Ottimizzazione delle tecniche urodinamiche del topo per una maggiore precisione

Riepilogo

Questo protocollo fornisce una guida per impermeabilizzare la pelle con cianoacrilato per prevenire l'assorbimento dell'urina da parte del pelo e della pelle. Include le istruzioni per l'applicazione della colla sulla pelle, l'impianto di un catetere vescicale ed elettrodi per la cistometria e le registrazioni elettromiografiche dello sfintere uretrale esterno nei topi svegli.

Abstract

La misurazione accurata dei parametri urinari nei topi svegli è fondamentale per comprendere la disfunzione del tratto urinario inferiore (LUT), in particolare in condizioni come la lesione post-traumatica del midollo spinale (SCI) della vescica neurogena. Tuttavia, l'esecuzione di registrazioni cistometriche nei topi presenta notevoli sfide. Quando i topi sono in una posizione prona e ristretta durante le sessioni di registrazione, l'urina tende ad essere assorbita dal pelo e dalla pelle, portando a una sottostima del volume svuotato (VV). L'obiettivo di questo studio era migliorare l'accuratezza della cistometria e delle registrazioni dell'elettromiografia dello sfintere uretrale esterno (EUS-EMG) nei topi svegli. Abbiamo sviluppato un metodo unico che utilizza l'adesivo cianoacrilato per creare una barriera cutanea impermeabile attorno al meato uretrale e all'addome, impedendo l'assorbimento dell'urina e garantendo misurazioni precise. I risultati mostrano che dopo l'applicazione del cianoacrilato, la somma di VV e RV è rimasta coerente con il volume salino infuso e non sono state osservate aree umide dopo l'esperimento, indicando un successo nella prevenzione dell'assorbimento delle urine. Inoltre, il metodo ha stabilizzato contemporaneamente gli elettrodi collegati allo sfintere uretrale esterno (EUS), ha assicurato segnali elettromiografici stabili (EMG) e ha ridotto al minimo gli artefatti causati dal movimento del topo risvegliato e dalla manipolazione dello sperimentatore. Vengono discussi i dettagli metodologici, i risultati e le implicazioni, evidenziando l'importanza di migliorare le tecniche urodinamiche nella ricerca preclinica.

Introduzione

L'immagazzinamento e il rilascio dell'urina dipendono dall'attività coordinata della vescica urinaria e dello sfintere uretrale esterno (EUS). In alcune patologie come la vescica neurogena, sia i muscoli detrusori vescicali che lo sfintere possono diventare disfunzionali, portando a problemi significativi alla vescica, soprattutto dopo una lesione traumatica del midollo spinale (SCI)¹.

I piccoli roditori sono comunemente usati come modello sperimentale per studiare la funzione preclinica del tratto urinario inferiore (LUT)². Le tecniche di registrazione della cistometria ....

Protocollo

Il protocollo di studio sugli animali è stato approvato dal Comitato istituzionale per la cura e l'uso degli animali della Indiana University School of Medicine. Codice di omologazione: 21098MD/R/MSS/HZ Data di omologazione: 29 settembre 2021.

1. Preparazione del catetere

1. Taglia un tubo di polietilene PE-30 da 30 cm (.017 pollici x .030 pollici). Usa un accendino per svasare un'estremità del tubo, assicurandoti che non tocchi la fiamma, e ritira l'accendino una volta che il tubo ha formato una punta a forma di campana adeguatamente rotonda.
2. Inserire con cautela circa 3/4 dell'ago da 25 G nell'altra estre....

Discussione

Questa tecnica urodinamica descrive una procedura migliorata per misurare il volume delle urine e il segnale EUS-EMG in topi svegli e trattenuti. La presenza di pelo intorno al meato uretrale e all'area addominale può interferire con l'accuratezza della misurazione VV assorbendo l'urina. Sebbene la pelliccia che circonda il meato uretrale e l'addome fosse stata accuratamente rasata prima dell'intervento chirurgico, le piccole pellicce rimanenti all'interno di queste aree e la pelle assorbivano ancora l'urina, lasciando .......

Materiali

Name	Company	Catalog Number	Comments
Accelerator	BOB SMITH INDUSTRIES	BSI-152
Cyanoacrylate	TED PELLA, Inc	14478
Disposable base mold	TED PELLA, Inc	27147-4
Infusion pump	Harvard Apparatus PHD ULTRA	70-3006
Isoflurane	Henry Schein Inc	1182097
PIN	World Precision Instruments	5482
Polyethylene Tubing 30	Braintree Scientific Inc	PE30
Sterile Weighing Boat	HEATHROW SCIENTIFIC	797CK2
Windaq/Lite	DATAQ INSTRUMENTS	249022