Thaliana di Arabidopsis Sterilizzazione e coltivazione della superficie del seme in camera di crescita

Per iniziare, aggiungere le quantità necessarie di semi di arabidopsis thaliana Columbia zero in una micro provetta da centrifuga da due millilitri. Per la sterilizzazione superficiale dei semi, aggiungere etanolo al 70% nella provetta per due minuti e agitare delicatamente la provetta. Dopo aver rimosso l'etanolo, lavare i semi con acqua sterile per cinque minuti.

Rimuovere l'acqua dal tubo e lasciare che i semi sedimentino sul fondo del tubo per gravità prima di rimuovere l'acqua rimanente. Per creare una sospensione acquosa di semi, aggiungere un volume uguale di acqua sterile alla provetta contenente i semi. Utilizzando un puntale di pipetta largo, distribuire uniformemente circa 30-40 semi in fila in ciascuna area sul piatto medio seguendo una griglia di semina.

Lasciare asciugare l'acqua nei semi per 30 minuti. Sigillare la piastra con nastro adesivo microporoso e avvolgerla in un foglio di alluminio. Stratificare i semi per tre giorni a quattro gradi Celsius al buio per superare la dormienza dei semi e favorire una germinazione uniforme.

Successivamente, srotola la pellicola dal piatto e trasferisci il piatto con i semi stratificati alla luce bianca per un'ora per indurre la germinazione. Avvolgere il piatto con un foglio di alluminio dopo il trattamento leggero per proteggere i semi dalla luce. Posizionate la piastra in posizione verticale in una camera di crescita e coltivatela per quattro giorni al buio a 21 gradi Celsius.