פרוטוקול אוטומטי זה מאפשר הכנה היסטופתולוגית של רקמות מורין עם מערכות רובוטיות המשמשות באופן שגרתי לעיבוד והטבעה של דגימות אנושיות, מה שמגדיל מאוד את איכות הדגימות. היתרונות העיקריים של טכניקה זו, הם שהיא מפחיתה את מספר המשתנים המתודולוגיים והיא משפרת את הסטנדרטיזציה של צעדים פרוצדורליים. הפגנת ההליך, תהיה פרנצ'סקה בוג'יו.
פרנצ'סקה בוג'יו היא פתולוגית שעובדת במעבדה שלי. התחל על ידי שימוש פינצטה קטנה להעביר את דגימות רקמת המעי הגס מורין קבוע מן פורמלין מאוגר ניטרלי, על צלחת עבודה חתך בצלחת פטרי. השתמש אזמל סטרילי לחתוך את המעי הגס לתוך 0.2 כדי 0.3 שברי סנטימטר, ולהשתמש פינצטה למקם קטע אחד לתוך כל אחד משלושה טיפים שאינם סמוכים פלסטיק בולט של קלטת מוטבעת פרפין אוריינטציה.
לחץ בזהירות על ארבעת הקצוות כדי לסגור את הקלטת ולהכניס את הרשת למסגרת תומכת פלסטיק. לאחר מכן, סמן את המסגרת התומכת כך שתזהה את הדגימה ותעביר את המגירה לרשת. שעה אחת לפני העיבוד, הפעל את המעבד האוטומטי.
כאשר המכשיר מציין כי הפרפין נמס, הכנס ידנית את סל המתכת למעבד האוטומטי. לאחר הכנסת כל הקלטות, סגור את הסל ופתח את המכסה של השיבה. הכנס את הסל לתוך הדיור הייעודי של המעבד וסגור את מכסה השיבה.
השתמש במסך המגע במחשב המכשיר כדי להגדיר את פרוטוקול העבודה הבוחר את רצף הפתרונות, התזמון והטמפרטורה, שייושמו בהתאם לתוכנית המופיעה בטבלה. לחץ על סמל המחשב הייעודי כדי להקצות את הפרוטוקול לתהום המכילה את סל הקלטות, ולחץ על לחצן התחל. כאשר המכשיר מאשר את סוף הפרוטוקול עם סמל ייעודי וטון אזעקה, פתח את מכסה תשובה והסר את הסל מהמעבד.
שעה לפני הטמקת הרקמה, הפעל את ההטבעה האוטומטית והמתן עד שהפארפין נמס לחלוטין כפי שצוין על ידי מדחום אמבט הפרפין במכשיר. העבר ידנית עד 32 קלטות מעובדות מסל המעבדים לאר ההטבעה ופתח את מכסה ההטבעה הראשי. השתמש במסך המגע כדי לאותת למערכת הרובוטית כי ארון תקשורת מוכנס ולפתוח את מכסה דיור הכניסה.
הכנס עד ארבעה מתלים לתוך דיור הכניסה ולסגור את מכסה דיור הכניסה. לאחר מכן, השתמש במסך המגע כדי להתחיל את הליך ההטבעה כפי שצוין בטבלה. כאשר המכשיר מאשר את סוף הפרוטוקול עם הסמל הייעודי, הסר את ארון התקשורת של השקע וסגור את מכסה ההטבעה הראשי.
לאחר מכן, העבר את הבלוקים המוטבעים מדף התקשורת לתיבת אחסון. קיצור המעי הגס, וביטוי המעי הגס של גנים דלקתיים פרו, הם פרמטרים בשימוש נרחב עבור ניקוד נוכחות של דקסטרן נתרן סולפט או דלקת הנגרמת DSS. חדירת תאים דלקתיים לתוך פרובריה למינה המעי הוא גם משופרת מאוד על ידי טיפול DSS.
כתמי H&E של דגימות לא מטופלות המעובדות על ידי אוטומציה כפי שהוכח, חושפים פחות תאים דלקתיים חודרים, שינויים אפיתל ושינויים בארכיטקטורת הריר בהשוואה לדגימות מבעלי חיים שטופלו ב- DSS. איכות ההכנה וההטבעה של רקמת המורין המבוצעת על ידי המכשירים האוטומטיים יכולה להיות מאושרת בנוסף על ידי כתמים אימונוהיסטוכימיים עבור CD20 ו- Mallory Trichrome Staining. יש לציין, עיבוד מדגם אוטומטי באופן עקבי מאפשר הערכה של שיעור גבוה יותר של פרמטרים היסטולוגיים, מאשר דגימות מעובדות על ידי השיטה הידנית.
יש לדאוג להכניס את הרקמה כראוי לתוך הרשת לחכות המעבד האוטומטי להיות מוכן, ולחכות פרפין להיות נמס לחלוטין. שיטה זו יכולה לשמש לביצוע ניתוח היסטולוגי של כל רקמת מורין, עם מתאים של דגימות היסטולוגיות אנושיות אשר ישמשו מודלים מורין של פתולוגים אנושיים. טכניקה זו כבר הצליחה ללמוד דלקת רקמות דלקתיות, ויהיה שימושי לחקר מודלים של סרטן מורין המעי הגס.
כמו כמה reagents המשמשים בפרוטוקול זה מסוכנים, זכור תמיד ללבוש כפפות מגן, משקפי מגן ומעיל מעבדה בעת ביצוע הליך זה.
