Quest'opera è stata finanziata da un NARSAD indipendente Investigator Award e un premio in memoria di George Largay per SCD ricerca di IMHRO Rising Star depressione.

Tutti i metodi descritti qui sono stati approvati dal istituzionale Animal Care e uso Committee (IACUC) dell'Università di California, San Diego.
1. topi
<ol><li>Scegliere il ceppo del mouse appropriato per lo studio.</li>
	<li>Topi di acquistare da un fornitore o amplificare una linea per ottenere numeri sperimentali appropriati.</li>
	<li>Gruppo-casa acquistata topi nella struttura animali per almeno 1 settimana prima dell'inizio dello studio per consentire per un periodo di acclimatazione ampio.</li>
	<li>Iniziare la fase di acclimatazione pre-sperimentale quando i topi sono 8 settimane di vita.</li>
</ol>2. abitazione
<ol><li>Scegliere gabbie che sono abbastanza grande da contenere una rotella corrente non ostruita, ricettacolo di cibo e una bottiglia d'acqua.</li>
	<li>Regolare la temperatura e l'umidità per integrare l'ipotesi da testare. Nota: Temperature più elevate riducono lo sviluppo di ABA28.</li>
</ol>3. rotelle di scorrimento in
<ol><li>Scegliere ruote con comunicazione wireless per evitare potenziali distrazioni e coinvolgimenti all'interno della gabbia, vedere la Tabella materiali per un esempio.</li>
</ol>4. bottiglie di acqua
<ol><li>Selezionare una bottiglia di acqua che non saranno in concorrenza per lo spazio con il running ruota o recipiente di cibo dalla gabbia.</li>
	<li>Se fornendo trattamento farmacologico nell'acqua potabile, nastro di condotta della bottiglia per creare un ambiente sensibile alla luce.</li>
</ol>5. cibo
<ol><li>Selezionare un chow di basso contenuto di grassi appropriato per l'ipotesi in fase di test (ad es., roditore dieta 8604 di Envigo). Nota: Le diete alte in grassi e zuccheri possono ridurre lo sviluppo di ABA29.</li>
	<li>Utilizzare un piccolo vaso di vetro per fornire chow, circa 65 cm di diametro x 50 cm in altezza. Nota: Un alimentatore automatico può essere utilizzato invece di un barattolo di vetro, che può ridurre lo stress limitando l'interferenza di investigatore. Questo può essere più vantaggioso se eseguire studi di ABA con manipolazioni farmacologiche.</li>
</ol>6. fase di acclimatazione pre-sperimentale
<ol><li>Impostare l'area sperimentale scegliendo un rack di gabbia vicino i mozzi ruota e computer portatile. Ciò limiterà problemi con trasmissione dei dati.</li>
	<li>Accendere il computer portatile e senza fili mozzi.</li>
	<li>Aprire il software di gestione di ruota sul portatile.<ol>
<li>Guarda il software per garantire che entrambi gli hub sono attivi.</li>
		<li>Apri "strumenti" e seleziona "Elimina ruote". Ripetere questo passaggio 5 volte.</li>
		<li>Chiudere il software, quindi riaprirlo.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Inserire 3 batterie AAA nella batteria di una base della rotella.<ol>
<li>Collegare i cavi di pack batteria all'hardware della base della rotella. Questo sarà disconnesso prima dell'uso. Chiudere il pacco batteria nella base della rotella.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Controllare il software affinché la base della rotella è elencato con l'ID "1" sotto l'hub wireless appropriata. Se la base non è elencata come ID "1", sganciare la batteria e iniziare sopra al punto 6.2.</li>
	<li>Modificare l'ID di ruota da "1" per l'ID del mouse nella colonna nome.</li>
	<li>Base di rotella corrente sul fondo della gabbia con del nastro adesivo per garantire stabilità di aderire. Non consentire qualsiasi nastro attaccare fuori, come topi saranno masticare sul nastro esposto.</li>
	<li>Scegli un disco volante in esecuzione senza un pezzo magnetico corroso.</li>
	<li>Posizionare la ruota sulla base e ruotare la rotellina per verificare la distanza dalle pareti della gabbia e grata.</li>
	<li>Girare il disco un numero specifico di rotazioni per garantire che il software della rotella è correttamente conteggio rotazioni.</li>
	<li>Evitare che pezzi di chow vada perduta sul bagnato biancheria da letto o di ottenere dal dotto-taping la parte inferiore del vaso del cibo per il piano di gabbia, lontano la ruota e la bottiglia d'acqua. Nota: Chow bagnato aumenta l'assunzione di cibo rispetto ad per asciugare chow30.</li>
	<li>Posto 5 pezzi di chow nel barattolo. Nota: Il chow durante la fase di pre-sperimentale è disponibile ad libitum e non deve necessariamente essere pesato. L'esposizione all'esecuzione ruote durante il periodo di acclimatazione può intensificare ABA21,31.</li>
	<li>Posizionare una bottiglia piena di acqua nella gabbia e fornire acqua ad libitum.</li>
	<li>Ripetere fino a quando tutte le gabbie hanno una trazione in esecuzione in modalità wireless collegato, cibo e acqua.</li>
	<li>Individualmente posizionare topi nelle loro gabbie appropriate.</li>
	<li>Nella ruota gestione del software, andare su "file" e fare clic su "Avvia acquisizione".</li>
	<li>Guarda l'aggiornamento del software per garantire rotazioni ruota vengono contate e il sistema sta funzionando bene.</li>
	<li>Acclimatare topi per le condizioni di stabulazione per 2 giorni totale.</li>
	<li>Valutare topi durante questa fase per garantire che siano abbastanza sani per gestire l'esperimento di ABA.</li>
	<li>Verifica gabbie per qualsiasi allagamento da bottiglie di acqua ogni giorno. Se bottiglie hanno allagato, sostituire la vecchia gabbia con una nuova gabbia e ripetere i passaggi necessari per aderire ruote e cibo per la gabbia senza interferenze.</li>
	<li>Il giorno 2, verifica gabbie per i livelli di cibo. Se il cibo è basso, rabboccare con 2 pezzi di chow. Farlo senza disturbare i topi. Nota: Se durante la fase di acclimatazione pre-sperimentale qualsiasi mouse espone hypophagia o è sottopeso, rimuovere il mouse dallo studio.</li>
</ol>7. sperimentale della linea di base fase - giorno 1
<ol><li>Selezionare "fine" e poi "Avvia acquisizione" nel software di gestione della rotella.</li>
	<li>Misurare chow 9 g in un piccolo bicchiere in plastica su una scala con sensibilità 0.00 g. Registrare il peso esatto.</li>
	<li>Rimuovere delicatamente e pesare il mouse in un grande bicchiere in plastica su una scala con sensibilità 0.0 g. Peso record. Nota: È fondamentale limitare lo stress dei topi durante la manipolazione, quindi gestirli con pazienza.</li>
	<li>Smaltire tutto il cibo acclimatazione.</li>
	<li>Biancheria da letto di ricerca per qualsiasi cibo che sia stato rimosso dal vaso e smaltire che pure.</li>
	<li>Lasciare la bottiglia d'acqua in luogo, ma assicurarsi che sia adeguatamente completo.</li>
	<li>Pulire sporchi in esecuzione ruote con 70% isopropanolo e carta asciugamani.</li>
	<li>Se la pulizia era necessario, dopo che si asciuga l'isopropanolo, tornare il mouse alla sua gabbia e sostituire la gabbia sul rack.</li>
	<li>Ripetere questi passaggi fino a quando ogni mouse viene pesato e 9 g di cibo è misurata fuori e messi in gabbie.</li>
</ol>8. sperimentale della linea di base fase - 2-7 giorni
<ol><li>Tornare all'alloggio degli animali allo stesso tempo ogni giorno. Non variano nel prendere misure di più o meno di 10 min.</li>
	<li>Misurare chow 9 g in un piccolo bicchiere in plastica su una scala con sensibilità 0.00 g. Registrare il peso esatto.</li>
	<li>Rimuovere delicatamente e pesare il mouse in un grande bicchiere in plastica su una scala con sensibilità 0.0 g. Peso record.</li>
	<li>Tirare il barattolo di cibo fuori dalla gabbia e dump tutto il cibo in un piccolo Becher sulla scala 0.00 g.<ol>
<li>Se le feci e biancheria da letto sono nel vasetto con il cibo, scegliere tutte le lenzuola e le feci. Usare un piccolo setaccio per strofinare il cibo in polvere nel becher pesatura. Rimuovere qualsiasi feci prima di fare questo con una pinzetta (se necessario). NOTE: Biancheria da letto non si romperà in pezzi più piccoli per passare attraverso il filtro.</li>
		<li>Cercare eventuali residui di cibo nella gabbia e aggiungerli al becher da pesare. Registrare la quantità di cibo restanti. Nota: Se la biancheria da letto e la gabbia deve essere cercati, è meglio farlo mentre il mouse è nella gabbia pesare Becher o trasferimento per ridurre lo stress.</li>
		<li>Smaltire tutto il cibo.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Pulire il vaso pulito e inserire nuovamente la gabbia. Se necessario, sostituire il nastro.</li>
	<li>Posto il misurato in precedenza 9 g di nuovo alimento nel barattolo.</li>
	<li>Pulita di sporco in esecuzione ruote con 70% isopropanolo, quindi asciugare le ruote. Fare questa uno gabbia alla volta e non accidentalmente scambiare ruote.</li>
	<li>Terminare e riavviare l'acquisizione nel programma della rotella ogni altro giorno.</li>
	<li>Ripetere questi passaggi fino all'inizio della fase di restrizione.</li>
</ol>9. sperimentale restrizione fase - giorno 1
<ol><li>Fine e inizio acquisizione del software di gestione di ruota.</li>
	<li>Pesare il cibo di vecchi e nuovi di topi, secondo il protocollo di linea di base.</li>
	<li>
Non pulire le ruote ora. Questo potrebbe distrarre topi durante il loro periodo di alimentazione limitata.</li>
	<li>Consentire l'accesso al nuovo cibo, 9 g di chow, per 6 h. Registrare l'ora di cibo è offerto. Nota: Il tempo durante il ciclo di luce che il cibo è disponibile influenzerà lo sviluppo dell'ABA. Poiché topi dormono normalmente durante il ciclo di luce, dando accesso al cibo durante questo tempo esacerba lo sviluppo dell'ABA, dal momento che i topi non consumano solitamente la maggior parte del loro cibo quotidiano in questo momento. Al contrario, topi dati accesso al cibo durante il ciclo scuro si svilupperanno più lentamente ABA32. Regolare la durata dell'accesso al cibo si tradurrà in più o più breve sopravvivenza volte (Figura 2). Attività anticipatoria cibo (FAA) è iperattività, che si verifica immediatamente prima che il cibo è offerto32,33,34. FAA può influenzare lo sviluppo dell'ABA, come è stato dimostrato che la negazione di accesso della rotella durante FAA migliora ABA comportamento32.<ol>
<li>Rimuovere il cibo esattamente 6 h più successivamente per ogni mouse e misurare il quantitativo residuo. Registrare l'ora di cibo viene rimosso.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Pulire le ruote in questo momento, se necessario e tentare di farlo senza ottenere il tirando cibo dalle gabbie successive.</li>
	<li>Pesare il cibo e calcolare la differenza in cibo per determinare la quantità di cibo mangiato per topo.</li>
	<li>Calcolare il peso di dropout per ogni mouse. Nota: Peso di Dropout è quando un mouse deve essere rimosso dall'esperimento quando raggiunge il 75% della sua misurazione finale del peso corporeo basale. Ad esempio, se un mouse pesa 20g all'inizio della fase di restrizione, quando raggiunge 15 g deve essere rimosso dall'esperimento.</li>
	<li>Conservare una copia del forcellino pesi sul mano nella struttura degli animali. Nota: Gli esperimenti valutazione recupero da ABA possono essere tentati; il cibo è sia fornito ad libitum o ruote sono bloccate, per studiare il processo mediante il quale topi ritorno un corpo sano peso34.</li>
</ol>10. sperimentale restrizione fase - 2 e 14 giorni
<ol><li>Ripetere tutti i passaggi di misurazione nel protocollo 1 giorno di restrizione. Non riavviare acquisizione di ruota.</li>
	<li>Se un mouse raggiunge goccia peso (75% del suo peso corporeo basale), rimuovere il vaso ruota e cibo dalla gabbia e fornire cibo in abbondanza sul fondo della gabbia, quindi procedere con altri topi. Una volta che hanno visto la partecipazione di tutte le gabbie, eutanasia tutti i topi che hanno raggiunto il peso di goccia.</li>
	<li>Lasciare la ruota per ogni mouse per tutta la durata dell'esperimento.</li>
	<li>Controllare ogni mouse al giorno per eventuali lesioni. Se necessario, clip danneggiati le unghie dei piedi, trattare piaghe, ecc Ask personale di cura degli animali per un Consiglio se non siete sicuri su come procedere con un infortunio.</li>
</ol>11. che termina lo studio
<ol><li>Se lo studio è durato 14 giorni, pesare tutti i topi il giorno 15. Restrizione giorno 1 peso è considerato un peso basale. Nota: La lunghezza dello studio può essere modificata per indirizzare l'ipotesi da testare. Lunghi periodi di accesso cibo di durata possono essere utilizzati per estendere la lunghezza di studio.</li>
	<li>Eutanasia topi come necessario.</li>
	<li>Prendere attrezzature sporche di camere adeguate.</li>
	<li>Fine acquisizione totali ruota il giorno 15 di fornire 10 giorni completi dei dati.</li>
	<li>Disabilita i mozzi delle ruote senza fili.</li>
	<li>Estrarre i dati.</li>
	<li>Analizzare i dati.</li>
</ol>

<ol>
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G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+high-fat+diet+prevents+and+reverses+the+development+of+activity-based+anorexia+in+rats.">A high-fat diet prevents and reverses the development of activity-based anorexia in rats.</a> Int J Eat Disord. 41 (5), 383-389 (2008).</li><li>Boakes, R. A., Juraskova, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+role+of+drinking+in+the+suppression+of+food+intake+by+rodent+activity.">The role of drinking in the suppression of food intake by rodent activity.</a> Behav Neurosci. 115 (3), 718-730 (2001).</li><li>Boakes, R. A., Dwyer, D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Weight+loss+in+rats+produced+by+running:+effects+of+prior+experience+and+individual+housing.">Weight loss in rats produced by running: effects of prior experience and individual housing.</a> Q J Exp Psychol. 50 (2), 129-148 (1997).</li><li>Dwyer, D. M., Boakes, R. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Activity-based+anorexia+in+rats+as+failure+to+adapt+to+a+feeding+schedule.">Activity-based anorexia in rats as failure to adapt to a feeding schedule.</a> Behav Neurosci. 111 (1), 195-205 (1997).</li><li>Beneke, W. M., Schulte, S. E., Vander Tuig, J. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+analysis+of+excessive+running+in+the+development+of+activity+anorexia.">An analysis of excessive running in the development of activity anorexia.</a> Physiol Behav. 58 (3), 451-457 (1995).</li><li>Dixon, D. P., Ackert, A. M., Eckel, L. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of,+and+recovery+from,+activity-based+anorexia+in+female+rats.">Development of, and recovery from, activity-based anorexia in female rats.</a> Physiol Behav. 80 (2-3), 273-279 (2003).</li><li>Klenotich, S. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Olanzapine,+but+not+fluoxetine,+treatment+increases+survival+in+activity-based+anorexia+in+mice.">Olanzapine, but not fluoxetine, treatment increases survival in activity-based anorexia in mice.</a> Neuropsychopharmacology. 37 (7), 1620-1631 (2012).</li><li>Ho, E. V., Klenotich, S. J., McMurray, M. S., Dulawa, S. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Activity-Based+Anorexia+Alters+the+Expression+of+BDNF+Transcripts+in+the+Mesocorticolimbic+Reward+Circuit.">Activity-Based Anorexia Alters the Expression of BDNF Transcripts in the Mesocorticolimbic Reward Circuit.</a> PLoS ONE. 11 (11), 0166756 (2016).</li></ol>

Gli autori non hanno nulla a rivelare.

L'esperimento di ABA può essere modificato da sperimentatori di testare diversi ceppi, età, droghe e varie altre variabili del cuscinetto e nella variabilità genetica mente, regolazioni per il running ruota o il periodo di accesso di cibo sarebbero aumentare o fare diminuire la severità di sintomi e tasso di dropout. Questo può servire per aumentare o diminuire la durata dell'esperimento, a seconda della domanda sperimentale di interesse.
Misurazione accurata dell'ingestione di cibo è un...

Dal 1953, roditori sono stati segnalati per mostrare un'iperattività paradossale sull'esecuzione ruote quando ricevono accesso gratuito alle ruote mentre subiva hypophagia volontaria quando la disponibilità di cibo è limitato1. Al contrario, roditori non cadere rapidamente nel peso corporeo quando offerto cibo su un programma senza eseguire ruote o quando ospitato con rotelle di scorrimento in e offerto cibo ad libitum1,2,3. Il modello di ABA in modo affidabile risultato drammatico calo del peso corporeo, hypophagia, ipotermia, perdita di estro e una maggiore stimolazione dell' asse HPA4. In definitiva, ABA provoca la morte, a meno che il soggetto è rimosso dal paradigma5. Il paradigma di ABA offre ai ricercatori un modello animale di AN, un complesso disturbo alimentare caratterizzata da grave alterazione dell'appetito-comportamento, che colpisce circa 1 su 100 femmine e una minore percentuale di maschi6. I pazienti affetti da AN esibiscono frequentemente iperattività, che consiste di estrema quantità di esercizio fisico, e/o irrequietezza generale7,8. Con un tasso di mortalità di circa il 10%, AN ha il più alto tasso di mortalità tra tutti i disturbi psichiatrici9. Il trattamento corrente per AN è limitato alle terapie cognitive, come esistono trattamenti farmacologico approvato per chi soffre di una di10,11.
AN è stato considerato in genere come un disordine che interessa principalmente le femmine. Come una diagnosi che è 10 volte più probabile nelle femmine rispetto ai maschi, soggetti di sesso femminile sono tradizionalmente il fuoco in un12. Tuttavia, dovrebbe adottare particolare attenzione ad escludere i maschi dagli studi. Mentre la diagnosi di un resti inferiore nei maschi, dismorfia muscolare (MD) è una condizione che ha molte somiglianze con AN, in quanto è distorta immagine corporea e dieta è spesso disordinata. Non c'è supporto per la nozione che la MD e AN possono essere classificati in un simile modo13,14,15. Questo potrebbe suggerire che alcuni casi di MD rappresentano la versione"maschile" di AN. Nel contesto di modelli animali, alcuni rapporti hanno suggerito che i maschi sono più suscettibili rispetto alle femmine il paradigma di ABA. Ad esempio, un recente studio ha mostrato un più alto tasso di mortalità e diminuita assunzione di cibo rispetto alle femmine di topi C57Bl/616. Un fattore predittivo di suscettibilità all'ABA è l'attività fisica spontanea (SPA). Ratti con maggiore o minore SPA sono più probabilità di perdere peso nel paradigma della ABA, con maschi ratti che mostrano un effetto più forte di femmine17. Al contrario, femminile roditori sono stati osservati per esercitare più di maschi durante la fase di restrizione di ABA18. Inoltre, studi con topi Balb/cJ hanno dimostrato l'effetto opposto di topi C57Bl/6, dove i topi femminili hanno un più alto tasso di mortalità e diminuita assunzione di cibo rispetto ai maschi (Figura 1)6. Con diversi risultati tra i sessi nel paradigma della ABA e aumentare la consapevolezza dei maschi con disordinata mangiare modelli, soggetti maschili e femminili devono essere testati.
A parte le differenze del sesso nel paradigma della ABA, età e ceppo deve essere considerati quando scegliendo soggetti. Adolescente topi possono modellano più accuratamente AN, poiché AN in genere emerge nell'adolescenza, come osservato con ratti e topi19,20,,,2122. Ceppi che sono più attivi di altri a livello della linea di base hanno un più alto tasso di suscettibilità e la severità di ABA23. Ceppi conosciuti per avere livelli elevati di ansia, come DBA/2, hanno aumentato l'attività, che indicherebbe un più veloce tasso di abbandono del paradigma di ABA24della rotella. Secondo il disegno sperimentale, il ceppo di scelta può essere adattato per massimizzare la durata dell'ABA.
Il paradosso di ABA non è univoco ai topi. Altri mammiferi tra cui ratti, criceti, gerbilli, maiali, scoiattoli e cavie hanno dimostrato questo fenomeno6. La conservazione del fenomeno ABA attraverso specie di mammiferi suggerisce che il paradigma di ABA può fornire uno strumento traslazionale per studiare i meccanismi alla base di anoressia-come comportamento negli esseri umani. Topi in particolare sono adatti per lo studio dei meccanismi alla base di ABA. Topi possono essere alloggiati densamente e tempo di generazione è relativamente breve. I topi hanno un genoma sequenziato completamente, e numerosi ceppi inbred, nazionali e speciali, ad esempio congenics, sono disponibili. Un vasto numero di linee geneticamente manipolati è stato generato, che li rende ideale per gli studi di valutazione genetica influenza sui disturbi quali e Depending sulla questione a portata di mano, i ricercatori possono manipolare l'espressione complessa di circuiti e/o gene neurale per valutare il comportamento del paradigma di ABA, potenzialmente rispondendo alle domande su influenza genetica che non sono possibili quando si studia gli esseri umani.
Un numero limitato di modelli animali di AN attualmente esistenti. Modelli di stress inducono hypophagia nei roditori utilizzando coda pizzicotti, indotta da novità hypophagia, piscina fredda e stimolazione cerebrale. Attraverso l'induzione di stress, cambiamenti nell'asse HPA diminuiscono l'appetito con conseguente corpo ridotto peso25. Tuttavia, l'asse di HPA è anche potentemente stimolato dall'ABA, che incorpora anche funzionalità aggiuntive di AN come iperattività. Un altro modello da considerare a studiare AN è la restrizione alimentare cronica. Limitando il cibo ad una gamma da 40 a 60% di ad libitum, uno in grado di simulare la risposta fisiologica a malnutrizione26. Anche se questo metodo è efficace per studiare gli effetti di alimentazione inadeguata, non riprodurre una questione fondamentale di AN, che è la restrizione alimentare volontaria. Nel paradigma della ABA, gli animali sono privi di accesso al cibo per parte della giornata, ma anche volontariamente riducono l'ingestione di cibo, se è presente anche una ruota. Modelli genetici sono stati utilizzati anche per esaminare l'eziologia dei ricercatori e hanno trovato fattori neurochimici e genetici implicati in AN, come il gene BDNF e neurotrasmettitori dopamina e serotonina27. L'uso di modelli genetici è fondamentale capire i meccanismi neurali alla base AN. Tuttavia, gli studi di vasta associazione di genoma per AN non hanno ancora dato i successi significativi, e non rare varianti in AN sono state identificate. Gli studi futuri dovrebbero combinare un approccio genetico con il modello di ABA per aumentare la comprensione dei fenotipi AN-correlati.
Lo sviluppo di modelli animali per intero disturbi psichiatrici è praticamente impossibile a causa della complessità e l'eterogeneità dei disordini umani. Tuttavia, di componenti specifici, ben definite di un disturbo psichiatrico di modellazione, è possibile ottenere intuizioni uniche di neurobiologia o fisiopatologia sottostante. Tali intuizioni biologici possono quindi essere utilizzati per identificare nuovi trattamenti. Il paradigma di ABA roditore pertanto fornisce uno strumento preclinico per studiare i meccanismi alla base di un simile comportamento che eticamente non può essere studiato nell'uomo, come gli effetti delle manipolazioni genetiche, perturbazioni ai circuiti neurali e la conseguenze di alcuni fattori ambientali.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:881px;" width="881">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:205px;">Wireless Low Profile Running Wheels, Hubs, Software</td>
			<td style="width:139px;">Med Associates</td>
			<td style="width:119px;">ENV-047</td>
			<td style="width:419px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:205px;">Standard Teklad Rodent Chow</td>
			<td style="width:139px;">Envigo</td>
			<td style="width:119px;">8604</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:205px;">8 Week Old Mice</td>
			<td style="width:139px;">Jackson Laboratories</td>
			<td style="width:119px;">Balb/cJ</td>
			<td>Strain used in our study - Can use other strains to assess ABA</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:205px;">Scout Pro Scale 200 g</td>
			<td style="width:139px;">Ohaus</td>
			<td>SPE202</td>
			<td>Used to weigh mice</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:205px;">Scout Pro Scale 400 g</td>
			<td style="width:139px;">Ohaus</td>
			<td style="width:119px;">SPE402</td>
			<td>Used to weight food</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

assessing activity-based anorexia in mice

Roditori sviluppano anoressia basato sulle attività (ABA) quando esposti a un programma di alimentazione limitato e consentito l'accesso gratuito ad una rotella corrente. Queste condizioni portano a una pericolosa riduzione del peso corporeo. Tuttavia, roditori esposti a una sola di queste condizioni, in definitiva, adattano per ristabilire il peso corporeo normale. Anche se aumentato esecuzione accoppiato con riduzione dell'ingestione di cibo volontaria apparire paradossale in condizioni di ABA, ABA comportamento è osservato attraverso numerose specie di mammiferi.
Il paradigma di ABA fornisce un modello animale per anoressia nervosa (AN), un disturbo alimentare con grave alterazione dell'appetito-comportamento. Soggetti sono alloggiati singolarmente con accesso gratuito ad una rotella corrente. Ogni giorno, il soggetto viene offerto cibo per un periodo limitato di tempo. Durante il corso dell'esperimento, il peso corporeo di un soggetto diminuisce da alta attività e basso apporto calorico. La durata dello studio varia in base quanto cibo è offerto ogni giorno, il tipo di cibo offerto, il ceppo del mouse, se i farmaci sono in fase di test e fattori ambientali.
Una mancanza di trattamenti farmacologici efficaci per un pazienti, qualità della vita bassa, alto costo del trattamento e loro alto tasso di mortalità indicano l'urgenza di ulteriori ricerche AN. Forniamo una struttura di base per l'esecuzione di ABA esperimenti con i topi, offrendo un metodo per indagare AN-come comportamento al fine di sviluppare nuove terapie. Questo protocollo è ottimizzato per l'utilizzo in topi Balb/cJ, ma può essere facilmente manipolato per altri ceppi, offrendo grande flessibilità nel lavorare con diverse domande, soprattutto legate a fattori genetici dell'ABA.

Fattore neurotrophic cervello-derivato (BDNF), una proteina che contribuisce alla regolazione di alimentazione così come manutenzione del peso, è ridotta nel siero di pazienti con un35. Questo esperimento ha valutato gli effetti dell'alimentazione pianificata, in esecuzione accesso ruota o entrambi sull'espressione di BDNF nell'ippocampo (HPC), area tegmentale ventrale (VTA), nucleo accumbens (NAc) e la corteccia prefrontale mediale (mPFC). Espressione della mole...

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Assessing Activity-based Anorexia in Mice

Topi alloggiati individualmente con una rotella corrente mentre dato accesso limitato al cibo sviluppano riduzioni nel consumo alimentare e aumentano l'attività sulla ruota in esecuzione. Questo fenomeno sperimentale viene chiamato anoressia basato sulle attività. Questo paradigma fornisce uno strumento sperimentale per lo studio della neurobiologia e comportamenti sottostanti gli aspetti dell'anoressia nervosa.

Valutazione basata sulle attività di anoressia in topi

Rodents develop activity-based anorexia (ABA) when exposed to a restricted feeding schedule and allowed free access to a running wheel. These conditions ...

assessing-activity-based-anorexia-in-mice

Research

JoVE Journal

Behavior

12.4K Views.  University of California, San Diego. Topi alloggiati individualmente con una rotella corrente mentre dato accesso limitato al cibo sviluppano riduzioni nel consumo alimentare e aumentano l'attività sulla ruota in esecuzione. Questo fenomeno sperimentale viene chiamato anoressia basato sulle attività. Questo paradigma fornisce uno strumento sperimentale per lo studio della neurobiologia e comportamenti sottostanti gli aspetti dell'anoressia nervosa.

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Trace Fear Conditioning in Mice

In this experiment we present a technique to measure learning and memory. In the trace fear conditioning protocol presented here there are five pairings between a neutral stimulus and an unconditioned stimulus. There is a 20 sec trace period that separates each conditioning trial. On the following day freezing is measured during presentation of the conditioned stimulus (CS) and trace period. On the third day there is an 8 min test to measure contextual memory. The representative results are from mice that were presented with the aversive unconditioned stimulus (shock) compared to mice that received the tone presentations without the unconditioned stimulus. Trace fear conditioning has been successfully used to detect subtle learning and memory deficits and enhancements in mice that are not found with other fear conditioning methods. This type of fear conditioning is believed to be dependent upon connections between the medial prefrontal cortex and the hippocampus. One current controversy is whether this method is believed to be amygdala-independent. Therefore, other fear conditioning testing is needed to examine amygdala-dependent learning and memory effects, such as through the delay fear conditioning.

In the following experiment we describe a protocol for trace fear conditioning in mice. This type of associative memory includes a trace period that separates the neutral stimulus and the unconditioned stimulus.

Trace paura condizionata in topi

In this experiment we present a technique to measure learning and memory. In the trace fear conditioning protocol presented here there are five pairings ...

Ricerca

Comportamento

Assessing Functional Performance in the Mdx Mouse Model

Duchenne muscular dystrophy (DMD) is a severe and progressive muscle wasting disorder for which no cure is available. Nevertheless, several potential pharmaceutical compounds and gene therapy approaches have progressed into clinical trials. With improvement in muscle function being the most important end point in these trials, a lot of emphasis has been placed on setting up reliable, reproducible, and easy to perform functional tests to pre clinically assess muscle function, strength, condition, and coordination in the mdx mouse model for DMD. Both invasive and noninvasive tests are available. Tests that do not exacerbate the disease can be used to determine the natural history of the disease and the effects of therapeutic interventions (e.g. forelimb grip strength test, two different hanging tests using either a wire or a grid and rotarod running). Alternatively, forced treadmill running can be used to enhance disease progression and/or assess protective effects of therapeutic interventions on disease pathology. We here describe how to perform these most commonly used functional tests in a reliable and reproducible manner. Using these protocols based on standard operating procedures enables comparison of data between different laboratories.

Assessing Functional Performance in the Mdx Mouse Model

The primary outcome measure in clinical trials for neuromuscular disorders is generally improved muscle function. Therefore, assessing the effect of potential therapeutic compounds on muscle performance pre clinically in mouse models is of great importance. We here describe several functional tests to address this.

Valutare prestazioni funzionali nel<em&gt; Mdx</em&gt; Mouse Model

Duchenne muscular dystrophy (DMD) is a severe and progressive muscle wasting disorder for which no cure is available. Nevertheless, several potential ...

Operant Procedures for Assessing Behavioral Flexibility in Rats

Executive functions consist of multiple high-level cognitive processes that drive rule generation and behavioral selection. An emergent property of these processes is the ability to adjust behavior in response to changes in one&#8217;s environment (i.e., behavioral flexibility). These processes are essential to normal human behavior, and may be disrupted in diverse neuropsychiatric conditions, including schizophrenia, alcoholism, depression, stroke, and Alzheimer&#8217;s disease. Understanding of the neurobiology of executive functions has been greatly advanced by the availability of animal tasks for assessing discrete components of behavioral flexibility, particularly strategy shifting and reversal learning. While several types of tasks have been developed, most are non-automated, labor intensive, and allow testing of only one animal at a time. The recent development of automated, operant-based tasks for assessing behavioral flexibility streamlines testing, standardizes stimulus presentation and data recording, and dramatically improves throughput. Here, we describe automated strategy shifting and reversal tasks, using operant chambers controlled by custom written software programs. Using these tasks, we have shown that the medial prefrontal cortex governs strategy shifting but not reversal learning in the rat, similar to the dissociation observed in humans. Moreover, animals with a neonatal hippocampal lesion, a neurodevelopmental model of schizophrenia, are selectively impaired on the strategy shifting task but not the reversal task. The strategy shifting task also allows the identification of separate types of performance errors, each of which is attributable to distinct neural substrates. The availability of these automated tasks, and the evidence supporting the dissociable contributions of separate prefrontal areas, makes them particularly well-suited assays for the investigation of basic neurobiological processes as well as drug discovery and screening in disease models.

The ability to assess executive functions such as behavioral flexibility in rats is useful for investigating the neurobiology of cognition in both intact animals and disease models. Here we describe automated tasks for assessing strategy shifting and reversal learning, which are particularly sensitive to disruptions in prefrontal cortical networks.

Procedure operante per la Valutazione di flessibilità comportamentale in Rats

Executive functions consist of multiple high-level cognitive processes that drive rule generation and behavioral selection. An emergent property of these ...

The Modified Hole Board - Measuring Behavior, Cognition and Social Interaction in Mice and Rats

This protocol describes the modified hole board (mHB), which combines features from a traditional hole board and open field and is designed to measure multiple dimensions of unconditioned behavior in small laboratory mammals (e.g., mice, rats, tree shrews and small primates). This paradigm is a valuable alternative for the use of a behavioral test battery, since a broad behavioral spectrum of an animal&#8217;s behavioral profile can be investigated in one single test.
The apparatus consists of a box, representing the &#8216;protected&#8217; area, separated from a group compartment. A board, on which small cylinders are staggered in three lines, is placed in the center of the box, representing the &#8216;unprotected&#8217; area of the set-up. The cognitive abilities of the animals can be measured by baiting some cylinders on the board and measuring the working and reference memory. Other unconditioned behavior, such as activity-related-, anxiety-related- and social behavior, can be observed using this paradigm. Behavioral flexibility and the ability to habituate to a novel environment can additionally be observed by subjecting the animals to multiple trials in the mHB, revealing insight into the animals&#8217; adaptive capacities.
Due to testing order effects in a behavioral test battery, na&#239;ve animals should be used for each individual experiment. By testing multiple behavioral dimensions in a single paradigm and thereby circumventing this issue, the number of experimental animals used is reduced. Furthermore, by avoiding social isolation during testing and without the need to food deprive the animals, the mHB represents a behavioral test system, inducing if any, very low amount of stress.

This protocol describes the modified hole board, which is a behavioral test set-up that comprises the characteristics of an open field and a traditional hole board. This set-up enables the differential analysis of unconditioned behavior of small laboratory mammals as well as the analysis of cognitive abilities.

The Hole Consiglio Modified - Behavior, Cognition e l&#39;interazione sociale in topi e ratti di misura

This protocol describes the modified hole board (mHB), which combines features from a traditional hole board and open field and is designed to measure ...

Using the Activity-based Anorexia Rodent Model to Study the Neurobiological Basis of Anorexia Nervosa

Anorexia nervosa (AN) is a psychiatric illness characterized by excessively restricted caloric intake and abnormally high levels of physical activity. A challenging illness to treat, due to the lack of understanding of the underlying neurobiology, AN has the highest mortality rate among psychiatric illnesses. To address this need, neuroscientists are using an animal model to study how neural circuits may contribute toward vulnerability to AN and may be affected by AN. Activity-based anorexia (ABA) is a bio-behavioral phenomenon described in rodents that models the key symptoms of anorexia nervosa. When rodents with free access to voluntary exercise on a running wheel experience food restriction, they become hyperactive &#8211; running more than animals with free access to food. Here, we describe the procedures by which ABA is induced in adolescent female C57BL/6 mice. On postnatal day 36 (P36), the animal is housed with access to voluntary exercise on a running wheel. After 4 days of acclimation to the running wheel, on P40, all food is removed from the cage. For the next 3 days, food is returned to the cage (allowing animals free food access) for 2 hr daily. After the fourth day of food restriction, free access to food is returned and the running wheel is removed from the cage to allow the animals to recover. Continuous multi-day analysis of running wheel activity shows that mice become hyperactive within 24 hr following the onset of food restriction. The mice run even during the limited time during which they have access to food. Additionally, the circadian pattern of wheel running becomes disrupted by the experience of food restriction. We have been able to correlate neurobiological changes with various aspects of the animals&#8217; wheel running behavior to implicate particular brain regions and neurochemical changes with resilience and vulnerability to food-restriction induced hyperactivity.

Here we present a protocol to induce activity-based anorexia (ABA) in female adolescent mice. ABA is a condition of hyperactivity evoked by imposing food restriction on rodents with access to a running wheel. This phenomenon is being used as a model to study the underlying neurobiology of anorexia nervosa.

Utilizzando il per attività Anoressia roditore modello per studiare le basi neurobiologiche di Anoressia Nervosa

Anorexia nervosa (AN) is a psychiatric illness characterized by excessively restricted caloric intake and abnormally high levels of physical activity. A ...

The Rodent Psychomotor Vigilance Test (rPVT): A Method for Assessing Neurobehavioral Performance in Rats and Mice

The human Psychomotor Vigilance Test (PVT) is a widely used procedure for measuring changes in fatigue and sustained attention. The present article describes a rodent version of the PVT&#8212;termed the &#34;rPVT&#34;&#8212;that measures similar aspects of attention (i.e., performance accuracy, motor speed, premature responding, and lapses in attention). Data are presented that demonstrate both the short- and long-term usefulness of the rPVT when employed with laboratory rats. Rats easily learn the rPVT, and learning to perform the basic procedure takes less than two weeks of training. Once acquired, rat performances in the rPVT show a high degree of similarity to these same performance measures in the human PVT, including similarities in, lapses in attention, reaction times, vigilance decrements across session time (i.e., the human &#34;time-on-task&#34; effects), and the response-stimulus interval (RSI) effect described for humans. Thus the rPVT can be an extremely valuable tool for assessing the effects of a wide range of variables on sustained attention quite similar to human PVT performances, and thus can be useful for developing novel treatments for neurobehavioral dysfunctions.

The Rodent Psychomotor Vigilance Test rPVT: A Method for Assessing Neurobehavioral Performance in Rats and Mice

A rat version of the human Psychomotor Vigilance Test (PVT) is described that measures aspects of attention similar to those measured with the human PVT, including aspects of human vigilance such as performance accuracy, motor speed, premature responding, and lapses in attention.

Il roditore psicomotorio vigilanza Test (rPVT): un metodo per la valutazione delle prestazioni neurocomportamentali in ratti e topi

The human Psychomotor Vigilance Test (PVT) is a widely used procedure for measuring changes in fatigue and sustained attention. The present article ...

Battery of Behavioral Tests Assessing General Locomotion, Muscular Strength, and Coordination in Mice

Behavioral testing is used in pre-clinical trials to assess the phenotypic effects and outcomes that a particular disease or treatment has on the animal&#39;s wellbeing and health. There are numerous behavioral tests that may be applied. We selected a test for general locomotion, the open field test (OFT); a test for muscular strength, the mesh test (MT); and a test for coordination, the rotarod test (RR). Testing can be accomplished on a weekly or monthly basis. As a test for general locomotion, the OFT works by objectively monitoring movement parameters while the mouse is in an open field apparatus. The field is generally a 2&#39; x 2&#39; box, and the movements are recorded through laser sensing or through video capture. The mouse is placed in the center of the open field and allowed to move freely for the test. The MT uses the latency for a mouse to fall off an inverted screen as a measure of muscular strength. A mouse is placed on a screen, which is inverted over a clear box, and is timed for their latency to fall. Three trials are performed, with the best of the three trials scored for that day. A score of 60 s is the maximum time a mouse is left inverted. Mice are given a 5-min rest period between mesh test trials. Lastly, an accelerated protocol on the RR assesses motor coordination and endurance. During a trial, a mouse walks on a rotating rod as it increases in speed from 4 rpm to 40 rpm over 5 min. The trial ends when the mouse touches the magnetized pressure sensor upon falling. Each mouse undergoes three trials, and the best trial is scored for that day. This combined behavioral data allows for the global assessment of mobility, coordination, strength, and movement of the test animals. At least two out of the three behavioral testing measures must show improvement for an animal to qualify as having overall improved motor function.

Behavioral testing is used in pre-clinical trials to assess the phenotypic effects of a disease or treatment on an animal's wellbeing. In order to globally assess motor functioning, we selected tests for general locomotion, muscular strength, and coordination: the open field test, the mesh test, and the rotarod test, respectively.

Batteria di comportamentali test valutazione generale locomozione, forza muscolare e coordinazione in topi

Behavioral testing is used in pre-clinical trials to assess the phenotypic effects and outcomes that a particular disease or treatment has on the ...

Three Laboratory Procedures for Assessing Different Manifestations of Impulsivity in Rats

The present article provides a guide for the conduction and analysis of three conditioning-based protocols to evaluate impulsivity in rats. Impulsivity is a meaningful concept because it is associated with psychiatric conditions in humans and with maladaptive behavior in non-human animals. It is believed that impulsivity is composed of separate factors. There are laboratory protocols devised to assess each of these factors using standardized automated equipment. Delay discounting is associated with the incapacity to be motivated by delayed outcomes. This factor is evaluated through intertemporal choice protocols, which consist&#160;of presenting the individual with a choice situation involving an immediate reward and a larger but delayed reward. Response inhibition deficit is associated with the incapacity to withhold prepotent responses. Differential reinforcement of low rates (DLR) and feature-negative discrimination protocols assess the response inhibition deficit factor of impulsivity. The former imposes a condition to a motivated individual in which most wait a minimum period of time for a response to be rewarded. The latter evaluates the capacity of individuals to refrain from food seeking responses when a signal of the absence of food is presented. The purpose of these protocols is to construct an objective quantitative measure of impulsivity, which serves to make cross-species comparisons, allowing the possibility of translational research. The advantages of these particular protocols include their easy set-up and application, which stems from the relatively small amount of equipment needed and the automated nature of these protocols.

We present three protocols that assess different forms of impulsivity in rats and other small mammals. Intertemporal choice procedures evaluate the tendency to discount the value of delayed outcomes. Differential reinforcement of low rates and feature-negative discrimination evaluate response inhibition capacity with and without punishment for inappropriate responses, respectively.

Tre procedure di laboratorio per valutare diverse manifestazioni di impulsività in ratti

The present article provides a guide for the conduction and analysis of three conditioning-based protocols to evaluate impulsivity in rats. Impulsivity is ...

Assessing the Coherence of Parents' Short Narratives Regarding their Child Using the Five-Minute Speech Sample Procedure

Valid and efficient measures for assessing the quality of parent-child relationships are needed to facilitate research and evidence-based practice with parents. This paper focuses on such a method, namely Five-Minute Speech Sample-Coherence (FMSS-Coherence). In this method, a parent is asked to speak for five uninterrupted minutes about her/his child and their relationship. The resulted narrative is coded for coherence, namely the extent to which the parent provides&#160;in the narrative&#160;a clear, consistent, multidimensional and well-supported portrayal of the child. FMSS-Coherence is based on attachment research that shows that the coherence of parents&#8217; narratives is indicative of the quality of the parent-child relationship and child adjustment. It overcomes the limitations of attachment narrative measures which are typically labor intensive. FMSS-Coherence is less nuanced than extant attachment narrative measures. Yet, studies of families from different cultural backgrounds, across different child ages and in the context of typically developing children as well as children with special needs suggest that coherence can be reliably evaluated using the FMSS procedure. Furthermore, parents&#8217; FMSS-Coherence is associated with parenting quality and children&#8217;s socio-emotional adjustment. Thus, it holds promise for researchers and practitioners who seek a relatively time- and cost-effective method for assessing the coherence of parents&#8217; narratives regarding their child.

This paper introduces a method for assessing the coherence of parents' short narratives regarding their child and their relationship using the five-minute speech sample procedure.

Valutazione della coerenza delle brevi narrazioni dei genitori per quanto riguarda il loro bambino utilizzando la procedura di campionamento del discorso di cinque minuti

Valid and efficient measures for assessing the quality of parent-child relationships are needed to facilitate research and evidence-based practice with ...

Assessment of Memory Function in Pilocarpine-induced Epileptic Mice

Cognitive impairment is one of the most common comorbidities in temporal lobe epilepsy. To recapitulate epilepsy-associated cognitive decline in an animal model of epilepsy, we generated pilocarpine-treated chronic epileptic mice. We present a protocol for three different behavioral tests using these epileptic mice: novel object location (NL), novel object recognition (NO), and pattern separation (PS) tests to evaluate learning and memory for places, objects, and contexts, respectively. We explain how to set the behavioral apparatus and provide experimental procedures for the NL, NO, and PS tests following an open field test that measures the animals&#8217; basal locomotor activities. We also describe the technical advantages of the NL, NO, and PS tests with respect to other behavioral tests for assessing memory function in epileptic mice. Finally, we discuss possible causes and solutions for epileptic mice failing to make 30 s of good contact with the objects during the familiarization sessions, which is a critical step for successful memory tests. Thus, this protocol provides detailed information about how to assess epilepsy-associated memory impairments using mice. The NL, NO, and PS tests are simple, efficient assays that are appropriate for the evaluation of different kinds of memory in epileptic mice.

This article presents experimental procedures for assessing memory impairments in pilocarpine-induced epileptic mice. This protocol can be used to study the pathophysiologic mechanisms of epilepsy-associated cognitive decline, which is one of the most common comorbidities in epilepsy.

Valutazione della funzione di memoria nei topi epilettici indotti da pilocarpina

Cognitive impairment is one of the most common comorbidities in temporal lobe epilepsy. To recapitulate epilepsy-associated cognitive decline in an animal ...