מורין אומאיה, המחקה את מאגר Ommaya המשמש קלינית, מאפשרת לחוקרים לבדוק מגוון טיפולים ממוקדים ישירות לגרורות במוח ומחלת לפטומינגיאל קטלנית אוניברסלית במודל פרה-קליני. היתרון של טכניקה זו הוא כי חוקרים יכולים לספק נפח microliter של תרופות ישירות לתוך הנוזל השדרתי לטיפול גרורות מערכת העצבים המרכזית, לעקוף את מחסום הדם - מוח. פרוטוקול השתלת מורין אומאיה זה מיועד לחוקרים או טכנאים בעלי ניסיון בניתוח סטריאוטקטי והכשרת טכניקה אספטית, החיוניים כדי להבטיח את הצלחת הליך זה.
מי שיוכיחו את ההליך יהיו מרג'י בולדווין ומישל דניאלסון מרפואה השוואתית באוניברסיטת דרום פלורידה, ווינסנט לאו, עמית מחקר בכיר ממעבדתו של ד"ר פיטר פורסייט במרכז הסרטן של מופיט ובמכון המחקר. התחל על ידי הזרקת העכבר תת עורית עם מיליגרם אחד לכל קילוגרם שחרור מתמשכת buprenorphine. לאחר המהרגמת העכבר, להכין אותו לניתוח.
חותכים את האתר הכירורגי עם מספיק אזור גבול כדי למנוע מהפרווה לזהם את אתר החתך. לגלח את הפרווה של כל פני השטח של הראש, ולהכין את העור באמצעות טכניקה סטרילית. לאחר מכן להרוות את האתר עם חיטוי עור germicidal, עובד ממרכז האתר לפריפריה, ולאפשר לו להתייבש.
מקם את הגוף כדי להבטיח את עמוד השדרה נשמר ברמה עם מגנה בור. תוך כדי החלת אחיזה קלה על הזנב, מניחים את הסרט בבסיס הזנב כדי לאבטח אותו. יש למרוח וילון סטרילי או חומר וילון פלסטיק סטרילי המגובה בדבק כדי להגן על האתר הכירורגי מפני זיהום.
עם הצוואר בהרחבה מלאה, הפעל את קצות המספריים הניתוחיים כלפי מטה עם לחץ קל על פני העצם העורפית, החל ממש בין הפינה. הפוך 3 עד 5 מילימטר קטן חותך באמצע הקו, מעט מעל קמצנות palpated. צייר חמישה מיקרוליטרים של השעיית התא למזרק המילטון 30 מד.
השתמש במלקחיים קהים עם קצה 1 עד 2 מ"מ כדי ללחוץ בעדינות על בור המים. הציגו את הטיפים במצב סגור, ופתחו אותם תוך הפעלת לחץ כלפי מטה על הדורה. חזור על הניתוח הקהה עד קרום dural מזוהה בקלות ואת כלי הדם הקשורים נראים באזור החשוף.
תוך החזקת המלקחיים פתוחים כדי לסגת מהשרירים שמסביב, הציגו מחט 30 מד ללא קורינג מתחת לדורה כדי לדמיין את שיפוע, ולוודא כי המחט מוצגת רק מעבר לשיפוע עצמו. לפרוס לאט בוכנה מזרק ולספק תאים ממש מתחת הדורה. אם תציין דליפה באתר ההזרקה, יש להפעיל לחץ עדין עם אפליקטור עם קצה כותנה.
סגור את העור על ידי החלת קליפ פצע או טיפה זעירה של דבק העור. פקח על העכברים מדי יום לאחר הניתוח בשבוע הראשון. אם עכבר נראה סובל מכאבים או במצוקה, יש לטפל בו בזריקה תת עורית של 10 מיליגרם לק"ג carprofen אחת ל-12 עד 24 שעות למשך עד חמישה ימים על סמך ייעוץ והוראה וטרינריים.
להרכיב את התקן הזרקת מורין Ommaya באמצעות יציאת הזרקה מיניאטורית 25 מד דיסק מרווח אחד מילימטר. השתמש דבק סטרילי ציאנואקרילט כדי להבטיח חדירה של כ 2.5 מילימטרים של צינורית מתכת לתוך חצי הכדור הימני, ולהכין את העור על פי טכניקה סטרילית. הפוך חתך עור קטן ואחריו ניתוח בוטה של הרקמות התת עוריות הבסיסיות כדי לחשוף את הגולגולת.
יבשו את הגולגולת באמצעות מקלות אפליקטור ספוגים בכותנה עם מי חמצן. לקדוח חור בר 0.9 מ"מ בגולגולת 0.5 מילימטרים אחוריים ו 1.1 מילימטר רוחב של ברגמה לחשוף את חומר הדורה. הזז את המיקרודריל הצידה והבקיע בעדינות את העצם המקיפה את חור הבר.
הצמד יציאת הזרקה לגולגולת באמצעות דבק סטרילי ציאנואקרילט, והכנס אותו לעומק של כ 2.5 מילימטרים. תפרו את החתירה באמצעות תפרי ניילון 4-0 שאינם נספגים בתבנית תפר מופרעת או תפר. עכברים לאחר ניתוח בית בכלובים בודדים להחלמה.
כדי למנות את העכבר, לגשת מורין Ommaya באמצעות מתאם הזרקת יציאה מזרק המילטון. באמצעות מלקחיים, החזק את החלק העליון של יציאת הזרקה מיניאטורית והכנס בעדינות את מתאם מזרק היציאה במלואו לתוך מחיצת היציאה. לאחר ההזרקה נעשית, לנתק את מורין Ommaya ממתאם הזרקת היציאה עם מלקחיים.
לצורך הדמיית מסלול הזריקה, 2% אוונס כחול הוזרק באמצעות מודל מורין Ommaya. הצבע חדר בהצלחה לחדרים ולמוח בתוך 15 דקות. לאחר 30 דקות, הצבע הפך גלוי על חוט השדרה.
כהוכחה לרעיון, עכברי BALB/c הוזרקו עם קו תאים סרטן השד Her2 + TUBO שכותרתו לוציפראז באופן תם, ואת מורין Ommayas הושתלו. כשבוע לאחר ההזרקה, העכברים החלו לפתח LMD. עכברים אלה טופלו פעם בשבוע במשך עד ארבעה שבועות עם אימונותרפיה נוגדן Her2, או באמצעות טיפול מערכתי באמצעות הזרקה תוך-פטרייתונית או תוך-אט-ecally באמצעות מורין אומאיה.
בעוד עכברים לא מטופלים מתו ביום ה -19, כל העכברים שהחזירו טיפול תוך-תיא-תקלי דרך מורין אומאיה שרדו. בשבוע הרביעי נצפתה רגרסיה מוחלטת של גידולים. בהשוואה לעכברים שטופלו בטיפול מערכתי, לעכברים שקיבלו טיפול תוך-מערכתי הייתה הישרדות כללית ארוכה בהרבה.
בעת ניסיון הליך זה, חשוב כי הגולגולת יבשה לפני הצבת מורין Ommaya. השתמש בכמות קטנה של דבק וממקם את מורין אומאיה במשך כ -10 שניות כדי לדבוק בגולגולת. באמצעות טכניקה זו, חוקרים יכולים לחקור מגוון רחב של תרופות לסרטן במודלים עכבר כי הם רלוונטיים קלינית לעצב אסטרטגיות טיפוליות רציונלי עבור חולים עם גרורות מערכת העצבים המרכזית.
