בהתחשב במגוון הרחב של רצפי פפטיד קצרים, ניתן להאריך שיטה זו לעיצובי חלקיקים רבים אחרים. שינוי פפטיד יכול להפוך את המערכת מתאימה למטרות אבחון. אנקפסולנטיות פלטינה אנטי סרטנית לתרופות עם מתכלה, רעילות נמוכה ייצוב סוכן רלוונטי מאוד עבור יישומים פרמצבטיים.
מחקרים ראשוניים in-vivo עם סרטן השחלות מבטיחים וייחקרו עוד יותר. כדי להתחיל, להשעות 50 מיליגרם של ציספלטין בארבעה מיליליטר של מים טהורים במיוחד ב 60 מעלות צלזיוס. מוסיפים את תותבת החנקה הכסופה לתספורת ציספלטין ומערבבים את התערובת ב-300 עד 400 סל"ד למשך שעתיים ב-60 מעלות צלזיוס בחושך.
לאחר מכן, השתמש 10% לפי משקל חומצה הידרוכלורית כדי לאשר כי אין יוני כסף חינם בתמצית. אם אין צורות כלוריד כסף נוספות בעת הוספת חומצה הידרוכלורית, צנטריפוגה את התערובת ב 3, 220 פעמים כוח הכבידה במשך 10 דקות. תפענח את העל-טבעי ותסנן אותו דרך מסנן מזרק מיקרומטר 0.2.
לאחר מכן, לבדוק את הסינון עבור פלטינה על ידי החלת שתיים עד שלוש טיפות על 10 שני גבישי כלוריד. פלטינה קיימת אם ההשעיה הופכת חומה כהה או כתומה. לאחר מכן, להוסיף 13.3 מיליגרם של נתרן הידרוקסידי במיליליטר אחד של מים לתוך 94.2 מיליגרם השעיה של חומצה אולאית בשלושה מיליליטר של מים ב 60 מעלות צלזיוס.
מערבבים את התערובת במשך שעתיים ב 60 מעלות צלזיוס. לאחר מכן, לכבות את החום ולהמשיך לבחוש בטמפרטורת החדר במשך 16 עד 24 שעות כדי לקבל את המוצר הגולמי כמו תרכובת שמנונית, צהוב חום. צנטריפוגה תערובת התגובה ב 3, 220 פעמים כבידה במשך 10 דקות, ולהסיר את העל טבעי.
יבש את המוצרים על אידוי סיבובי ב 25 מעלות צלזיוס. להשעות את המוצר הגולמי בחמישה מיליליטר של אצטוניטריל על ידי מערבולת ושחזור המוצר על ידי צנטריפוגה. חזור על תהליך כביסה זה לפחות פעמיים נוספות כדי להשיג טהור, חומצה אולאית פלטינה II להצטייד כמו מוצק צהוב חיוור.
ראשית, להשרות 5.7 גרם של Fmoc מוגן L-פנילאלנין פונקציונלי וואנג השרף ב 25 מיליליטר של דימתילפורממיד במשך שעה אחת. לאחר מכן, להשרות את השרף ב 15 מיליליטר של 20% piperidine ב DMF במשך חמש דקות תוך טלטול ב 80 סל"ד כדי לבטל את ההגנה על המין. מסננים את הרשות וחוזרים על ההגנה במשך 20 דקות.
לשטוף את הרעלת עם DMF ואלכוהול isopropyl לאחר מכן. לאחר אישור דה-הגנה, להוסיף Fmoc מוגן L-טירוסין TBTU ו DIPEA ולהסעיר את התערובת במשך 16 עד 24 שעות כדי לבצע צימוד. לשטוף את שרף עם DMF ואלכוהול isopropyl.
בצע בדיקת קייזר ולהמשיך עם דה הגנה ולשטוף כפי שתואר קודם לכן. זוג ו de-protect Fmoc מוגן ליסטין באותו אופן. לשטוף את שרף עם DMF, IPA, מתנול, דיכלורומטן, ו diethyl אתר לאחר מכן.
הניחו בצד גרם אחד של שף נושא KYF לשינוי FITC. משרים את השרף הנותר בחומצה טריפלואורואצטית 95%. 2.5% טרייסופרופילסיליין ו-2.5% מים במשך שלוש שעות כדי לחשוף את הטריפטיד מהספין.
מזרזים את הפפטיד הגולמי עם אתר דיתיל מקורר ל-20 מעלות צלזיוס. לשטוף את המשקע שלוש פעמים על ידי צנטריפוגה ב 30 עד 40 חלקים מיליליטר של אתר diethyl קר ולייבש אותו תחת ואקום. לאחר מכן, מערבבים את הגרם הנותר של שדון KYF עם 120.1 מיליגרם של חומצה 6-acetohexanoic ב 30 מיליליטר של DMF עם TBTU ו DIPEA.
להתסיס את התערובת במשך 16 עד 24 שעות בטמפרטורת החדר כדי לקבל את טריפטיד שונה אזיד. לאחר מכן, לשלב 253 מיליגרם של שף זה עם 3.78 מיליגרם של נחושת מוצקה(I)יודיד 71.9 מיליגרם של פרופרגול florisean ו 2.24 מיליגרם של DIPEA. תן לתערובת להגיב תוך כדי רעידות במשך 24 שעות.
לאחר מכן, לשטוף ביסודיות את שדון נושאת KYF שונה FITC. Cleave KYF שונה FITC מן השף לטהר אותו באותו אופן כמו tripeptide ללא שינוי. כדי להתחיל להכין את הננו-אמולסיה, יש להמיס 10 מיליגרם של חומצה אולאית פלטינה II ב-1.5 מיליליטר של IPA.
משוך פתרון זה לתוך מזרק 5 מיליליטר, לצרף מחט 20 מד, ולהוות את המזרק על משאבת מזרק מעל אזור התגובה. הגדר את משאבת המזרק ל-0.1 מיליליטר לדקה. עבור ננו-אמולסיה עם KYF שונה FITC, להמיס מיליגרם אחד של KYF שונה FITC ומיליגרם אחד של KYF ללא שינוי ב 20 מיליליטר של מים.
עבור ננו-אמולסיה עם KYF לא משופץ, במקום זאת להמיס שני מיליגרם של KYF ב 20 מיליליטר של מים. מחממים את פתרון ה-KYF שעבר שינוי ב-FITC או ללא שינוי ל-37 מעלות צלזיוס. ודא כי פתרון KYF הוא ערבוב על 400 סל"ד, כי המזרק מיושר עם הפתרון.
לאחר מכן, להתחיל את משאבת המזרק כדי להתחיל להוסיף את חומצה אולאית פלטינה שני תריס טיפה חכם. לאחר הוספת ההצטלפות, הפחיתו את מהירות ההתערבבות ל-150 סל"ד ותנו לפתרון להתקרר לטמפרטורת החדר. ממשיכים לבחוש אותו במשך 16 עד 24 שעות.
לאחר מכן, לרכז את nanoemultion ביחידת סינון צנטריפוגלי 10,000 דלתונים. לשטוף את הננו-אמולסיה ביחידת סינון צנטריפוגלית שלוש פעמים עם ארבע מנות מיליליטר של מים אולטרה-חמים. ואז לאחסן אותו כפתרון מימי בארבע מעלות צלזיוס.
המוצר הסופי הוא אופלסנט עבור חלקיקי KYF ופלורסנט עבור חלקיקים שונה FITC. טיפות nanoemulsion מוכן עם KYF ללא שיפוצים היו כדוריים, מפוזרים היטב, ואחיד יחסית בגודל. בהתבסס על תמונות מיקרוסקופיות אלקטרונים שידור, הליבות היו כ 107 ננומטר קוטר.
ננו-אמולסיה שונה FITC, אשר מופיע כאן בירוק, יכול להזין תאים מקווי תאים שונים סרטן השחלות. בעוד הקוטר ההידרודינמי של שני ניסוחים גדל במהלך ארבעה חודשים של אחסון במים, הממדים הכוללים נשמרו. בנוסף, לא נצפתה אופוסוניזציה של אמולסיה לאחר יום של דגירה בסרום חזיר עוברי 20%.
שחרור הפלטינה מהאמולסון היה האיטי ביותר ב-pH 7.4 עם 20.8% בלבד מהפלטינה ששוחררה לאחר ארבע שעות. שחרור הפלטינה הואץ ככל שה-pH ירד. ננו-אמולסיה מצופה KYF המכיל פלטינה הפחיתה את הכדאיות של קווי תאים אלה סרטן השחלות במידה רבה יותר מאשר הושג על ידי קרבופלטין, אנלוגי רלוונטי קלינית.
הננו-אמולסיה גם הראתה ירידה דומה או גדולה יותר בכדאיות מאשר ציספלטין בחמישה מתוך ששת קווי התאים. הננו-אמולסיה מצופה ה-KYF גרמה באופן עקבי לירידה דומה או גדולה יותר בכדאיות מאשר החומצה האולאית פלטינה II לבדה. זוהי שיטה פשוטה ויעילה עבור אנקפסולציית טיפולים הידרופוביים בתוך פיגום חלקיקי בסיס טריפטיד.
פפטידים קצרים הם מתכלים, ויש להם רעילות נמוכה, וזה משמעותי עבור רפואה וביוטכנולוגיה. בצע הליך זה מתחת למכסה המנוע של האדים כדי למנוע חשיפה לממסים אורגניים. חומצה אולאית פלטינה ו- KYF ננומולסיה פלטינה יש תכונות אנטי סרטניות ולכן צריך להיות מטופלים עם טיפול מיוחד.
שיטה זו היא פשוטה במונחים של פעילות filabilator נמוך וציוד, אולם היא מסתמכת על יישום נכון של אסטרטגיית הסינתזה, ואת המושגים הכימיים הבסיסית. השיטה שלנו יכולה להיות מורחבת כדי לספק מולקולות סמים קטנות אחרות. ליבת הננו-חלקיקים מורכבת חומצה אולאית ולכן מתאים אנקפסולציה של סוכנים הידרופוביים.
