1 Dopo aver creato le linee cellulari2 che esprimono la proteina HaloTag di interesse e Halo-H2B, 3 preparare il reagente di colorazione del ligando dell'alone 4 separatamente per entrambe. 5 Sciacquare le cellule con due millilitri di PBS. 6 Aggiungere il ligando dell'alone contenente il terreno 7 e incubarle a 37 gradi Celsius 8 con il 5% di anidride carbonica per un'ora.
9 Dopo aver rimosso il terreno di colorazione, sciacquare le cellule quattro volte con PBS 11 e incubarle con terreno fresco privo di leganti ad alone. 12 Dopo quattro cicli di incubazione di risciacquo, 13 trasferire il vetrino coprioggetto con le cellule 14 in una camera compatibile con il tavolino del microscopio 15 con pinza sterile. 16 Aggiungere alla camera un terreno privo di rosso fenolo prima dell'imaging.
