactive agents, arterial blood pressure monitoring is crucial for evaluating the efficacy of the new proposed drugs. ...

Application of Consistent Massage-Like Perturbations on Mouse Calves and Monitoring the Resulting Intramuscular Pressure Changes

Massage is generally recognized to be beneficial for relieving pain and inflammation. Although previous studies have reported anti-inflammatory effects of massage on skeletal muscles, the molecular mechanisms behind are poorly understood. We have recently developed a simple device to apply local cyclical compression (LCC), which can generate intramuscular pressure waves with varying amplitudes. Using this device, we have demonstrated that LCC modulates inflammatory responses of macrophages in situ and alleviates immobilization-induced muscle atrophy. Here, we describe protocols for the optimization and application of LCC as a massage-like intervention against immobilization-induced inflammation and atrophy of skeletal muscles of mouse hindlimbs. The protocol that we have developed can be useful for investigating the mechanism underlying beneficial effects of physical exercise and massage. Our experimental system provides a prototype of the analytical approach to elucidate the mechanical regulation of muscle homeostasis, although further development needs to be made for more comprehensive studies.

Here we describe the protocols for applying defined mechanical loads to mouse calves and for monitoring the concomitant intramuscular pressure changes. The experimental systems that we have developed can be useful for investigating the mechanism behind the beneficial effects of physical exercise and massage.

יישום של רטבאליות העיסוי העקבי של העכבר וניטור השינויים הנובעים בלחץ שרירי

Massage is generally recognized to be beneficial for relieving pain and inflammation. Although previous studies have reported anti-inflammatory effects of ...

Immunology and Infection

Implantation of Combined Telemetric ECG and Blood Pressure Transmitters to Determine Spontaneous Baroreflex Sensitivity in Conscious Mice

Blood pressure (BP) and heart rate (HR) are both controlled by the autonomic nervous system (ANS) and are closely intertwined due to reflex mechanisms. The baroreflex is a key homeostatic mechanism to counteract acute, short-term changes in arterial BP and to maintain BP in a relatively narrow physiological range. BP is sensed by baroreceptors located in the aortic arch and carotid sinus. When BP changes, signals are transmitted to the central nervous system and are then communicated to the parasympathetic and sympathetic branches of the autonomic nervous system to adjust HR. A rise in BP causes a reflex decrease in HR, a drop in BP causes a reflex increase in HR.
Baroreflex sensitivity (BRS) is the quantitative relationship between changes in arterial BP and corresponding changes in HR. Cardiovascular diseases are often associated with impaired baroreflex function. In various studies reduced BRS has been reported in e.g., heart failure, myocardial infarction, or coronary artery disease. 
Determination of BRS requires information from both BP and HR, which can be recorded simultaneously using telemetric devices. The surgical procedure is described beginning with the insertion of the pressure sensor into the left carotid artery and positioning of its tip in the aortic arch to monitor arterial pressure followed by the subcutaneous placement of the transmitter and ECG electrodes. We also describe postoperative intensive care and analgesic management. After a two-week period of post-surgery recovery long-term ECG and BP recordings are performed in conscious and unrestrained mice. Finally, we include examples of high-quality recordings and the analysis of spontaneous baroreceptor sensitivity using the sequence method.

The baroreflex is a heart-rate regulation mechanism by the autonomic nervous system in response to blood-pressure changes. We describe a surgical technique to implant telemetry transmitters for continuous and simultaneous measurement of electrocardiogram and blood pressure in mice. This can determine spontaneous baroreflex sensitivity, an important prognostic marker for cardiovascular disease.

השתלת משדרי אק"ג ולחץ דם טלמטריים משולבים לקביעת רגישות ספונטנית לברפלקס בעכברים מודעים

Blood pressure (BP) and heart rate (HR) are both controlled by the autonomic nervous system (ANS) and are closely intertwined due to reflex mechanisms. ...

Real-Time Electrocardiogram Monitoring During Treadmill Training in Mice

Regular physical exercise is a major contributor to cardiovascular health, influencing various metabolic as well as electrophysiological processes. However, in certain cardiac diseases such as inherited arrhythmia syndromes, e.g., arrhythmogenic cardiomyopathy (ACM) or myocarditis, physical exercise may have negative effects on the heart leading to a proarrhythmogenic substrate production. Currently, the underlying molecular mechanisms of exercise-related proarrhythmogenic remodeling are largely unknown, thus it remains unclear which frequency, duration, and intensity of exercise can be considered safe in the context of disease(s).
The proposed method allows to study proarrhythmic/antiarrhythmic effects of physical exercise by combining treadmill training with real-time monitoring of the ECG. Implantable telemetry devices are used to continuously record the ECG of freely moving mice over a period of up to 3 months both at rest and during treadmill training. Data acquisition software with its analysis modules is used to analyze basic ECG parameters such as heart rate, P wave duration, PR interval, QRS interval, or QT duration at rest, during and after training. Furthermore, heart rate variability (HRV) parameters and occurrence of arrhythmias are evaluated. In brief, this manuscript describes a step-by-step approach to experimentally explore exercise induced effects on cardiac electrophysiology, including potential proarrhythmogenic remodeling in mouse models.

Electrocardiogram (ECG) is the key variable to understanding cardiac electrophysiology. Physical exercise has beneficial effects but may also be harmful in the context of cardiovascular diseases. This manuscript provides a method of recording real-time ECG during exercise, which can serve to investigate its effects on cardiac electrophysiology in mice.

ניטור אק"ג בזמן אמת במהלך אימון הליכון בעכברים

Regular physical exercise is a major contributor to cardiovascular health, influencing various metabolic as well as electrophysiological processes. ...

טלמטריה תוך רחמי למדידת לחץ עכבר התכווצות

Summary

Explore More Videos

Chapters in this video

מדידת לחץ חדרית השמאל עכברים עובריים ילודים המאוחרת

השרשה של משדרי Radiotelemetry מניבים נתוני אק"ג, קצב הלב, טמפרטורת הגוף Core ו פעילות חינם נעים עכברי מעבדה

במדידת רחם של קצב לב בעכבר על ידי אקו M-המצב פולשנית

ניתוח אלקטרוקרדיוגרמות והתנהגות בעכברים מתקופת ההריון ועד ההנקה

ניתוח אלקטרוקרדיוגרמות והתנהגות בעכברים מתקופת ההריון ועד ההנקה

ניתוח אלקטרוקרדיוגרמות והתנהגות בעכברים מתקופת ההריון ועד ההנקה

מדידת לחץ דם לטווח ארוך בעכברים לנוע בחופשיות באמצעות טלמטריה

יישום של רטבאליות העיסוי העקבי של העכבר וניטור השינויים הנובעים בלחץ שרירי

השתלת משדרי אק"ג ולחץ דם טלמטריים משולבים לקביעת רגישות ספונטנית לברפלקס בעכברים מודעים

ניטור אק"ג בזמן אמת במהלך אימון הליכון בעכברים