בדומה ליונקים, מספר סיבי שריר, גורם מכריע של מסת שריר אולטימטיבית, נקבע במהלך עוברי העופות. שיטה זו מאפשרת לחוקרים לחקור עופות במיוגנזה של אובו ומניפולציה של היפרפלזיה של סיבי שריר. טכניקה זו דורשת השקעה מועטה בציוד והיא שיטה קלה וזולה יחסית לחקר מניפולציה של מיווגנזה.
החוקרים החדשים בטכניקה זו עשויים להתקשות בדגירה נכונה של הביצים. מי שידגים את הטכניקה הזו יהיה אני ומורגן גרייבלי, שניהם סטודנטים לתואר שני במדעים במעבדה שלנו. לפני תחילת הניסוי, לבדוק ולהשליך את הביצים באיכות ירודה.
הקצה ורשם מספרי ביצים בודדים לביצים שנבחרו ולאחר מכן שקל את הביצים. לאחר מכן, הניחו את הביצים במגש הדגירה המתאים שלהן, והדגירו אותן מראש בטמפרטורה של 26.6 מעלות צלזיוס עם לחות יחסית של 40% במשך שש שעות. לאחר הדגירה, להגדיל ולשמור על טמפרטורת האינקובטור ב 37 מעלות צלזיוס עם 40% לחות יחסית עד יום הדגירה 18.
מדוד את טמפרטורת פני השטח של מספר ביצים ברחבי האינקובטור פעמיים ביום באמצעות מדחום על פני השטח התרמיים כדי להבטיח שטמפרטורת פני השטח של הביצים היא 37 מעלות צלזיוס. המשיכו למקם מחדש את הביצים על ידי סיבוב כל שעה. כדי להבטיח ירידה של 10% עד 12.5% במשקל הביצה, רשמו את משקלי הביצים מדי יום במהלך 18.5 הימים הראשונים של הדגירה.
ביום ה-10 לדגירה, הכינו את תמיסת הניקוטינמיד ריבוזיד הדרושה לכל 100 מיקרוליטר בהזרקות אובו כפי שמתואר בכתב היד ושמרו על התמיסות בטמפרטורה של 37 מעלות צלזיוס באמבט מים. לאחר הסרת הביצים מגש אחד בכל פעם מהאינקובטור, וכיסוי במגבת חמה, נר כל ביצה כדי לאתר את שק החלמון. נקו את אזור ההזרקה עם 70% אתנול לפני החדרת מחט היפודרמית סטרילית של 20 ס"מ 2.54 ס"מ בעומק סנטימטר אחד לתוך קליפת הביצה כדי להזריק את המינון שהוקצה לטיפול בריבוסייד ניקוטינמיד עם 100 מיקרוליטרים של מלח סטרילי לתוך שק החלמון.
מיד כיסה את אתר ההזרקה בחתיכה קטנה של סרט עמיד למים מוחלט כדי למנוע אובדן לחות מוגזם. לאחר שכל הביצים קיבלו את הטיפול שלהן, הניחו את המגש בחזרה לחממה. ביום הדגירה 18, מוציאים את הביצים מהמגשים כדי להניח אותן בקופסאות הבקיעה שהוקצו על פי הטיפולים שלהן, ואז מכניסים את קופסאות הבקיעה לאינקובטור כשהלחות עולה ל-60% עד שכל הביצים בוקעות או עד היום ה-23 לדגירה.
לפני איסוף הדגימות, קבעו את הכתר כדי לחתוך את אורך האפרוחים המתים על ידי הנחת האפרוח על צדו כשראשו תחוב למטה ורגליים מתחת לגוף ומדידת האורך מראש הראש ועד לזנב, ואז מדוד את רוחב הראש מחור אוזן אחד לחור האוזן השני באורך הראש מהחלק האחורי של המקור ועד לחלק האחורי של הגולגולת. כדי להעריך את היקף הראש, לעטוף חוט לא אלסטי סביב הגולגולת מחור אוזן אחד למשנהו, ולאחר מכן לקבל את המדידה של המיתר עם סרגל מטרי. באותו אופן, לקבוע את היקף החזה על ידי עטיפת חוט סביב החזה מתחת למקום שבו הכנפיים יוצרות קשר עם הגוף לפני הנחת החוט על סרגל מטרי כדי לרכוש את המדידה.
מרססים את שדי האפרוח ב-70% אתנול, ובאצבעות מושכים את הנוצות והעור כדי לחשוף את השרירים העיקריים של החזה ולאחר מכן לוקחים מדידות עם קליפרים דיגיטליים. מדוד את רוחב החזה על פני החזה שבו הכנפיים יוצרות מגע עם הגוף ואת אורך החזה מתחתית עצם הבריח ועד לחלק העליון של כרית השומן. כדי לחלץ את שריר החזה הימני, השתמשו במספריים כירורגיים או באזמל ובמלקחיים כדי לחתוך לאורך עצם החזה לפני שחרור השריר מדופן הגוף.
לאחר הסרת שריר החזה הראשי, הניחו את השריר שטוח על מקל ארטיק כדי לאסוף את המדידות באמצעות קליפרים דיגיטליים. גלה את אורך השריר מהגולגולת לחלק הקאודלי של השריר ואת רוחב השריר בחלק הרחב ביותר של החלק הגולגולתי של השריר. לקביעת עובי השריר, להרים את השד עם מלקחיים ולמדוד בחלק העבה ביותר של החלק הגולגולתי של השריר.
בסיום המדידות, ניתן לאחסן את שרירי הפקטורליס העיקריים של הפקטורליס הימני והשמאלי לניתוחים נוספים בטמפרטורה של מינוס 80 מעלות צלזיוס למשך עד שנה. לעוברים הוזרקו ארבעה מינונים או מינון של ריבוזיד ניקוטינמיד כדי לחקור את ההשפעה של האכלת אובו. נצפה כי לא היו השפעות מינון על משקל הגוף של היום ה -18 עוברים וגוזלים בקעו.
באופן דומה, לא זוהו השפעות מינון על מדידות השרירים העיקריות של החזה עבור כל היום 18 עוברים. עבור אפרוחים בקעו, לא היו השפעות מינון על מדידות אורך ורוחב השרירים העיקריות של החזה. עם זאת, המינון כן השפיע על משקל השריר ועומקו.
לאפרוחים שהתפתחו מהעוברים שלא הוזרקו להם ניקוטינמיד ריבוזיד היו שרירים פקטוראליים עיקריים ששקלו פחות מהאפרוחים מהעוברים שהוזרקו להם 501, 000 ניקוטינמיד ריבוזיד. לאפרוחים מעוברים שהוזרק להם אפס ו-250 ניקוטינאמיד ריבוזיד מילימולרי היה פחות עומק פקטוראליס מאשר לאפרוחים מעוברים שהוזרקו להם 501, 000 ניקוטינאמיד ריבוזיד מילימולרי. המפתח לביצוע ניסוי חזק הוא בחירת ביצים ללא פגמים ואחידות.
זה יבטיח כי כל ההשפעות הן טיפול זרז. עם קצירת שריר החזה הראשי, ניתן להשתמש בהיסטולוגיה למדידת מורפומטריה של סיבי שריר, וניתן לחלץ RNA וחלבון כוללים לניתוח ביטוי גנים וחלבונים. אנו חוקרים כעת את ההשפעות של טכנולוגיה זו על ביצועי הצמיחה באיכות הבשר הטרי של ציפורים מטופלות.
