This work was supported by funding from the March of Dimes FY12-133 (S.K.E.) and the National Institutes of Health R01HD037831 (S.K.E.). We would like to thank Dr. Deborah Frank for critical review of the manuscript.

הערה: כל נהלי בעלי החיים עמדו בהנחיות לטיפול ושימוש בבעלי החיים שנקבעו על ידי המכון הלאומי לבריאות. כל הפרוטוקולים אושרו על ידי ועדת בעלי החיים באוניברסיטת וושינגטון בסנט לואיס. הערה: חומרים ספציפיים וציוד לפרוטוקול זה מופיעים חומרים וציוד שולחן. 1. גידול מתוזמן של נקבות עכברים <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> גזע נשים בוגרות בין שניים לשישה חודשים של גיל בחלון זמן 2 hr עם זכרים. שעה רבייה ספציפית אין צורך כל עוד הם נשמרים עקביים למכלול הניסוי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאשר את ההריון על ידי הנוכחות של תקע הזדווגות. לייעד את היום ושעה שבו התקע נראה לראשונה כמו יום שלאחר משגל-0 (dpc0). זכור שעה מסוימת כאשר מתחיל הקלטת לחץ. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לבצע ניתוחים על dpc8-13. DPC המדויק תלוי בזן העכבר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כדי לקבוע אם עכבר הוא בהריון לפני הניתוח, PEההדמיה אולטרסאונד rform של הבטן עם בדיקה מערך ליניארי 40 MHz מצמידים את מערכת הדמיה לפני מתן הרדמה. זה יאפשר להדמיה של שקי הריון. אם מערכת אולטרסאונד אינה זמינה, השתמש במשקל של העכבר. הערה: עלייה במשקל של לפחות 2 גרם בין dpc0 וdpc8 והתנפחות של הבטן הוא אינדיקטור טוב להריון. </li></ol> 2. ניתוח טלמטריה Prep <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> השתמש החיטוי לעקר מכשירים, גזה, צמר גפן, וילונות כירורגי, וטיפים פיפטה בתוך 24 שעות לפני הניתוח. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> משטח ניתוח נקי עם אתנול 70%. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הפעל כרית חימום (מתמחה למכרסמים) ומעקר את החרוז. </li></ol> 3. ניתוח טלמטריה <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להרדמה, להשתמש 4-5% isoflurane עם קצב זרימת חמצן של 1-2 ליטר / דקה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חכה עד שהעכבר מראה סימנים של הרדמה ולאחר מכן להזריק תת עורי עם עצירות (משכך כאבים: 0.1 מיליליטר לכל 20 גרם). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לגלח את הבטן של העכבר מהחלק התחתון של הצלעות עד לשלפוחית ​​השתן. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להביא את העכבר לשולחן הניתוחים על כרית חימום מראש התחמם, ולכסות את עיניו של העכבר עם משחת עיניים כדי למנוע התייבשות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> תתחיל בטכניקה סטרילית. לשים על כפפות סטריליות ולשמור את העטיפה כמשטח סטרילי בו יש להציב סקראבס יוד ואתנול. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הסר את מַד מֶרְחָק מהחבילה או מלוח ולהשתמש במלקחיים סטרילי כדי למקם אותו בגזה סטרילית. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> השתמש במזרק (המסופק על ידי ספק מַד מֶרְחָק) כדי למלא את קצה הצנתר עם ג&#39;ל. יש ללחוץ בעדינות את הקטטר יצירת לחץ שלילי מספיק כדי למשוך את הג&#39;ל לקטטר. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הנח טיפ סטרילי בפיפטה. פיפטה 2 μl של דבק כירורגים ולהגדיר את פיפטה על משטח סטרילי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כדי לנקות את האתר כירורגית, ספוגית האזור עם יוד ולאחר מכן עם 70% אתנול. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חותך חור בווילון כירורגי פשוט הגדול מספיקלשטח הדרוש לחתך והמקום על העכבר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בצע קמצוץ רגל (תגובת דוושה) כדי להבטיח את העכבר הוא מורדם לחלוטין לפני ביצוע חתך. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לעשות חתך קו האמצע אנכי קטן. בשלב הבא, לעשות חתך דומה דרך קיר גוף השריר הבסיסי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> משוך בעדינות את הרחם אל מחוץ לחלל הגוף ולאתר את קרן הרחם המכילה את רוב הגורים שהם קיימא. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אופציונאלי - לתוספת של מירנה, להזריק וקטור נגיפי אל תוך שכבת שריר של רחם לפני החדרת מַד מֶרְחָק. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לעשות חתך קטן בקצה של קרן הרחם עם 3 מ&quot;מ חיתוך מספריים אביב קצה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> השחל את הצנתר, ללא סחיטה, בין דופן הרחם וצקים עובריים. הכנס את קטטר העבר כמה שקים כדי להפחית ההסרה המקרית שלה. ודא שקים העובריים אינם מופרעים על ידי ההכנסה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> פיפטה דבק כירורגים לאתר של הכנסת מַד מֶרְחָק לדבוק קטטר לuקרן terine ולמנוע את הקטטר מלהחליק מתוך קרן הרחם. חכה כמה שניות עד שהדבק להפוך נוקשה, ולאחר מכן למקם את הרחם בזהירות בחזרה בתוך חלל הגוף. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הנח את מַד מֶרְחָק בחלל הגוף בצד השני של אתר הכנסת קטטר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> תפר את חלל הגוף סגור עם 6.0 תפרים נספגים. ראשית, לעשות תפר תיק ולאחר מכן 03:57 תפרים בודדים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לתפור את העור על ידי שימוש באותה הטכניקה, אבל עם תפר 6-0 לא נספג. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> dibucaine ספוגית (משכך כאבים אקטואליים) משחה על אתר החתך. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הזרק 0.3-0.4 מיליליטר של תמיסת מלח סטרילית תת עורי כדי לעזור רעננותם של בעלי החיים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לפקח על בעלי החיים לאחר הניתוח עד שהוא ער לחלוטין. אל תניח את העכבר לכלוב שלו עד שהוא מסוגל להחזיק באופן חופשי את ראשה מעל לטבלת סוגים מסוימים של מצעים יכולים לחנוק את העכבר הרדים בכבדות. לעכבר שכבר הרדים במשך 30-45 דקות, יש לצפות העכבר e להיות ער באופן מלא על ידי 1 שעה ו -15 דקות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אם ביצוע ניתוחים נוספים, לנגב מכשירים עם אתנול 70% וחרוז לעקר לפני שימוש חוזר. </li></ol> -ניתוח ההודעה Recovery 4. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לעקוב אחר התקדמות לאחר ניתוח יומי ביומן. קטלוג עלייה במשקל והפסד ולצפות לעייפות, דימום, או סגירה חלקית של החתך הניתוחי. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להאכיל את אוכל העכבר התרכך עכבר (~ העקביות של רסק תפוחים) או מזון התאוששות דיאטה מיוחד. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בדוק את התפרים ולוודא שהם לא הוציאו, אבל מנסים לא להתמודד עם העכבר מוגזם. </li></ol></li></ol> 5. טלמטריה הקלטה <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ביום של עניין (לפחות 2-3 ימים לאחר העכבר התאושש מניתוח), למקם את מגנט ליד העכבר כדי להפעיל את מַד מֶרְחָק. שים את כלוב העכבר על המקלט. הנורית במקלט צריכה להפעיל אם מַד מֶרְחָק מופעל. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לכייל teleme החדש<html> ters עם כיולים מסוימים יצרן סיפק. מפרטי כיול מַד מֶרְחָק שימוש חוזר, יישמרו בתוכנה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בתוך התוכנה, להתחיל בהקלטה על ידי לחיצה ימנית על &quot;חיה&quot; ולחץ על &quot;התחל דגימה, רציפה,&quot; המאפשרת דגימה בשיעורים של עד 500 הרץ. ודא שהתוכנה מוגדרת כדי לשמור ולעקוב אחר. הערה: כאשר סמל עכבר הדגימה הופך ירוק, לחצים מתועדים. מטריד את העכבר במהלך הלידה יכולה להפריע או לשנות עבודה, כך להתבונן בזהירות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאחר תקופת לידה או זמן של עניין, לעצור את הקלטה על ידי לחיצה ימנית על &quot;בעל חיים&quot; ובחירה באפשרות &quot;להפסיק הקלטות, כל&quot;. השתמש במגנט כדי לכבות מַד מֶרְחָק כדי להציל את חיי סוללה, כסוללת מַד מֶרְחָק תהיה אחרונה בדרך כלל רק עבור 1.5 חודשים של הקלטה רציפה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להרדים את העכבר על ידי CO 2 יתר ולשחזר את מַד מֶרְחָק. גורים מומתים על ידי עריפת ראש. </li></ol>&quot;&gt; 6. עיקור מַד מֶרְחָק tle <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הנח את מַד מֶרְחָק בתמיסה של 1% חומר ניקוי אנזים במים למשך לילה deionized בטמפרטורת חדר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> יש לשטוף את מַד מֶרְחָק במים ללא יונים ולהסיר את כל הרקמה ודבק, נזהר שלא לסחוט את הקטטר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> דגירה מַד מֶרְחָק בglutaraldehyde 2% למשך 24 שעות בטמפרטורת חדר כדי לעקר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> יש לשטוף את מַד מֶרְחָק עם תמיסת מלח סטרילית ולאחסן אותו בתמיסת מלח סטרילית עד ההשתלה הבאה או להישלח חזרה ליצרן להיות משופץ. יש שופץ Telemeters אם רקמה ממוקמת בתוך קטטר לאחר עיקור. בדרך כלל ניתן להשתמש telemeters 4-5 פעמים לפני הצורך להיות משופצים. </li></ol>

<ol>
	<li>Slattery, M. M., Morrison, J. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Preterm+delivery.">Preterm delivery.</a> Lancet. 360, 1489-1497 (2002).</li><li>Goldenberg, R. L., Culhane, J. F., Iams, J. D., Romero, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Epidemiology+and+causes+of+preterm+birth.">Epidemiology and causes of preterm birth.</a> Lancet. 371, 75-84 (2008).</li><li>Keelan, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pharmacological+inhibition+of+inflammatory+pathways+for+the+prevention+of+preterm+birth.">Pharmacological inhibition of inflammatory pathways for the prevention of preterm birth.</a> Journal Of Reproductive Immunology. 88, 176-184 (2011).</li><li>Voltolini, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Understanding+spontaneous+preterm+birth:+from+underlying+mechanisms+to+predictive+and+preventive+interventions.">Understanding spontaneous preterm birth: from underlying mechanisms to predictive and preventive interventions.</a> Reproductive Sciences. 20, 1274-1292 (2013).</li><li>Ratajczak, C. K., Muglia, L. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Insights+into+parturition+biology+from+genetically+altered+mice.">Insights into parturition biology from genetically altered mice.</a> Pediatric research. 64, 581-589 (2008).</li><li>Rajakumar, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Placental+HIF-1+alpha,+HIF-2+alpha,+membrane+and+soluble+VEGF+receptor-1+proteins+are+not+increased+in+normotensive+pregnancies+complicated+by+late-onset+intrauterine+growth+restriction.">Placental HIF-1 alpha, HIF-2 alpha, membrane and soluble VEGF receptor-1 proteins are not increased in normotensive pregnancies complicated by late-onset intrauterine growth restriction.</a> American Journal Of Physiology. Regulatory, Integrative And Comparative Physiology. 293, (2007).</li><li>Whitesall, S. E., Hoff, J. B., Vollmer, A. P., D'Alecy, L. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+simultaneous+measurement+of+mouse+systolic+arterial+blood+pressure+by+radiotelemetry+and+tail-cuff+methods.+American+journal+of+physiology.">Comparison of simultaneous measurement of mouse systolic arterial blood pressure by radiotelemetry and tail-cuff methods. American journal of physiology.</a> Heart And Circulatory Physiology. 286, H2408-H2415 (2004).</li><li>Mackay, L. B., Shi, L. B., Maul, H. .., Maner, W. L., Garfield, R. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effect+of+bilateral+pelvic+neurectomy+on+cervical+ripening+in+pregnant+rats.">The effect of bilateral pelvic neurectomy on cervical ripening in pregnant rats.</a> Journal Of Perinatal Medicine. 37, 263-269 (2009).</li><li>Pierce, S. L., Kutschke, W., Cabeza, R., England, S. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+measurement+of+intrauterine+pressure+by+telemetry:+a+new+approach+for+studying+parturition+in+mouse+models.">In vivo measurement of intrauterine pressure by telemetry: a new approach for studying parturition in mouse models.</a> Physiol Genomics. 42, 310-316 (2010).</li><li>Imamura, T., Luedke, C. E., Vogt, S. K., Muglia, L. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Oxytocin+modulates+the+onset+of+murine+parturition+by+competing+ovarian+and+uterine+effects.">Oxytocin modulates the onset of murine parturition by competing ovarian and uterine effects.</a> American Journal Of Physiology. Regulatory, Integrative And Comparative Physiology. 279, R1061-R1067 (2000).</li><li>McCloskey, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+inwardly+rectifying+K++channel+KIR7.1+controls+uterine+excitability+throughout+pregnancy.">The inwardly rectifying K+ channel KIR7.1 controls uterine excitability throughout pregnancy.</a> EMBO Mol Med. 6 (9), 1161-1174 (2014).</li></ol>

The authors have nothing to disclose.

חקירות של התכווצות myometrial הסתמכו על מדידות vivo לשעבר של מתח שרירים. מתודולוגיה זו יכולה להיות שימושית לבדיקה בשלב מוקדם בתרופות חדשות שפותחו uterotonic שלא יכול להינתן לבעלי חיים. עם זאת, בvivo גישות נחוצות כדי להבין את ההתקדמות של עבודת מחקר לאורך זמן. מדידות in vivo...

לידה מוקדמת היא הסיבה המובילה לתחלואה והתמותה במדינות מפותחות סביב הלידה; הוא אחראי על 50% מתחלואה סבה-לידתית ו -75% מ1,2 תמותה סביב הלידה. צירים מוקדמים הוא רב פנים ויכולים להיות אידיופטית. למרות שמחקרים רבים התפתח במסלולים המולקולריים וחשמליים משנים את myometrium מרקמה שקטה להתכווצות אחד, הפתופיזיולוגיה של צירים מוקדמים המדויקת נותרת חמקמקה. האנדוקרינית, דלקתי, וויסות הגנים יש כל קשורות ללידה מוקדמת 3,4. עם זאת, חששות אתיים להגביל את היכולת לבצע מחקר על המנגנונים של צירים מוקדמים בבני אדם. בהתחשב במגבלות אלה, חוקרים רבים פנו לעכברים כמודל למערכת שבה לומד את הפיסיולוגיה של לידה. יש עכברי הריונות קצרים שנמשכו כשלושה שבועות והוא יכול בקלות להיות מניפולציות גנטית. בנוסף, יש לי מודלים עכבר גנטיים מרוביםפותח כדי לקבוע מסלולי האיתות כי הם חיוניים לעבודה 5. למרות הבדלים עיקריים בין העכבר והמלטת אדם, עכברים ובני אדם חולקים רבים של אותם המנגנונים שהם חיוניים לעבודה, כולל דלקת תוך רחמי וזיהום 6. כך, עכברים לשמש ככלי רב ערך לבחינת פעילות רחם. עד כה, את תקן הזהב למדידת התכווצות רחם בעכברים היו vivo לשעבר הקלטות מתח איזומטרי; עם זאת, זה מוגבל לנקודת זמן הריון אחד לכל ניסוי ודורש ההסרה של הרחם מהסביבה הפיזיולוגית שלה. גורם חשוב נוסף הוא המספר הגדול של בעלי חיים הנדרשים לחקירות אלה. לבסוף, מתודולוגיה זו אינה מאפשרת למחקרים ארוכי טווח בוחנים גיוס של הפתופיזיולוגיה עבודה ומוקדמת. הפיתוחים אחרונים שנעשו במכשירי טלמטריה רדיומטרי משמשים ללמוד לחץ דם משתנה 7 בעכברים וintלחץ rauterine בחולדות 8 התחנן השאלה אם באותה הטכנולוגיה יכולה לשמש כדי לחקור שינויים בלחץ תוך-רחמית בעכברים במהלך הריון. לאחר פתרון בעיות ראשוניות, שיטה פותחה בהצלחה למדידת אינדוקציה עבודה והתקדמות בעכבר. גישה זו in vivo יכולה למדוד את המעבר מהמדינה בלחץ הנמוך של הרחם שקט למדינה בלחץ גבוה מעידה על צירה לידה חזק. שיטה זו הייתה מסוגלת לזהות הבדלים משמעותיים בין לחץ עכברים הטרנסגניים עם תהליך לידה שנפרצו ועכברים סוג בר, הממחיש את ההשפעה הפיזיולוגית של ביטוי גנים 9 גם. פרוטוקול זה מספק בזמן אמת, בשיטת vivo ללמוד לחץ רחם עכבר בזמן ההריון.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="702">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:245px;">Name of Material/ Equipment</td>
			<td style="width:105px;">Company</td>
			<td style="width:147px;">Catalog Number</td>
			<td style="width:207px;">Comments/Description</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:245px;">Surgical Glue</td>
			<td style="width:105px;">3M Vetbond</td>
			<td style="width:147px;">1469SB</td>
			<td>Tissue Adhesive--stored in Drierite</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:245px;">Absorbable 6-0 Sutures</td>
			<td style="width:105px;">Ethicon</td>
			<td style="width:147px;">J212H</td>
			<td>Vicryl</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:245px;">Non-absorbable 6-0 Sutures</td>
			<td style="width:105px;">Ethicon</td>
			<td style="width:147px;">8706H</td>
			<td>Prolene</td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;">Water Jacket Blanket + Heating Pad</td>
			<td style="width:105px;">Gaymer</td>
			<td style="width:147px;">T/Pump PN 11184-000 Blanket-66N111CC</td>
			<td>Specialized for rodents</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:245px;">Bead sterilizer</td>
			<td style="width:105px;">Keller</td>
			<td style="width:147px;">Z378577</td>
			<td>Steri 250 Sterilizer</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:245px;">Disecting Microscope</td>
			<td style="width:105px;">Nikon</td>
			<td style="width:147px;">SMZ754</td>
			<td>Fibre optic gooseneck external light source</td>
		</tr>
		<tr height="46">
			<td height="46" style="height:46px;width:245px;">Sterile Surgical Gloves--Latex&#160;</td>
			<td style="width:105px;">Cardinal Health Triflex</td>
			<td style="width:147px;">2D7253</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:245px;">PhysioTel PA-C10 Pressure Transmitter</td>
			<td style="width:105px;">&#160;Data Sciences International</td>
			<td style="width:147px;">270-0135-001</td>
			<td style="width:207px;">TA11PA-C10</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:245px;">Telemeter Reciever</td>
			<td style="width:105px;">&#160;Data Sciences International</td>
			<td style="width:147px;">272-6001-001</td>
			<td style="width:207px;">RPC-1</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:245px;">Dataquest ART 4.3.2 Analysis Platinum</td>
			<td style="width:105px;">&#160;Data Sciences International</td>
			<td style="width:147px;">271-0147-141</td>
			<td>Analysis software</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:245px;">Diet Recovery Gel</td>
			<td style="width:105px;">Clear H2O</td>
			<td style="width:147px;">72-01-5022</td>
			<td>Purified Soft Diet for Rodents</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:245px;">Tergazyme</td>
			<td style="width:105px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td>Z273287</td>
			<td>Enzyme detergent</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

intrauterine telemetry to measure mouse contractile pressure in vivo

יש צורך באינטגרציה מורכבת של אותות מולקולריים וחשמליים להפוך רחם שקט לאיבר התכווצות בסוף ההריון. למרות הגילוי של רגולטורים מרכזיים של התכווצות רחם, תהליך זה הוא עדיין לא הבין באופן מלא. עכברים מהונדסים לספק מודל אידיאלי שבו ללמוד המלטה. בעבר, השיטה היחידה ללמוד התכווצות רחם בעכבר הייתה הקלטות vivo לשעבר איזומטרי מתח, שהם לא טובים מכמה סיבות. הרחם יש להסיר מן הסביבה הפיזיולוגית שלה, כמובן זמן מוגבל של חקירה אפשרי, והעכברים חייבים להיות קורבן. הפיתוח האחרון של טלמטריה רדיומטרי אפשר למדידות של לחץ תוך רחמי in vivo בעכברים אורך, בזמן אמת. כאן, ההשתלה של מַד מֶרְחָק תוך רחמי כדי למדוד שינויי לחץ ברחם העכבר מאמצע הריון ועד ללידה מתוארת. על ידי הבדלים בהשוואה לעיתונותures בין סוג בר עכברים הטרנסגניים, ההשפעה הפיזיולוגית של גן של עניין אפשר לבאר. טכניקה זו צריכה לזרז את פיתוח התרופה המשמש לטיפול בהפרעות myometrial במהלך הריון, כוללים צירים מוקדמים.

בזמן אמת בלחצים תוך רחמי vivo ניתן להקליט באמצעות מערכת רכישת telemetric. דגימת לחץ יחד עם הקלטת וידאו בו זמני של העכבר שימשה כדי ללכוד את מועד המסירה של כל גור המדויק ולתאם זמן אספקה ​​ללחץ תוך רחמי של האם. אז יכולה להיות זממו את כל נקודות הנתונים בכל ההקלטה כדי לי...

Watch this Scientific Journal Video about Intrauterine Telemetry to Measure Mouse Contractile Pressure In Vivo at JoVE.com

Intrauterine Telemetry to Measure Mouse Contractile Pressure In Vivo

This manuscript provides a protocol for implanting telemeters in the mouse for the purpose of measuring intrauterine pressures during pregnancy.

טלמטריה תוך רחמי למדידת לחץ עכבר התכווצות<em&gt; In vivo</em

A complex integration of molecular and electrical signals is needed to transform a quiescent uterus into a contractile organ at the end of pregnancy. ...

intrauterine-telemetry-to-measure-mouse-contractile-pressure-in-vivo

Research

JoVE Journal

Medicine

Intrauterine Telemetry to Measure Mouse Contractile Pressure In Vivo

9.6K Views.  Washington University in St. Louis. This manuscript provides a protocol for implanting telemeters in the mouse for the purpose of measuring intrauterine pressures during pregnancy. 

Video: Intrauterine Telemetry to Measure Mouse Contractile Pressure In Vivo

Pressure Controlled Ventilation to Induce Acute Lung Injury in Mice

Murine models are extensively used to investigate acute injuries of different organs systems (1-34). Acute lung injury (ALI), which occurs with prolonged mechanical ventilation, contributes to morbidity and mortality of critical illness, and studies on novel genetic or pharmacological targets are areas of intense investigation (1-3, 5, 8, 26, 30, 33-36). ALI is defined by the acute onset of the disease, which leads to non-cardiac pulmonary edema and subsequent impairment of pulmonary gas exchange (36). We have developed a murine model of ALI by using a pressure-controlled ventilation to induce ventilator-induced lung injury (2). For this purpose, C57BL/6 mice are anesthetized and a tracheotomy is performed followed by induction of ALI via mechanical ventilation. Mice are ventilated in a pressure-controlled setting with an inspiratory peak pressure of 45 mbar over 1 - 3 hours. As outcome parameters, pulmonary edema (wet-to-dry ratio), bronchoalveolar fluid albumin content, bronchoalveolar fluid and pulmonary tissue myeloperoxidase content and pulmonary gas exchange are assessed (2). Using this technique we could show that it sufficiently induces acute lung inflammation and can distinguish between different treatment groups or genotypes (1-3, 5). Therefore this technique may be helpful for researchers who pursue molecular mechanisms involved in ALI using a genetic approach in mice with gene-targeted deletion.

A murine model for ventilator induced lung injury is an important tool to study an acute lung injury in vivo. Here, we report an easy applicable in situ model for acute lung injury using high-pressure mechanical ventilation to induce acute failure of the lung.

לחץ אוורור מבוקר כדי לגרום פגיעה ריאות חריפה על עכברים

Murine models are extensively used to investigate acute injuries of different organs systems (1-34). Acute lung injury (ALI), which occurs with prolonged ...

In vivo Measurement of the Mouse Pulmonary Endothelial Surface Layer

The endothelial glycocalyx is a layer of proteoglycans and associated glycosaminoglycans lining the vascular lumen. In vivo, the glycocalyx is highly hydrated, forming a substantial endothelial surface layer (ESL) that contributes to the maintenance of endothelial function. As the endothelial glycocalyx is often aberrant in vitro and is lost during standard tissue fixation techniques, study of the ESL requires use of intravital microscopy. To best approximate the complex physiology of the alveolar microvasculature, pulmonary intravital imaging is ideally performed on a freely-moving lung. These preparations, however, typically suffer from extensive motion artifact. We demonstrate how closed-chest intravital microscopy of a freely-moving mouse lung can be used to measure glycocalyx integrity via ESL exclusion of fluorescently-labeled high molecular weight dextrans from the endothelial surface. This non-recovery surgical technique, which requires simultaneous brightfield and fluorescent imaging of the mouse lung, allows for longitudinal observation of the subpleural microvasculature without evidence of inducing confounding lung injury.

In vivo Measurement of the Mouse Pulmonary Endothelial Surface Layer

The endothelial glycocalyx/endothelial surface layer is ideally studied using intravital microscopy. Intravital microscopy is technically challenging in a moving organ such as the lung. We demonstrate how simultaneous brightfield and fluorescent microscopy may be used to estimate endothelial surface layer thickness in a freely-moving in vivo mouse lung.

במדידת vivo של שכבת פני שטח האנדותל ריאתי המאוסה

The endothelial glycocalyx is a layer of proteoglycans and associated glycosaminoglycans lining the vascular lumen. In vivo, the glycocalyx is highly ...

Fetal Echocardiography and Pulsed-wave Doppler Ultrasound in a Rabbit Model of Intrauterine Growth Restriction

Fetal intrauterine growth restriction (IUGR) results in abnormal cardiac function that is apparent antenatally due to advances in fetoplacental Doppler ultrasound and fetal echocardiography. Increasingly, these imaging modalities are being employed clinically to examine cardiac function and assess wellbeing in utero, thereby guiding timing of birth decisions. Here, we used a rabbit model of IUGR that allows analysis of cardiac function in a clinically relevant way. Using isoflurane induced anesthesia, IUGR is surgically created at gestational age day 25 by performing a laparotomy, exposing the bicornuate uterus and then ligating 40-50% of uteroplacental vessels supplying each gestational sac in a single uterine horn. The other horn in the rabbit bicornuate uterus serves as internal control fetuses. Then, after recovery at gestational age day 30 (full term), the same rabbit undergoes examination of fetal cardiac function. Anesthesia is induced with ketamine and xylazine intramuscularly, then maintained by a continuous intravenous infusion of ketamine and xylazine to minimize iatrogenic effects on fetal cardiac function. A repeat laparotomy is performed to expose each gestational sac and a microultrasound examination (VisualSonics VEVO 2100) of fetal cardiac function is performed. Placental insufficiency is evident by a raised pulsatility index or an absent or reversed end diastolic flow of the umbilical artery Doppler waveform. The ductus venosus and middle cerebral artery Doppler is then examined. Fetal echocardiography is performed by recording B mode, M mode and flow velocity waveforms in lateral and apical views. Offline calculations determine standard M-mode cardiac variables, tricuspid and mitral annular plane systolic excursion, speckle tracking and strain analysis, modified myocardial performance index and vascular flow velocity waveforms of interest. This small animal model of IUGR therefore affords examination of in utero cardiac function that is consistent with current clinical practice and is therefore useful in a translational research setting.

We describe examination of fetal cardiac function with contemporary functional fetal echocardiography and fetoplacental Doppler ultrasound using the VisualSonics VEVO 2100 microultrasound in a surgically induced model of intrauterine fetal growth restriction in a rabbit.

אקו העוברי ואולטראסאונד דופלר פעמו גל בדגם ארנב של הגבלת גדילה תוך רחמית

Fetal intrauterine growth restriction (IUGR) results in abnormal cardiac function that is apparent antenatally due to advances in fetoplacental Doppler ...

In vivo 19F MRI for Cell Tracking

In vivo 19F MRI allows quantitative cell tracking without the use of ionizing radiation. It is a noninvasive technique that can be applied to humans. Here, we describe a general protocol for cell labeling, imaging, and image processing. The technique is applicable to various cell types and animal models, although here we focus on a typical mouse model for tracking murine immune cells. The most important issues for cell labeling are described, as these are relevant to all models. Similarly, key imaging parameters are listed, although the details will vary depending on the MRI system and the individual setup. Finally, we include an image processing protocol for quantification. Variations for this, and other parts of the protocol, are assessed in the Discussion section. Based on the detailed procedure described here, the user will need to adapt the protocol for each specific cell type, cell label, animal model, and imaging setup. Note that the protocol can also be adapted for human use, as long as clinical restrictions are met.

In vivo 19F MRI for Cell Tracking

We describe a general protocol for in vivo cell tracking using MRI in a mouse model with ex vivo labeled cells. A typical protocol for cell labeling, image acquisition processing and quantification is included.

בF-MRI 19 vivo למעקב סלולרי

In vivo 19F MRI allows quantitative cell tracking without the use of ionizing radiation. It is a noninvasive technique that can be applied to humans. ...

Accuracy in Dental Medicine, A New Way to Measure Trueness and Precision

Reference scanners are used in dental medicine to verify a lot of procedures. The main interest is to verify impression methods as they serve as a base for dental restorations. The current limitation of many reference scanners is the lack of accuracy scanning large objects like full dental arches, or the limited possibility to assess detailed tooth surfaces. A new reference scanner, based on focus variation scanning technique, was evaluated with regards to highest local and general accuracy. A specific scanning protocol was tested to scan original tooth surface from dental impressions. Also, different model materials were verified. The results showed a high scanning accuracy of the reference scanner with a mean deviation of 5.3 &#177; 1.1 &#181;m for trueness and 1.6 &#177; 0.6 &#181;m for precision in case of full arch scans. Current dental impression methods showed much higher deviations (trueness: 20.4 &#177; 2.2 &#181;m, precision: 12.5 &#177; 2.5 &#181;m) than the internal scanning accuracy of the reference scanner. Smaller objects like single tooth surface can be scanned with an even higher accuracy, enabling the system to assess erosive and abrasive tooth surface loss. The reference scanner can be used to measure differences for a lot of dental research fields. The different magnification levels combined with a high local and general accuracy can be used to assess changes of single teeth or restorations up to full arch changes.

Accuracy is a major demand in dental medicine. To verify accuracy, reference scanners are needed. This article presents a new reference scanner with an adjusted scanning method to acquire a broad variety of dental morphologies with high trueness and precision.

דיוק ברפואת שיניים, הדרך חדשה למדוד את האמיתות ודיוק

Reference scanners are used in dental medicine to verify a lot of procedures. The main interest is to verify impression methods as they serve as a base ...

Measurement of the Pressure-volume Curve in Mouse Lungs

In recent decades the mouse has become the primary animal model of a variety of lung diseases. In models of emphysema or fibrosis, the essential phenotypic changes are best assessed by measurement of the changes in lung elasticity. To best understand specific mechanisms underlying such pathologies in mice, it is essential to make functional measurements that can reflect the developing pathology. Although there are many ways to measure elasticity, the classical method is that of the total lung pressure-volume (PV) curve done over the whole range of lung volumes. This measurement has been made on adult lungs from nearly all mammalian species dating back almost 100 years, and such PV curves also played a major role in the discovery and understanding of the function of pulmonary surfactant in fetal lung development. Unfortunately, such total PV curves have not been widely reported in the mouse, despite the fact that they can provide useful information on the macroscopic effects of structural changes in the lung. Although partial PV curves measuring just the changes in lung volume are sometimes reported, without a measure of absolute volume, the nonlinear nature of the total PV curve makes these partial ones very difficult to interpret. In the present study, we describe a standardized way to measure the total PV curve. We have then tested the ability of these curves to detect changes in mouse lung structure in two common lung pathologies, emphysema and fibrosis. Results showed significant changes in several variables consistent with expected structural changes with these pathologies. This measurement of the lung PV curve in mice thus provides a straightforward means to monitor the progression of the pathophysiologic changes over time and the potential effect of therapeutic procedures.

Here we present a protocol to simply and reliably measure the lung pressure-volume curve in mice, showing that it is sufficiently sensitive to detect phenotypic parenchymal changes in two common lung pathologies, pulmonary fibrosis and emphysema. This metric provides a means to quantify the lung&#8217;s structural changes with developing pathology.

מדידה של עקומת לחץ-נפח ריאות עכבר

In recent decades the mouse has become the primary animal model of a variety of lung diseases. In models of emphysema or fibrosis, the essential ...

Trabecular Meshwork Response to Pressure Elevation in the Living Human Eye

The mechanical characteristics of the trabecular meshwork (TM) are linked to outflow resistance and intraocular pressure (IOP) regulation. The rationale behind this technique is the direct observation of the mechanical response of the TM to acute IOP elevation. Prior to scanning, IOP is measured at baseline and during IOP elevation. The limbus is scanned by spectral-domain optical coherence tomography at baseline and during IOP elevation (ophthalmodynamometer (ODM) applied at 30 g force). Scans are processed to enhance visualization of the aqueous humor outflow pathway using ImageJ. Vascular landmarks are used to identify corresponding locations in baseline and IOP elevation scan volumes. Schlemm canal (SC) cross-sectional area (SC-CSA) and SC length from anterior to posterior along its long axis are measured manually at 10 locations within a 1 mm segment of SC. Mean inner to outer wall distance (short axis length) is calculated as the area of SC divided by its long axis length. To examine the contribution of adjacent tissues to the effect IOP elevations, measurements are repeated without and with smooth muscle relaxation with instillation of tropicamide. TM migration into SC is resisted by TM stiffness, but is enhanced by the support of its attachment to adjacent smooth muscle within the ciliary body. This technique is the first to measure the living human TM response to pressure elevation in situ under physiological conditions within the human eye.

Trabecular meshwork (TM) migration into Schlemm&#8217;s canal space can be induced by acute pressure elevation by ophthalmodynamometer, and observed by spectral domain optical coherence tomography. The goal of this method is to quantify the morphometric response of the living outflow tract to acute pressure elevation in living tissues in situ.

תגובת meshwork trabecular להעלאת לחץ בעין האנושית החי

The mechanical characteristics of the trabecular meshwork (TM) are linked to outflow resistance and intraocular pressure (IOP) regulation. The rationale ...

Cardiac Catheterization in Mice to Measure the Pressure Volume Relationship: Investigating the Bowditch Effect

Animal models that mimic human cardiac disorders have been created to test potential therapeutic strategies. A key component to evaluating these strategies is to examine their effects on heart function. There are several techniques to measure in vivo cardiac mechanics (e.g., echocardiography, pressure/volume relations, etc.). Compared to echocardiography, real-time left ventricular (LV) pressure/volume analysis via catheterization is more precise and insightful in assessing LV function. Additionally, LV pressure/volume analysis provides the ability to instantaneously record changes during manipulations of contractility (e.g., &#946;-adrenergic stimulation) and pathological insults (e.g., ischemia/reperfusion injury). In addition to the maximum (+dP/dt) and minimum (-dP/dt) rate of pressure change in the LV, an accurate assessment of LV function via several load-independent indexes (e.g., end systolic pressure volume relationship and preload recruitable stroke work) can be attained. Heart rate has a significant effect on LV contractility such that an increase in the heart rate is the primary mechanism to increase cardiac output (i.e., Bowditch effect). Thus, when comparing hemodynamics between experimental groups, it is necessary to have similar heart rates. Furthermore, a hallmark of many cardiomyopathy models is a decrease in contractile reserve (i.e., decreased Bowditch effect). Consequently, vital information can be obtained by determining the effects of increasing heart rate on contractility. Our and others data has demonstrated that the neuronal nitric oxide synthase (NOS1) knockout mouse has decreased contractility. Here we describe the procedure of measuring LV pressure/volume with increasing heart rates using the NOS1 knockout mouse model.

This article describes the measurement of murine left ventricular function via pressure/volume analysis at different heart rates.

צנתור לב בעכברים כדי למדוד את יחסי נפח לחץ: חקירת אפקט Bowditch

Animal models that mimic human cardiac disorders have been created to test potential therapeutic strategies. A key component to evaluating these ...

Long-term Blood Pressure Measurement in Freely Moving Mice Using Telemetry

During the development of new vasoactive agents, arterial blood pressure monitoring is crucial for evaluating the efficacy of the new proposed drugs. Indeed, research focusing on the discovery of new potential therapeutic targets using genetically altered mice requires a reliable, long-term assessment of the systemic arterial pressure variation. Currently, the gold standard for obtaining long-term measurements of blood pressure in ambulatory mice uses implantable radio-transmitters, which require&#160;artery cannulation. This technique eliminates the need for tethering, restraining, or anesthetizing the animals which introduce stress and artifacts during data sampling. However, arterial blood pressure monitoring in mice via catheterization can be rather challenging due to the small size of the arteries. Here we present a step-by-step guide to illustrate the crucial key passages for a successful subcutaneous implantation of radio-transmitters and carotid artery cannulation in mice. We also include examples of long-term blood pressure activity taken from freely moving mice after a period of post-surgery recovery. Following this procedure will allow reliable direct blood pressure recordings from multiple animals simultaneously.

The goal of this protocol is to assess systemic blood pressure in conscious freely moving mice using implantable radio-telemetry devices.

מדידת לחץ דם לטווח ארוך בעכברים לנוע בחופשיות באמצעות טלמטריה

During the development of new vasoactive agents, arterial blood pressure monitoring is crucial for evaluating the efficacy of the new proposed drugs. ...

Depletion of Mouse Cells from Human Tumor Xenografts Significantly Improves Downstream Analysis of Target Cells

The use of in vitro cell line models for cancer research has been a useful tool. However, it has been shown that these models fail to reliably mimic patient tumors in different assays1. Human tumor xenografts represent the gold standard with respect to tumor biology, drug discovery, and metastasis research 2-4. Tumor xenografts can be derived from different types of material like tumor cell lines, tumor tissue from primary patient tumors4 or serially transplanted tumors. When propagated in vivo, xenografted tissue is infiltrated and vascularized by cells of mouse origin. Multiple factors such as the tumor entity, the origin of xenografted material, growth rate and region of transplantation influence the composition and the amount of mouse cells present in tumor xenografts. However, even when these factors are kept constant, the degree of mouse cell contamination is highly variable.
Contaminating mouse cells significantly impair downstream analyses of human tumor xenografts. As mouse fibroblasts show high plating efficacies and proliferation rates, they tend to overgrow cultures of human tumor cells, especially slowly proliferating subpopulations. Mouse cell derived DNA, mRNA, and protein components can bias downstream gene expression analysis, next-generation sequencing, as well as proteome analysis 5. To overcome these limitations, we have developed a fast and easy method to isolate untouched human tumor cells from xenografted tumor tissue. This procedure is based on the comprehensive depletion of cells of mouse origin by combining automated tissue dissociation with the benchtop tissue dissociator and magnetic cell sorting. Here, we demonstrate that human target cells can be can be obtained with purities higher than 96% within less than 20 min independent of the tumor type.

Human tumor xenografts are vascularized and infiltrated by cells of mouse origin during the growth phase in vivo. To circumvent the bias caused by these contaminating cells during downstream analysis, we developed a method allowing for comprehensive depletion of all mouse cells by magnetic cell sorting.

חסך בתאי עכבר מן xenografts גידול האנושי משפר משמעותי ניתוח במורד זרם של תאי יעד

The use of in vitro cell line models for cancer research has been a useful tool. However, it has been shown that these models fail to reliably mimic ...