ونظرا لمجموعة واسعة من تسلسل الببتيد القصير، يمكن توسيع هذه الطريقة إلى العديد من التصاميم النانوية الأخرى. يمكن تعديل الببتيد جعل النظام مناسبة لأغراض التشخيص. تغليف البلاتين المضادة للسرطان إلى الأدوية مع القابلة للتحلل الحيوي، وانخفاض سمية عامل استقرار هو ذات الصلة للغاية للتطبيقات الصيدلانية.
الدراسات الأولية في vivo مع سرطان المبيض واعدة وسيتم مزيد من التحقيق. للبدء، تعليق 50 ملليغرام من سيسبلاتين في أربعة ملليلتر من المياه النقية جدا في 60 درجة مئوية. إضافة محلول نترات الفضة قطرة الحكمة إلى حل سيسبلاتين ويحرك الخليط في 300 إلى 400 دورة في الدقيقة لمدة ساعتين في 60 درجة مئوية في الظلام.
بعد ذلك، استخدام 10٪ من وزن حمض الهيدروكلوريك للتأكد من عدم وجود أيونات الفضة الحرة في الحل. إذا لم تتشكل أي كلوريد فضي إضافي عند إضافة حمض الهيدروكلوريك، فإن الطاردة المركزية للخليط في الجاذبية 3،220 مرات لمدة 10 دقائق. Decant المابير وتصفية من خلال مرشح حقنة ميكرومتر 0.2.
ثم، اختبار الترشيحات للبلاتين عن طريق تطبيق اثنين إلى ثلاثة قطرات إلى 10 بلورات كلوريد اثنين. البلاتين موجود إذا تحول التعليق إلى اللون البني الداكن أو البرتقالي. بعد ذلك، أضف 13.3 ملليغرام من هيدروكسيد الصوديوم في ملليلتر واحد من الماء إلى تعليق 94.2 ملليغرام من حمض الأوليك في ثلاثة ملليلتر من الماء عند 60 درجة مئوية.
يُحرّك الخليط لمدة ساعتين عند درجة حرارة 60 درجة مئوية. ثم، إيقاف الحرارة والاستمرار في اثارة في درجة حرارة الغرفة لمدة 16 إلى 24 ساعة للحصول على المنتج الخام كما الزيتية، الأصفر والبني المتوج. الطرد المركزي خليط التفاعل في 3، 220 مرة الجاذبية لمدة 10 دقائق، وإزالة فائقة.
جفف المنتجات على مبخّر دوار عند درجة حرارة 25 درجة مئوية. تعليق المنتج الخام في خمسة ملليلتر من الأسيتونيتريل عن طريق دوامة واسترداد المنتج عن طريق الطرد المركزي. كرر هذه العملية الغسيل على الأقل مرتين ثلاث مرات أخرى للحصول على نقية، حمض الأوليك البلاتين II conjugate كما صلبة صفراء شاحبة.
أولاً، نقع 5.7 غرام من فoc محمية L-phenylalanine الراتنج وانغ وظيفية في 25 ملليلتر من ثنائي الفينيلفورماميد لمدة ساعة واحدة. ثم، نقع الراتنج في 15 ملليلتر من 20٪ piperidine في DMF لمدة خمس دقائق في حين تهتز في 80 دورة في الدقيقة لفك حماية أمين. استنزاف الراتنج وتكرار إزالة الحماية لمدة 20 دقيقة.
غسل الراتنج مع DMF والكحول ايزوبروبيل بعد ذلك. مرة واحدة وقد تم تأكيد إزالة الحماية، إضافة FMOC محمية L-التيروسين TBTU وDIPEA وتهيج الخليط لمدة 16 إلى 24 ساعة لأداء اقتران. غسل الراتنج مع DMF والكحول ايزوبروبيل.
قم بإجراء اختبار كايزر والاستمرار في إزالة الحماية والغسيل كما هو موضح مسبقًا. زوجان و de-حماية lysine محمية Fmoc بنفس الطريقة. غسل الراتنج مع DMF، IPA، الميثانول، دي كلورو الميثان، وإيثر ديثيل بعد ذلك.
جانبا غرام واحد من الراتنج الحاملة لKYF لتعديل FITC. نقع الراتنج المتبقية في 95٪ حمض ثلاثي الفلوراستيك. 2.5٪ triisopropylsilane و 2.5٪ ماء لمدة ثلاث ساعات لشق ثلاثي ببتيد من الراتنج.
يُرْكِر الببتيد الخام مع الإيثر الإيثيلي المُبرد إلى 20 درجة مئوية. غسل الترسب ثلاث مرات عن طريق الطرد المركزي في أجزاء 30 إلى 40 ملليلتر من الأثير ديثيل الباردة وتجفيفه تحت فراغ. بعد ذلك، اخلطي الغرام المتبقي من راتنج KYF مع 120.1 ملليغرام من حمض الأسيتوهيكسانويك 6 في 30 ملليلتر من DMF مع TBTU و DIPEA.
تهيج الخليط لمدة 16 إلى 24 ساعة في درجة حرارة الغرفة للحصول على ثلاثيبتيد تعديل azide. ثم، والجمع بين 253 ملليغرام من هذا الراتنج مع 3.78 ملليغرام من النحاس الصلبة (I)i iodide 71.9 ملليغرام من البراريل فلوريسين و 2.24 ملليغرام من DIPEA. اسمحوا الخليط تتفاعل في حين تهتز لمدة 24 ساعة.
ثم، غسل بدقة فيتC تعديل KYF تحمل الراتنج. Cleave فيتك تعديل KYF من الراتنج وتنقية بنفس الطريقة التي ثلاثيبتيد غير معدلة. للبدء في إعداد نانويمزولس، قم بحل 10 ملليغرام من حمض الأوليك البلاتين II conjugate في 1.5 ملليلتر من IPA.
ارسم هذا الحل في حقنة 5 ملليلتر، واربط إبرة قياس 20، واركب الحقنة على مضخة حقنة فوق منطقة التفاعل. تعيين مضخة حقنة إلى 0.1 ملليلتر في الدقيقة الواحدة. بالنسبة للميلان مع شركة FITC المعدلة KYF، قم بحل مليغرام واحد من شركة FITC المعدلة KYF و ملليغرام واحد من KYF غير المعدلة في 20 ملليلتر من الماء.
بالنسبة للناوية مع KYF غير معدلة، بدلا من ذلك قم بحل ملليغرامين من KYF في 20 ملليلتر من الماء. سخني محلول KYF المعدل أو غير المعدل من FITC إلى 37 درجة مئوية. تأكد من أن حل KYF يتم تحريكه عند حوالي 400 دورة في الدقيقة، وأن المحاقن تتماشى مع الحل.
ثم، بدء ضخ حقنة لبدء إضافة حمض الأوليك البلاتين اثنين من قطرة مترافق الحكمة. بمجرد إضافة المترافق، قم بتقليل سرعة التحريك إلى 150 دورة في الدقيقة واترك الحل يبرد لدرجة حرارة الغرفة. استمر في تحريكه لمدة 16 إلى 24 ساعة.
ثم، ركز نانومولولتي في وحدة تصفية 10،000 دالتونس الطرد المركزي. اغسل النانوموليون في وحدة فلتر الطرد المركزي ثلاث مرّات مع أربعة أجزاء من الماء فائق التبخر. ثم تخزينه كحل مائي عند أربع درجات مئوية.
والمنتج النهائي هو opalescent لجسيمات نانوية KYF والفلورسنت لجسيمات نانوية معدلة من FITC. كانت القطرات في نانومولسيف المعدة مع KYF غير معدلة كروية، مشتتة جيدا، وموحدة نسبيا في الحجم. استنادا إلى نقل صور المجهر الإلكترون، كانت النوى حوالي 107 نانومتر في القطر.
يمكن للميلولس النانوي المعدل من FITC ، والذي يظهر هنا باللون الأخضر ، إدخال خلايا من مختلف خطوط خلايا سرطان المبيض. في حين أن القطر الهيدروديناميكية لكلا التركيبتين زاد خلال أربعة أشهر من التخزين في الماء ، تم الحفاظ على الأبعاد الإجمالية. بالإضافة إلى ذلك ، لم يلاحظ أي عملية تأنيث المستحلب بعد يوم من الحضانة في مصل الأبقار الجنينية بنسبة 20٪.
وكان الإفراج عن البلاتين من مستحلب أبطأ في 7.4 pH مع 20.8٪ فقط من البلاتين صدر بعد أربع ساعات. تسارعت الافراج البلاتين مع انخفاض عدد المواد الهزية. الحد من البلاتين التي تحتوي على الحد من النانو المغلفة KYF القدرة على البقاء من هذه خطوط الخلايا السرطانية المبيض إلى درجة أكبر بكثير مما كان يتحقق من قبل كاربوبلاتين, التناظرية ذات الصلة سريريا.
كما أظهر نانويمولسيون انخفاضًا مماثلًا أو أكبر في الجدوى من سيسبلاتين في خمسة من خطوط الخلايا الستة. تسبب نانويمولس المغلفة KYF باستمرار انخفاض مقارنة أو أكبر في قابلية البقاء من حمض الأوليك البلاتين الثاني مترافق وحده. هذا هو وسيلة بسيطة وفعالة لتغليف العلاجات المائية داخل ثلاثيبتيد سقالة نانوية.
الببتيدات القصيرة قابلة للتحلل الحيوي، ولها سمية منخفضة، وهو أمر مهم للطب والتكنولوجيا الحيوية. تنفيذ هذا الإجراء تحت غطاء محرك الدخان لتجنب التعرض للمذيبات العضوية. البلاتين حمض الأوليك و KYF البلاتين nanoemulsions لها خصائص مضادة للسرطان، وبالتالي ينبغي التعامل معها بعناية خاصة.
هذه الطريقة بسيطة من حيث انخفاض نشاط والمعدات filabilator، ومع ذلك فإنه يعتمد على التطبيق السليم لاستراتيجية التوليف، والمفاهيم الكيميائية الأساسية. ويمكن تمديد طريقتنا لتقديم جزيئات المخدرات الصغيرة الأخرى. يتكون جوهر الجسيمات النانوية من حمض الأوليك وبالتالي فهو مناسب لتغليف العوامل الحامضة.
