Kısa peptid dizileri geniş göz önüne alındığında, bu yöntem diğer birçok nanopartikül tasarımları genişletilebilir. Peptit modifikasyonu sistemi tanı amaçlı uygun hale getirebilir. Biyobozunur, düşük toksisite stabilizatör ajan ile ilaçlara anti-kanser platin kapsülleme son derece ilaç uygulamaları için ilgilidir.
Yumurtalık kanseri ile ön in-vivo çalışmalar umut verici ve daha fazla araştırılacaktır. Başlamak için, 60 santigrat derecede ultra saf su dört mililitre 50 miligram sisplatin askıya. Sisplatin çözeltisine gümüş nitrat çözeltisini damla-akıllıca ekleyin ve karanlıkta 60 santigrat derecede iki saat boyunca 300 ila 400 RPM karışımı karıştırın.
Bundan sonra, çözeltide serbest gümüş iyonları olmadığını doğrulamak için ağırlık hidroklorik asit %10 kullanın. Hidroklorik asit ilave edilerek ek gümüş klorür oluşursa, karışımı 3, 220 kat yerçekiminde 10 dakika santrifüj edin. Supernatant decant ve 0,2 mikrometre şırınga filtresi ile filtre.
Daha sonra, 10 iki klorür kristalleri 2-3 damla uygulayarak platin için filtrat test edin. Süspansiyon koyu kahverengi veya turuncuya dönerse platin bulunur. Daha sonra, 60 santigrat derecede üç mililitre suda oleik asit 94,2 miligram süspansiyon içine su bir mililitre sodyum hidroksit 13.3 miligram ekleyin.
60 santigrat derece iki saat boyunca karışımı karıştırın. Daha sonra, ısı kapatın ve bir yağlı, sarı-kahverengi çökelti olarak ham ürün elde etmek için 16 ila 24 saat oda sıcaklığında karıştırmaya devam edin. Reaksiyon karışımını 3, 220 kat yerçekiminde 10 dakika santrifüj edin ve süpernatantı çıkarın.
Ürünleri 25 derecede döner buharlaştırıcıda kurutun. Ham ürünü, ürünü santrifüj le girdap ve geri kazanarak beş mililitre asetonitite askıya alın. Saf, oleik asit platin II soluk sarı bir katı olarak eşlenik elde etmek için en az iki üç kez daha bu yıkama işlemi tekrarlayın.
İlk olarak, bir saat boyunca 25 mililitre dimetilformamid içinde 5.7 gram Fmoc korumalı L-fenilalanin fonksiyonel Wang rekarin ıslatın. Daha sonra, amin korumak için 80 RPM sallayarak beş dakika dmf% 20 piperidine 15 mililitre rezorin ıslatın. Resin drenaj ve de-koruma 20 dakika boyunca tekrarlayın.
Reçiyiyi DMF ve izopropil alkol le yıkayın. Korumadan arındırma onaylandıktan sonra, Fmoc korumalı L-tirozin TBTU ve DIPEA'yı ekleyin ve karışımı kaplin için 16 ila 24 saat boyunca çalka Reçiyiyi DMF ve izopropil alkolle yıkayın.
Kaiser testini gerçekleştirin ve daha önce açıklandığı gibi korumayı arındırmaya ve yıkamaya devam edin. Çift ve de-protect Fmoc aynı şekilde lizin korumalı. Reçieni DMF, IPA, metanol, diklorotan ve diethyl eter ile yıkayın.
FITC modifikasyonu için bir gram KYF rulmanlı rezorna ayırın. Kalan reçiyiyi %95 trifloroasetik asitle ıslatın. Rezorneden tripeptid imal etmek için üç saat boyunca %2.5 triisopropilsilane ve %2.5 su.
20 santigrat dereceye soğutulmuş diethyl eter ile ham peptid çökeltin. 30-40 mililitrelik soğuk dietil eter porsiyonlarında santrifüj ile çökelti üç kez yıkayın ve vakum altında kurulayın. Daha sonra KYF reşarinin kalan gramını 30 mililitre DMF'de 120,1 miligram 6-asetatanoik asit ile TBTU ve DIPEA ile karıştırın.
Azit modifiye tripeptid elde etmek için oda sıcaklığında 16 ila 24 saat boyunca karışımı çalkalayın. Daha sonra, 3.78 katı bakır miligram ile bu reçine 253 miligram birleştirin (I)iyodür 71.9 propargyl florisean miligram ve DIPEA 2.24 miligram. 24 saat sallayarak karışımı tepki sağlar.
Daha sonra FITC modifiye edilmiş KYF rulman reçisini iyice yıkayın. Cleave FITC rezorneden KYF modifiye ve değiştirilmemiş tripeptid aynı şekilde arındırMak. Nanoemoulsion hazırlamaya başlamak için, 10 miligram oleik asit platin II ipa 1.5 mililitre eşlenik eritin.
Bu çözeltiyi 5 mililitrelik şırınganın içine çekin, 20 kalibrelik bir iğne takın ve şırıngayı reaksiyon alanının üzerine bir şırınga pompasına monte edin. Şırınga pompasını dakikada 0,1 mililitreye ayarlayın. FITC modifiye KYF ile bir nanoemülsiyon için, 20 mililitre suda bir miligram FITC modifiye KYF ve bir miligram değiştirilmemiş KYF çözün.
Modifiye edilmemiş KYF ile bir nanoemülsiyon için, bunun yerine 20 mililitre suda iki miligram KYF çözünür. FITC ile modifiye edilmiş veya değiştirilmemiş KYF çözeltisini 37 santigrat dereceye ısıtın. KYF çözeltisinin yaklaşık 400 RPM'de kıpırdadığından ve şırınganın çözeltiyle uyumlu olduğundan emin olun.
Sonra, oleik asit platin iki konjuge damla akıllıca eklemeye başlamak için şırınga pompası başlatın. Eşlekap eklendikten sonra karıştırma hızını 150 RPM'ye düşürün ve çözeltinin oda sıcaklığına soğumasını bekleyin. 16-24 saat karıştırmaya devam edin.
Sonra, 10,000 Daltons santrifüj filtre ünitesinde nanoemultion konsantre. Nanoemülsiyonunu bir santrifüj filtre ünitesinde üç kez dört mililitrelik ultrasaf su ile yıkayın. Ve sonra sulu bir çözelti olarak saklayın.
Nihai ürün KYF nano tanecikleri için opalescent ve FITC modifiye nano tanecikleri için floresan olduğunu. Modifiye edilmemiş KYF ile hazırlanan nanoemülsiyondamlacıklar küresel, iyi dağılmış ve nispeten düzgün boyutlardaydı. İletim elektron mikroskobu görüntülerine dayanarak, çekirdeklerin çapı yaklaşık 107 nanometre idi.
FITC modifiye nanoemülsiyon, burada yeşil görünür, çeşitli yumurtalık kanseri hücre hatları hücreleri girebilir. Her iki formülasyonun hidrodinamik çapı suda dört ay boyunca artarken, genel boyutlar korunmuştur. Buna ek olarak, %20 fetal büyükbaş serumda bir gün kuluçkadan sonra emülsiyon da opsonizasyon gözlenmedi.
Emülsiyondan platin salınımı pH 7.4'te en yavaş ıstabuydu ve platinin sadece %20.8'i dört saat sonra serbest bırakıldı. pH azaldıkça platin salınımı hızlandı. Platin içeren KYF kaplı nanoemülsiyon, bu yumurtalık kanseri hücre hatlarının canlılığını klinik olarak ilgili analog olan karboplatinden çok daha büyük bir dereceye kadar azalttı.
Nanoemülsiyon da altı hücre hatları beş sisplatin daha canlılık karşılaştırılabilir veya daha büyük bir azalma gösterdi. KYF kaplı nanoemülsiyon sürekli oleik asit platin II tek başına eşlenik daha canlılık karşılaştırılabilir veya daha büyük bir azalma indüklenen. Bu tripeptid baz nanopartikül iskele içinde hidrofobik terapötik kapsülleme için basit, verimli bir yöntemdir.
Kısa peptidler biyobozunur ve tıp ve biyoteknoloji için önemli olan düşük toksisite vardır. Organik çözücülere maruz kalmamak için duman kaputu altında bu işlemi gerçekleştirin. Platin oleik asit ve KYF platin nanoemülsiyonlar anti-kanser özelliklere sahiptir ve bu nedenle özel bir özenle ele alınmalıdır.
Bu yöntem düşük filabilatör aktivitesi ve ekipman açısından basittir, ancak sentez stratejisinin doğru uygulanmasına dayanır ve altta yatan kimyasal kavramlar. Yöntemimiz diğer küçük ilaç molekülleri sunmak için uzatılabilir. Nanopartikül çekirdek oleik asit oluşur ve bu nedenle hidrofobik ajanların kapsülleme için uygundur.
