Una tecnica modificata per la costrizione aortica trasversale nei topi

Riepilogo

Il presente protocollo descrive una tecnica modificata e semplificata con una procedura di costrizione aortica trasversale mini-invasiva (TAC) utilizzando un divaricatore autocostruito. Questa procedura può essere condotta senza un ventilatore o un microscopio e introduce un sovraccarico di pressione, portando infine a ipertrofia cardiaca o insufficienza cardiaca.

Abstract

La costrizione aortica trasversa (TAC) è un intervento chirurgico frequentemente utilizzato nella ricerca sull'insufficienza cardiaca e l'ipertrofia cardiaca basata sulla formazione di sovraccarico di pressione nei modelli murini. La sfida principale di questa procedura è visualizzare chiaramente l'arco aortico trasversale e fasciare con precisione il vaso bersaglio. Gli approcci classici eseguono una toracotomia parziale per esporre l'arco aortico trasverso. Tuttavia, è un modello a torace aperto che causa un trauma chirurgico piuttosto grande e richiede un ventilatore durante l'intervento chirurgico. Per evitare traumi inutili e semplificare la procedura operativa, l'arco aortico viene avvicinato attraverso la proporzione prossimale dello sterno, raggiungendo e legando la nave bersaglio utilizzando un piccolo divaricatore autocostruito che contiene una trappola. Questa procedura può essere eseguita senza entrare nella cavità pleura e non richiede un ventilatore o un'operazione microchirurgica, che lascia i topi con schemi respiratori fisiologici, semplifica la procedura e riduce significativamente i tempi operativi. A causa dell'approccio meno invasivo e del minor tempo operativo, i topi possono subire meno reazioni di stress e recuperare rapidamente.

Introduzione

L'insufficienza cardiaca è un sintomo clinico complesso che deriva da una compromissione della struttura e della funzione del riempimento ventricolare o dell'espulsione del sangue¹. Lo stadio della malattia è definito principalmente attraverso la classificazione della funzione della New York Heart Association in base alla gravità dei sintomi e all'attività fisica². Per quei pazienti con una frazione di eiezione superiore al 50%, anomalie strutturali e/o funzionali hanno generato peptidi natriuretici per supportare la diagnosi di insufficienza cardiaca con frazione di eiezione conservata (HFpEF)^....

Protocollo

L'attuale protocollo è approvato dal comitato etico del Tongji Hospital, Tongji Medical College, Huazhong University of Science and Technology, Wuhan, Cina. Questa procedura viene eseguita su topi maschi adulti C57/BL6 (>10 settimane di età). Tutti gli strumenti chirurgici sono stati sterilizzati in autoclave prima dell'operazione.

1. Preparazione dello strumento chirurgico

1. Preparare una siringa da 5 mL e pizzicare la punta dell'ago con un portaago per smussarlo.
2. Preparare un ago da 27 G e smussarlo con un portaaghi. Tagliare la punta dell'ago con forbici oftalmiche è un modo alternativo per smussare l'a....

Risultati

Dopo il successo della chirurgia TAC, il sovraccarico di pressione è stato rilevato utilizzando un sistema di imaging ad ultrasuoni. Quattro settimane dopo l'intervento chirurgico, i topi sviluppano una diminuzione della funzione cardiaca. Nel presente studio, l'efficacia della chirurgia TAC è stata convalidata tramite frazione di eiezione (EF), accorciamento frazionato (FS), massa ventricolare sinistra (massa LV) e diametro interno ventricolare sinistro (LVID) di topi sottoposti a chirurgia TAC dopo 4 settima.......

Discussione

L'induzione di un sovraccarico di pressione prolungato può gradualmente causare ipertrofia cardiaca e insufficienza cardiaca. Questo modello è stato utilizzato in numerosi laboratori in tutto il mondo^14,15,16. Il protocollo ha fornito un metodo TAC migliorato che non richiede competenze microchirurgiche o ventilazione meccanica.

Il passo più importante in questo protocollo è passare la sutura di s.......

Materiali

Name	Company	Catalog Number	Comments
4-0 nonabsorbable suture	Jinhuan	HM403	Used for suturing the skin
5 mL syringe	Haifuda Technology Co., Ltd.	BD-309628	Used for making snare containing retractor
7-0 nonabsorbable suture	Jinhuan	HM701	Used for aorta ligation
Animal temperature monitor	Kaerwen	FT3400	Used for monitoring body temperature
Buprenorphine	Sigma	B-044	Used for post-surgical pain treatment
Depilatory cream	Veet	N/A	Used for remove body hair from the surgical area
Heating Pad	Xiaochuangxin	N/A	Used for maintaining body temperature
Ibuprofen	MCE	HY-78131	Used for post-surgical pain treatment
Iron wire (0.5 mm)	Qing Yuan	Iron wire #26	Used for making snare containing retractor
Microscopic tweezers	RWD	F12006-10	Used for penetrating and separating the tissue to open operation space
Needle holder	RWD	F12005-10	Used for pinching off the tip of gauge needle and blunting it
Ophthalmic forceps	RWD	F14012-10	Used for holding skin and other tissues
Ophthalmic scissors	RWD	S11001-08	Used for making sking incision of mouse
Pentobarbital sodium	Sigma	P3761	Used for mouse anesthesia
Sterile operating mat	Hale & hearty	211002	Used for placing animal during surgery
Ultra-sound imaging system	Fujifilm visualsonics	vevo1100	Used for measure the blood flow velocity, left ventricular wall thickness and ejection fraction, https://www.visualsonics.com/product/imaging-systems/vevo-1100