Per iniziare l'estrazione del cervello dal topo correttamente soppresso, dopo aver separato la testa dal resto del corpo, esporre il cervello tagliando inizialmente il cranio lungo la sutura sagittale. Con l'aiuto di una pinzetta fine, rimuovere le ossa. Fai attenzione a non danneggiare il tessuto cerebrale sotto il cranio durante questo passaggio.
Usando una spatola, estrai con cura il cervello dal cranio. Metterlo in una piastra a 12 pozzetti contenente soluzione salina tamponata con fosfato di Dulbecco, o DPBS. Successivamente, trasferisci l'intero cervello sul cuscinetto di silicone, dove avverrà la dissezione.
Utilizzare un bisturi per rimuovere il bulbo olfattivo situato all'estremità rostrale del cervello e il cervelletto situato nella parte delle coccole, pur mantenendo la parte centrale del cervello contenente entrambi i ventricoli laterali. Quindi dividere il cervello lungo la fessura longitudinale in due emisferi prima di procedere con la dissezione di entrambi gli emisferi separatamente. Lavorando con un emisfero, riorientarlo in modo che l'area mediale sia rivolta verso l'alto.
Aprire il cervello lungo la linea del corpo calloso, separando la corteccia e lo striato dall'ippocampo, dal setto e dal diencefalo, esponendo così i ventricoli laterali. Rimuovere l'ippocampo, il setto e l'encefalo, seguendo il limite ventrale dei ventricoli. Quindi rimuovere il tessuto oltre le estremità rostrali e coccole della zona subventricolare o SVZ e la corteccia, seguendo il corpo calloso.
Inclinare il tessuto in modo che la SVZ sia rivolta lateralmente. Rimuovere il tessuto striatale sotto la SVZ per ottenere un sottile pezzo di tessuto contenente le cellule staminali neurali. Conservare entrambe le SVZ sezionate dal topo in una piastra a 12 pozzetti contenente DPBS freddo fino al trattamento dei tessuti.
