정확도 향상을 위한 마우스 요역동학 기술 최적화

요약

이 프로토콜은 털과 피부에 의한 소변 흡수를 방지하기 위해 시아노아크릴레이트로 피부를 방수하는 가이드를 제공합니다. 여기에는 접착제를 피부에 바르고, 방광 카테터를 이식하고, 깨어 있는 쥐에서 방광 측정 및 외부 요도 괄약근 전기 조영 기록을 위한 전극에 대한 지침이 포함되어 있습니다.

초록

깨어 있는 쥐의 요로 매개변수를 정확하게 측정하는 것은 특히 신경인성 방광 외상 후 척수 손상(SCI)과 같은 상태에서 하부 요로(LUT) 기능 장애를 이해하는 데 중요합니다. 그러나 생쥐에서 방광경 분석을 수행하는 것은 주목할 만한 도전 과제를 제시합니다. 생쥐가 기록 세션 동안 엎드려 제한된 위치에 있을 때 소변은 털과 피부에 흡수되는 경향이 있어 공극량(VV)이 과소평가됩니다. 이 연구의 목표는 깨어 있는 쥐에서 방광 측정 및 외부 요도 괄약근 전기검사(EUS-EMG) 기록의 정확도를 향상시키는 것이었습니다. 시아노아크릴레이트 접착제를 사용하여 요도와 복부 주변에 방수 피부 장벽을 형성하여 소변 흡수를 방지하고 정확한 측정을 보장하는 독특한 방법을 개발했습니다. 결과는 시아노아크릴레이트를 적용한 후 VV와 RV의 합이 주입된 식염수 부피와 일관되게 유지되었으며 실험 후 습한 영역이 관찰되지 않았음을 보여주며, 이는 소변 흡수를 성공적으로 예방했음을 나타냅니다. 또한 이 방법은 외부 요도 괄약근(EUS)과 연결된 전극을 동시에 안정화하고, 안정적인 근전도(EMG) 신호를 보장하며, 깨어난 마우스의 움직임과 실험자의 조작으로 인한 아티팩트를 최소화했습니다. 방법론적 세부 사항, 결과 및 시사점에 대해 논의하고 전임상 연구에서 요역동학 기법 개선의 중요성을 강조합니다.

서문

소변의 저장과 배출은 방광과 외부 요도 괄약근(EUS)의 조정된 활동에 달려 있습니다. 신경인성 방광과 같은 일부 병리학에서는 방광 배뇨근과 괄약근이 모두 기능 장애를 일으켜 특히 외상성 척수 손상(^{SCI) 후} 심각한 방광 문제를 일으킬 수 있습니다1.

작은 설치류는 일반적으로 하부 요로(^LUT)의 전임상 기능을 연구하기 위한 실험 모델로 사용됩니다2. 충전 방광경법(FC) 및 EUS 근전도(EUS-EMG) 기록 기법은 방법 선택, 정확한 측정 및 결과 해석에 따라 정밀하고 객관적인 정보를 제공할 수 있습니다³. 요역동학 검사는 일반적으로 배뇨량(VV), 배뇨 효율(VE) 및 방^{광 용량4}을 평가하는 데 사용됩니다. VE는 방광이 얼마나 효과적으로 스스로를 비울 수 있는지를 측정합니다. 공극 부피를 공극 부피와 잔류 부피의 합(VV+RV)으로 나누어 계산합니다. 한편, 방광 용량은 VV(배뇨 중 배출되는 소변의 ^양)에 RV(배뇨 후 방광에 남아 있는 소변의 양)에 더하여 계산합니다5. 따라서 V....

프로토콜

동물 연구 프로토콜은 인디애나 대학교 의과대학의 기관 동물 관리 및 사용 위원회(Institutional Animal Care and Use Committee)의 승인을 받았습니다. 승인 코드: 21098MD/R/MSS/HZ 승인 날짜: 2021년 9월 29일.

1. 카테터의 준비

1. 30cm 폴리에틸렌 PE-30 튜브(.017인치 x .030인치)를 자릅니다. 라이터를 사용하여 튜브의 한쪽 끝을 플레어하여 화염에 닿지 않도록 하고 튜브가 적절하게 둥근 종 모양의 팁을 형성하면 라이터를 빼냅니다.
2. 3G 바늘의 약 4/25을 튜브의 다른 쪽 끝에 조심스럽게 삽입합니다. 1mL 주사기를 준비하고 멸균 0.9% NaCl로 채웁니다. 주사기를 25G 바늘에 연결합니다.
3. 식염수를 부드럽게 주입하여 바늘 끝이 적절하게 둥글고 바늘 끝에서 누출되지 않는지 확인합니다. 압력이 느껴지지 않고 식염수가 카테터를 통해 원활하게 흐르는지 확인하십시오.

2. 전극의 준비

1. 길이가 20cm 인 강선 2 개를 준비합니다. 강선을 잡고 코팅 영역의 양쪽 끝에 샌드 폴리시를 바르고 와이어....

토론

이 요역동학 기법은 깨어 있고 억제된 마우스에서 소변량과 EUS-EMG 신호를 측정하기 위한 개선된 절차를 설명합니다. 요도 및 복부 주변에 털이 있으면 소변을 흡수하여 VV 측정의 정확성을 방해할 수 있습니다. 요도와 복부를 둘러싼 털은 수술 전에 조심스럽게 면도되었지만, 이 부위와 피부에 남아 있는 작은 털은 여전히 소변을 흡수하여 기록 후 복부에 젖은 부분을 남겼습니다. 이 문제는 요도 ?.......

자료

Name	Company	Catalog Number	Comments
Accelerator	BOB SMITH INDUSTRIES	BSI-152
Cyanoacrylate	TED PELLA, Inc	14478
Disposable base mold	TED PELLA, Inc	27147-4
Infusion pump	Harvard Apparatus PHD ULTRA	70-3006
Isoflurane	Henry Schein Inc	1182097
PIN	World Precision Instruments	5482
Polyethylene Tubing 30	Braintree Scientific Inc	PE30
Sterile Weighing Boat	HEATHROW SCIENTIFIC	797CK2
Windaq/Lite	DATAQ INSTRUMENTS	249022