הדמיה בזמן אמת של מולקולה בודדת של שחרור DNA על ידי מנחת מסוקים CMG

במעבדה שלנו אנו חוקרים את המנגנונים המולקולריים של שכפול דנ"א אאוקריוטי. אנו רוצים להבין את הדינמיקה של שכפול גנום ברמת המולקולה הבודדת. אנו מדמיינים שכפול דנ"א באמצעות מערכות מרובות, כולל חלבונים מטוהרים ותמצית שמקורה בביציות קסנופוס.

הרבה ממה שאנו יודעים על שכפול דנ"א הגיע מניסויים בתפזורת, דימות תאים וביולוגיה מבנית. שיטות אלה הן חזקות מאוד, אבל לעתים קרובות הן מוגבלות במה שהן יכולות לספר לנו על הדינמיקה או התנהגויות חולפות של חלבונים בודדים. זה מה טכניקות של מולקולה בודדת באמת מתאים ללמוד, ולכן השימוש שלהם גדל בשטח.

הפרוטוקול שלנו להדמיה חיה של התרת DNA מתאר פלטפורמה שניתן לבנות עליה ולשנות אותה כדי לחקור היבטים שונים של שכפול DNA. זה יכול לספק הבנה טובה יותר של המנגנון המולקולרי של פעילות CMG בנוכחות רכיבי ריבוזום נבחרים ועקה משכפלת. כדי להבין את המערכות המורכבות הפועלות במהלך שכפול דנ"א, אנו מבודדים חלבוני מפתח ומדמיינים את התנהגותם בזמן אמת במבחנה.

התובנות שאנו מקבלים תורמות לתמונה מלאה יותר של שכפול דנ"א.