Name: assessing functional performance in the mdx mouse model
Uploaded: 2014-03-27T21:45:00.000+00:00
Duration: 10 min 32 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Assessing Functional Performance in the Mdx Mouse Model at JoVE.com

Vorremmo ringraziare Margriet Hulsker per la sua assistenza per la ripresa e aiutare a ottenere immagini di topi e dei revisori per i loro commenti molto costruttivi. Questo lavoro è stato sostenuto da ZonMw, TREAT-NMD (numero di contratto LSHM series-CT-2006-036825) e il Parent Project Duchenne.

Gli esperimenti qui descritti sono stati approvati dal comitato etico degli animali (DEC) del Leiden University Medical Center (LUMC). I topi sono stati allevati dalla struttura animale della LUMC e tenuti in gabbie a ventilazione individuale con 12 cicli Dark Light hr. Avevano ad libitum accesso ad acqua e cibo standard. Quando si esegue uno dei test funzionali di seguito descritte, le condizioni sperimentali devono essere rigorosamente controllato per ridurre le variazioni. Preferibilmente, età e sesso topi corrispondenti devono essere utilizzati, come le prestazioni differisce tra età e generi. I topi che appartengono alla stessa cucciolata dovrebbero essere randomizzati sui gruppi sperimentali. Gli animali devono essere testati dallo stesso operatore, che è cieco ai gruppi sperimentali. Le prove devono essere eseguite alla stessa ora del giorno e della settimana, stessa stanza per pareggiare gli odori, rumori, ecc 14 grandi variazioni tra i singoli topi e punti di tempo può essere osservato per tuttiprove funzionali, quindi / dovrebbero essere usati gruppo sperimentale 6-8 topi. Risultati delle prove funzionali può anche variare ampiamente tra i diversi ceppi di tipo selvaggio inbred. Pertanto, topi wild type sperimentali e di controllo devono sempre sono corrispondenti sfondi (in caso di topi mdx utilizzare il C57BL/10ScSnJ ceppo selvatico). Tutti i dati qui descritti sono stati ottenuti con il C57BL/10ScSnJ ceppo selvatico, che ci riferiamo tipo selvatico da qui in avanti. I test qui descritti possono essere utilizzati longitudinalmente da almeno 1-19 mesi di età nei topi mdx tipo e selvatici. Le prove non devono essere ripetuti più di una volta alla settimana per evitare che i topi da perdere interesse e la disponibilità a eseguire l&#39;operazione. 1. Forelimb Grip Forza di prova Utilizzare il test forelimb forza di presa per misurare la forza delle arti anteriori. Il test si basa sulla tendenza di un mouse per afferrare istintivamente una griglia volta sospeso per la coda 15, e adapted da <a href="http://www.treat-nmd.eu/downloads/file/sops/dmd/MDX/dmd_m.2.2_001.pdf" target="_blank">DMD_M2.2.001.pdf</a> . <ol><li> Apparecchiatura costituita: Attaccare una griglia ad un trasduttore di forza, che misura la forza massima esercitata dal mouse sulla griglia durante la trazione. Verificare che l&#39;impostazione sia in modalità tensione di picco (T-PK) per tirare. Le unità di forza possono essere regolate sia in once-di-forza, grammi-di-forza, chili-di-force, kg-di-forza, o Newton. Nota: Noi preferiamo lavorare con grammi come unità di valori. Più contatori sono disponibili in commercio, ma solo trasduttori assiali danno risultati affidabili come tipo di leva trasduttori di forza sono influenzati negativamente dalle leggi fisiche dell&#39;effetto leva. O una griglia nonflexible o triangolo possono essere utilizzati con bar che sono 1-2 mm di diametro. </li><li> Prima della prova, valutare il peso corporeo del topo, per consentire la normalizzazione per peso corporeo. </li><li> Utilizzare grammi come unità di valori. Resettare il contatore all&#39;inizio di ogni recording. </li><li> Rimuovere il mouse dalla gabbia afferrando la coda e si muove orizzontalmente verso la griglia. </li><li> Verificare che il mouse afferra la griglia saldamente con entrambe le zampe anteriori. </li><li> Estrarre il mouse dall&#39;immagine griglia in modo che la sua portata è rotto, la massima forza applicata alla griglia viene visualizzata sul display del trasduttore, che può essere manualmente o automaticamente registrato. </li><li> Prendere tiri in considerazione solo in cui il mouse mostra resistenza allo sperimentatore. Respingere misure in cui una sola zampa, o quelle posteriori sono stati usati e in cui il mouse trasformato durante la trazione. </li><li> Sia il mouse tirare la griglia tre volte di seguito e poi tornare nella gabbia per un periodo di riposo di almeno un minuto Nota:. Tra serie di tira un periodo di riposo è necessario per il mouse per recuperare ed evitare la formazione di abitudini. </li><li> Poi lasciare il mouse eseguire quattro serie di tiri, ciascuno seguito da un breve periodo di riposo. In questo modo il mouse ha tirato un totale di 15x (3 tiri x 5 = 15 volte tira). </li><li> Determinare la forza massima aderenza e per normalizzare il peso corporeo prendendo la media dei tre valori più alti dei 15 valori raccolti. </li><li> Facoltativo: Determinare fatica calcolando il decremento tra la media dei primi due e gli ultimi due serie di tira 1 +2 +3 = A, 4 +5 +6 = B, 10 +11 +12 = C e 13 +14 + 15 = D. La formula: (C + D) / (A + B) dà un valore di 1 per i topi che non sono affaticato. Questo può essere espresso in percentuale in modo che un mouse senza fatica ha un valore di 0% e un mouse che arti anteriori sono completamente affaticato ha un valore di 100%. </li></ol> 2. Test Hanging Con i test pensili, equilibrio, coordinazione e condizione muscolare può essere valutata. Questi test si basano sulla conoscenza che i topi sono desiderosi di restare appeso a un filo o una griglia fino ad esaurimento 16. Ci sono due test pensili distintive che all&#39;inizio della prova siasolo i due arti anteriori o quattro arti sono utilizzati, usando rispettivamente un filo o griglia. La prova appeso con il filo e la griglia sono il metodo di tempo sospeso più lungo adattato da <a href="http://www.treat-nmd.eu/downloads/file/sops/dmd/MDX/DMD_M.2.1.004.pdf" target="_blank">DMD_M.2.1.004.pdf</a> e <a href="http://www.treat-nmd.eu/downloads/file/sops/dmd/MDX/DMD_M.2.1.005.pdf" target="_blank">DMD_M.2.1.005.pdf</a> rispettivamente. Un limite appeso fisso viene utilizzato di 600 sec. La maggior parte dei topi wild type può appendere per 600 secondi, mentre i topi distrofici non può. Per ridurre il trascorrere del tempo l&#39;esecuzione di questa prova, un tempo massimo di impiccagione è stato messo in atto. I topi che cadono fuori il filo o la griglia prima di allora sono date fino a due tentativi. Questo viene fatto per riassicurare che i topi sono davvero in grado di appendere e non cadono a causa di goffaggine. <ol><li> Prova pensile con due arti <ol><li> Apparecchiatura impostare: Strettamente garantire un panno di metallo di spessore traino 2 mm a uno scaffale con del nastro adesivo e mantenere il gancio circa il 370; cm sopra uno strato di assestamento. Nota: in alternativa, potrebbero essere utilizzati a 55 cm di larghezza mm di filo metallico di spessore 2 che è strettamente protetta tra due tribune verticali. La distanza di 37 cm è sufficiente a incoraggiare i topi a rimanere appeso, ma anche sufficientemente bassa per evitare che i topi da lesioni in caso di caduta verso il basso. Il filo non deve vibrare o spostare durante la prova in quanto ciò potrebbe interferire con le prestazioni del mouse. </li><li> Maneggiare il mouse con la coda e portarlo vicino al filo. </li><li> Sia il mouse afferrare il filo con solo le due zampe anteriori, e abbassare le zampe posteriori in modo tale che il mouse si blocca solo con le due zampe anteriori sul filo (Figura 2B). </li><li> Direttamente avviare il timer quando il mouse viene rilasciato. Dopo il rilascio, i topi forti cercano di catturare il filo con tutti i quattro arti e la coda, che è consentito (Figura 2C). </li><li> Quando un mouse mostra un comportamento improprio (come in equilibrio su o deliberatamente salta fuori il filo come shriscatto a figure 2D e 2E), affrontare direttamente questo sostituendo il mouse sul filo senza fermare il timer. </li><li> Quando un topo cade il filo, fermare il timer e registrare il tempo appeso. </li><li> Quando i topi sono in grado di appendere per 600 sec, li togliere il filo e restituirli alla gabbia. I topi che cadono prima di questo limite sono dati un massimo di altri due tentativi. </li><li> Registrare il tempo massimo di sospensione (cioè la più lunga delle prove) e di utilizzare per ulteriori analisi. </li></ol></li><li> Prova attaccatura con quattro arti <ol><li> Apparecchiatura istituito: Utilizzare una mano fatta quadrato o il coperchio di una grande gabbia per un ratto o coniglio per questo test. Posizionare la griglia 25 cm sopra biancheria morbida per evitare i topi da sé danneggiare upon cadere, ma anche per scoraggiare topi saltare intenzionalmente fuori della griglia. Fissare saldamente la griglia in modo che lo sperimentatore non deve tenere manualmente la rete durante l&#39;esperimento come questi movimenti potrebbero interfere con le prestazioni del mouse. </li><li> Posizionare il mouse sulla griglia in modo che afferra con le sue quattro zampe. </li><li> Invertire la griglia in modo che il mouse è appesa e direttamente avviare il timer. </li><li> La sessione di test termina per i topi che sono in grado di appendere per una durata di 600 sec. Dare topi che cadono fuori dalla griglia prima di un massimo di altri due tentativi. </li><li> Utilizzare il tempo massimo di sospensione (ie. La più lunga delle prove) per ulteriori analisi. </li></ol></li></ol> 3. Gara podistica rotarod Con la forza muscolare prova rotarod, coordinazione, equilibrio, e la condizione può essere determinato 17. <ol><li> Apparecchiatura set up: Per questo test, i topi devono correre su un tubo rotante. Assicurarsi che la velocità di regime è fissato a 5 giri al minuto (rpm), e che la velocità aumenta 5-45 rpm nei primi 15 sec all&#39;avvio. Dopo questo deve mantenere la sua velocità. </li><li> Posizionare il mouse sul tubo del rotarodquando ruota a bassa velocità costante di 5 rpm. Cinque topi possono essere testati contemporaneamente. </li><li> Inizia la corsa una volta che tutti i topi sono posizionati. Entro i primi 15 sec la velocità del tubo accelera 5-45 rpm dopo che mantiene tale velocità. </li><li> Monitorare la corsa. Il tempo di esecuzione è continuamente registrata dal software. Tempo di esecuzione si arresta automaticamente quando il mouse si stacca il tubo come questo attiva la barra del tempo posizionato sotto il tubo. Riposizionare topi che girano attorno fronte nella direzione opposta del tubo durante l&#39;esecuzione senza fermare il tubo di ruotare. </li><li> Terminare la sessione di test per i topi che sono in grado di correre per una durata di 500 sec. Dare topi un massimo di altri due tentativi, permettendo loro di migliorare il loro tempo di esecuzione, quando cadono in precedenza. </li><li> Utilizzare il tempo massimo di funzionamento (ossia la più lunga delle prove) per ulteriori analisi. </li></ol> 4. Esercizio Treadmill Iltapis roulant può essere utilizzato in tre modi come strumento nella ricerca clinica pre. In primo luogo, costretto tapis roulant in esecuzione può essere utilizzato per aggravare la patologia della malattia, come descritto in questo protocollo (vedi anche: <a href="http://www.treat-nmd.eu/downloads/file/sops/dmd/MDX/DMD_M.2.1.001.pdf" target="_blank">DMD_M2.1.001.pdf</a> ). In secondo luogo, la capacità di funzionamento massima di topi e gli effetti dei trattamenti su questo può essere valutata (Vedere per il metodo per consentire topi funzionano fino all&#39;esaurimento <a href="http://www.treat-nmd.eu/downloads/file/sops/dmd/MDX/DMD_M.2.1.003.pdf">DMD_M.2.1.003.pdf</a> ). Infine, tapis roulant in esecuzione può essere utilizzato prima per un altro test funzionale di esaurire il mouse in modo che si comporta meno bene nella seconda prova 13. Ciò avviene esercitando topi due o tre volte alla settimana come descritto di seguito, direttamente seguito da una delle prove funzionali descritte protocollo 1-3. <ol><li> Apparecchiatura istituito: Ci sono diversi tapis roulant disponibili in commercio su cui molti topi possono run simultaneamente e per i quali l&#39;elevazione, la durata e la velocità può essere regolata. Alcuni tapis roulant sono dotati di una griglia per fornire shock a bassa intensità per incoraggiare i topi a correre. Tuttavia, i topi mdx sono sensibili allo stress e può essere facilmente motivati ​​in modo più amichevole da una leggera spinta con la mano nella direzione di marcia. Pertanto, è fortemente incoraggiato NON utilizzare la griglia shock. Generalmente, la stimolazione con la mano è necessaria solo durante la prima sessione in esecuzione. </li><li> Posizionare il mouse sul tapis roulant orizzontale. </li><li> Avviare il tapis roulant ad una velocità di marcia di 12 m / min. Velocità inferiori (8 m / min) devono essere utilizzati in topi (&gt; 15 mesi), il cui velocità più elevate facilmente portare ad esaurimento. </li><li> Durante la prima sessione, incoraggiare topi per eseguire spingendo delicatamente quando sono vicino alla fine del nastro. </li><li> Quando i topi hanno eseguito per una durata di 30 minuti, metterli di nuovo nella loro gabbia. </li><li> Ripetere questa operazione due volte a settimana, ad esempio per 12 settimane. </li&gt; <li> Consenti periodi di riposo quando necessario. Per esempio, alcuni topi mdx devono smettere di correre e dovrebbe essere consentito di riposare per un paio di minuti. Se questo accade, spegnere la cinghia, dare a tutti i topi un periodo di riposo di due minuti, girare la cintura per due minuti a 4 m / min. Dopo questo, aumentare la velocità di 12 m / min e permettere ai topi per finire il protocollo. È importante che tutti i topi completare l&#39;intero protocollo esecuzione. Nota: In caso di topi mdx hanno bisogno di periodi di riposo, si consideri un warm up prima che il protocollo di esercizio 30 min. Questa sessione scaldare costituito da: un periodo di acclimatazione 2 min ad una velocità di 4 m / min, seguito immediatamente da un 8 min riscaldamento a 8 m / min. Nelle nostre mani 4-16 settimane topi mdx femminili sono in grado di completare il protocollo di esercizio 30 min senza riposo. Altri hanno riferito che in età abbinato maschile topi mdx il 45% dei topi hanno bisogno di periodi di riposo per terminare l&#39;esercizio. Il protocollo di warm up a ridurres la quantità di fermate 12. </li></ol>

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Gli autori non hanno nulla da rivelare.

I test funzionali presentati qui sono riproducibili, facili da eseguire e applicabile al wild type e topi distrofici indipendentemente dalla loro età. I test forniscono strumenti utili per la validità clinicamente valutare la funzione muscolare, la forza, la condizione e il coordinamento. Quando si testano gli effetti di un composto sulla storia naturale della malattia, i test non invasivi descritte qui (forza di presa forelimb, entrambe le prove pensili e il test rotarod) può essere ben combinati in un regime di pro...

Distrofia muscolare di Duchenne (DMD) è il disturbo neuromuscolare più comune che colpisce 1/5.000 neonati maschi. Questa malattia atrofia muscolare grave e progressiva è causata da mutazioni nel gene DMD che interrompono la fase di lettura aperta e impediscono la sintesi della proteina distrofina funzionale. Le fibre muscolari prive di distrofina sono vulnerabili ad esercitare danno indotto. Una volta esaurito capacità rigenerativa del muscolo, e causa di infiammazione cronica del muscolo danneggiato, fibre vengono sostituite da tessuto connettivo e grasso, successivamente, portando ad una perdita di funzione. Generalmente, i pazienti DMD perdono deambulazione degli arti inferiori all&#39;inizio del secondo decennio. Più tardi, anche i muscoli delle braccia e del cingolo scapolare sono colpiti e pazienti spesso sviluppano scoliosi toraco-lombare a causa di indebolimento asimmetrica dei muscoli che sostengono la colonna vertebrale. Ventilazione assistita è generalmente richiesto nella tarda adolescenza o vent&#39;anni. Respiratorie e insufficienza cardiaca piomboa morte nella terza o quarta decade 1. Sebbene il gene-malattia è stato scoperto oltre 25 anni fa 2, non esiste una cura disponibile per la DMD. Tuttavia, una migliore assistenza sanitaria e l&#39;uso di corticosteroidi hanno aumentato l&#39;aspettativa di vita nel mondo occidentale 3. Con l&#39;uso di modelli animali come il topo mdx, importanti passi avanti nella scoperta di potenziali strategie terapeutiche sono state fatte. Il topo mdx è il modello di topo DMD più comunemente usato. Esso ha una mutazione puntiforme nell&#39;esone 23 della DMD gene murino e di conseguenza manca distrofina 4. Negli ultimi due anni, molte strategie proposte sono progredite in studi clinici 5-9. In questi studi, il miglioramento della funzione muscolare è l&#39;endpoint primario, sottolineando l&#39;importanza di testare i benefici dei composti sulla funzione muscolare nei topi durante la fase clinica preliminare di test. Come DMDpazienti, anche le fibre muscolari negative distrofina di topi mdx sono vulnerabili ad esercitare danni indotti e la loro funzione muscolare è compromessa rispetto a C57BL/10ScSnJ wild type topi. Questo deterioramento può essere valutata con una serie di test funzionali. Alcuni di questi test sono invasivi e non interferiscono con la patologia muscolare (ad es forelimb forza di presa, prove appesi e rotarod esecuzione). Pertanto possono essere utilizzati per monitorare la storia naturale della malattia o determinare gli effetti dei composti sulla progressione della malattia. Per ottenere una immagine in profondità l&#39;influenza dei composti sulla funzione muscolare nel topo mdx, un regime test funzionale che non interferisce con la progressione della malattia consiste in tutti questi test può essere utilizzato 10. In alternativa, costretto treadmill in esecuzione può essere usato per esacerbare intenzionalmente la progressione della malattia e testare le capacità protettive di composti 11. Il tapis roulant può anche essereutilizzato come misura di esito in cui tempo di funzionamento fino ad esaurimento viene misurata 12, o come strumento per fatica topi mdx modo che essi svolgono meno bene in un test funzionale successiva garantire grandi differenze di prestazioni tra i gruppi di trattamento 13. Quando si sceglie test funzionali, il loro effetto sulla progressione della malattia deve essere tenuto presente soprattutto quando il test topi distrofici come il topo mdx 14. Siamo qui descriviamo in dettaglio come eseguire i test funzionali più comunemente utilizzati in modo affidabile e riproducibile sulla base disponibili procedure operative standard della rete TREAT-NMD. <a href="http://www.treat-nmd.eu/resources/research-resources/dmd-sops/" target="_blank">Clicca qui per visitare TREAT-NMD</a> .

<table><tbody><tr><td>Mouse grip strength meter</td><td>Chatillon DFE (resold by Columbus Instruments)</td><td># 80529</td><td></td></tr><tr><td>Hanging wire 2 limbs device</td><td>Cloth hanger or custom made device</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Hanging wire 4 limbs device</td><td>Lid of rat cage or custom made device</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Rotarod</td><td>Ugo Basil</td><td># 47600</td><td></td></tr><tr><td>Treadmill for mice Exer 3/6</td><td>Columbus Instruments</td><td># 1055SRM</td><td></td></tr></tbody></table>

assessing functional performance in the mdx mouse model

Distrofia muscolare di Duchenne (DMD) è un muscolo grave e progressivo deperimento disturbo per il quale nessuna cura disponibile. Tuttavia, diversi potenziali composti farmaceutici e approcci di terapia genica hanno progredito nei test clinici. Con il miglioramento della funzione muscolare è il punto finale più importante in questi studi, molta enfasi è stata posta sulla creazione di affidabile, riproducibile, e facile da eseguire test funzionali di controllare la validità clinicamente valutare la funzione muscolare, la forza, la condizione e il coordinamento nel mdx modello murino di DMD. Entrambi i test invasivi e non invasivi sono disponibili. I test che non esacerbare la malattia possono essere utilizzati per determinare la storia naturale della malattia e gli effetti degli interventi terapeutici (ad es. Prova la forza di presa degli arti anteriori, due differenti prove sospese utilizzando sia un filo o una griglia e rotarod esecuzione). In alternativa, costretto treadmill in esecuzione può essere utilizzato per migliorare la progressione della malattia e / o valutareeffetti protettivi di interventi terapeutici sulla patologia della malattia. Siamo qui descritto come eseguire questi test funzionali più comunemente utilizzati in modo affidabile e riproducibile. L&#39;utilizzo di questi protocolli basati su procedure operative standard permette il confronto dei dati tra diversi laboratori.

La forza di presa zampa anteriore di tipo selvatico e topi mdx aumenta di età compresa tra 4-12 settimane e riduce di nuovo nei topi anziani. Le svalutazioni in vigore possono già essere osservati in giovani topi mdx. Dati rappresentativi di nove settimane vecchie topi femmina sono mostrati nelle Figure 1A e 1 B. Anche se la stanchezza non differisce tra i ceppi ancora a questa età, i topi mdx sono più deboli di topi wild type. Non abbiamo ancora i dati su...

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Assessing Functional Performance in the Mdx Mouse Model

L&#39;outcome primario negli studi clinici per le malattie neuromuscolari è generalmente migliorata la funzione muscolare. Pertanto, valutando l&#39;effetto di potenziali composti terapeutici sulla performance muscolare pre clinicamente in modelli murini è di grande importanza. Siamo qui descriviamo diversi test funzionali per affrontare questo.

Valutare prestazioni funzionali nel<em&gt; Mdx</em&gt; Mouse Model

Duchenne muscular dystrophy (DMD) is a severe and progressive muscle wasting disorder for which no cure is available. Nevertheless, several potential ...

assessing-functional-performance-in-the-mdx-mouse-model

Research

JoVE Journal

Behavior

Assessing Functional Performance in the Mdx Mouse Model

32.2K Views.  Leiden University Medical Center.  L'outcome primario negli studi clinici per le malattie neuromuscolari è generalmente migliorata la funzione muscolare. Pertanto, valutando l'effetto di potenziali composti terapeutici sulla performance muscolare pre clinicamente in modelli murini è di grande importanza. Siamo qui descriviamo diversi test funzionali per affrontare questo. 

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Assessment of Sensorimotor Function in Mouse Models of Parkinson's Disease

Sensitive and reliable behavioral outcome measures are essential to the evaluation of potential therapeutic treatments in preclinical trials for many neurodegenerative diseases. In Parkinson's disease, sensorimotor tests sensitive to varying degrees of nigrostriatal dysfunction are fundamental for testing the efficacy of potential therapeutics. Reliable and quite elegant sensorimotor measures exist for rats, however many of these tests measure sensorimotor asymmetry within the rat and are not entirely suitable for the newer genetic mouse models of PD. We have put together a battery of sensorimotor tests inspired by the sensitive tests in rats and adapted for mice. The test battery highlighted in this study is chosen for a) its sensitivity in a wide variety of mouse models of PD, b) its ease in implementing into a study, and c) its low expense. These tests have proven useful in characterizing novel genetic mouse models of PD as well as in testing potential disease-modifying therapies.

In Parkinson's disease and movement disorders in general, sensitive and reliable behavioral assays are essential for testing novel potential therapeutics. Here, we describe a manageable battery of sensorimotor tests for mice that are sensitive to varying degrees of injury to the nigrostriatal system and useful for preclinical studies.

Valutazione della Sensorimotor funzione in modelli murini di malattia di Parkinson

Sensitive and  reliable behavioral outcome measures are essential to the evaluation of  potential therapeutic treatments in preclinical trials for many  ...

Ricerca

Comportamento

Measuring the Strength of Mice

Kondziela7 devised the inverted screen test and published it in 1964. It is a test of muscle strength using all four limbs. Most normal mice easily score maximum on this task; it is a quick but insensitive gross screen, and the weights test described in this article will provide a finer measure of muscular strength.
There are also several strain gauge-based pieces of apparatus available commercially that will provide more graded data than the inverted screen test, but their cost may put them beyond the reach of many laboratories which do not specialize in strength testing. Hence in 2000 a cheap and simple apparatus was devised by the author. It consists of a series of chain links of increasing length, attached to a "fur collector" a ball of fine wire mesh sold for preventing limescale build up in hard water areas. An accidental observation revealed that mice could grip these very tightly, so they proved ideal as a grip point for a weight-lifting apparatus. A common fault with commercial strength meters is that the bar or other grip feature is not thin enough for mice to exert a maximum grip. As a general rule, the thinner the wire or bar, the better a mouse can grip with its small claws.
This is a pure test of strength, although as for any test motivational factors could potentially play a role. The use of scale collectors, however, seems to minimize motivational problems as the motivation appears to be very high for most normal young adult mice.

Deficits in muscular strength occur in many clinical conditions such as motor neuron disease. The inverted screen and weight lifting tests described here measure strength in mice almost exclusively, with minimal influence of factors such as coordination.

Misurare la forza della Mice

Kondziela7 devised the inverted screen test and published it in 1964. It is a test of muscle strength using all four limbs. Most normal mice easily score ...

Medicina

Behavioral and Locomotor Measurements Using an Open Field Activity Monitoring System for Skeletal Muscle Diseases

The open field activity monitoring system comprehensively assesses locomotor and behavioral activity levels of mice. It is a useful tool for assessing locomotive impairment in animal models of neuromuscular disease and efficacy of therapeutic drugs that may improve locomotion and/or muscle function. The open field activity measurement provides a different measure than muscle strength, which is commonly assessed by grip strength measurements. It can also show how drugs may affect other body systems as well when used with additional outcome measures. In addition, measures such as total distance traveled mirror the 6 min walk test, a clinical trial outcome measure. However, open field activity monitoring is also associated with significant challenges: Open field activity measurements vary according to animal strain, age, sex, and circadian rhythm. In addition, room temperature, humidity, lighting, noise, and even odor can affect assessment outcomes. Overall, this manuscript provides a well-tested and standardized open field activity SOP for preclinical trials in animal models of neuromuscular diseases. We provide a discussion of important considerations, typical results, data analysis, and detail the strengths and weaknesses of open field testing. In addition, we provide recommendations for optimal study design when using open field activity in a preclinical trial.

Open field activity levels are used to assess locomotive and behavioral activity levels. This protocol provides a well-designed, standardized protocol to use in preclinical trials for neuromuscular disorders.

Misure comportamentali e locomotore Utilizzo di un campo aperto Sistema di Monitoraggio Attività per le Malattie muscolo scheletrico

The open field activity monitoring system comprehensively assesses locomotor and behavioral activity levels of mice. It is a useful tool for assessing ...

Morris Water Maze Test: Optimization for Mouse Strain and Testing Environment

The Morris water maze (MWM) is a commonly used task to assess hippocampal-dependent spatial learning and memory in transgenic mouse models of disease, including neurocognitive disorders such as Alzheimer&#8217;s disease. However, the background strain of the mouse model used can have a substantial effect on the observed behavioral phenotype, with some strains exhibiting superior learning ability relative to others. To ensure differences between transgene negative and transgene positive mice can be detected, identification of a training procedure sensitive to the background strain is essential. Failure to tailor the MWM protocol to the background strain of the mouse model may lead to under- or over- training, thereby masking group differences in probe trials. Here, a MWM protocol tailored for use with the F1 FVB/N x 129S6 background is described. This is a frequently used background strain to study the age-dependent effects of mutant P301L tau (rTg(TauP301L)4510 mice) on the memory deficits associated with Alzheimer&#8217;s disease. Also described is a strategy to re-optimize, as dictated by the particular testing environment utilized.

This manuscript describes a Morris water maze (MWM) protocol tailored for use with a commonly used mouse model of Alzheimer's disease. The MWM is widely used in transgenic mouse models. Implementation of a procedure sensitive to the background strain of the mouse model is essential for detecting group differences.

Morris water maze Test: Ottimizzazione per ceppo di topi e Ambiente di prova

 The Morris water maze (MWM) is a commonly used task to assess hippocampal-dependent spatial learning and memory in transgenic mouse models of disease, ...

Measuring Motor Coordination in Mice

Mice are increasingly being used in behavioral neuroscience, largely replacing rats as the behaviorist's animal of choice. Before aspects of behavior such as emotionality or cognition can be assessed, however, it is vital to determine whether the motor capabilities of e.g. a mutant or lesioned mouse allow such an assessment. Performance on a maze task requiring strength and coordination, such as the Morris water maze, might well be impaired in a mouse by motor, rather than cognitive, impairments, so it is essential to selectively dissect the latter from the former. For example, sensorimotor impairments caused by NMDA antagonists have been shown to impair water maze performance2. 
Motor coordination has traditionally been assessed in mice and rats by the rotarod test, in which the animal is placed on a horizontal rod that rotates about its long axis; the animal must walk forwards to remain upright and not fall off. Both set speed and accelerating versions of the rotarod are available.
The other three tests described in this article (horizontal bar, static rods and parallel bars) all measure coordination on static apparatus. The horizontal bar also requires strength for adequate performance, particularly of the forelimbs as the mouse initially grips the bar just with the front paws. 
Adult rats do not perform well on tests such as the static rods and parallel bars (personal observations); they appear less well coordinated than mice. I have only tested male rats, however, and male mice seem generally less well coordinated than females. Mice appear to have a higher strength:weight ratio than rats; the Latin name, Mus musculus, seems entirely appropriate. The rotarod, the variations of the foot fault test12 or the Catwalk (Noldus)15 apparatus are generally used to assess motor coordination in rats.

Protocols are presented for two established motor coordination tasks, the accelerating rotarod and horizontal bar, also two tests developed in Oxford recently, the static rods and parallel bars. These tests can detect motor impairments potentially of interest in their own right, as well as being possible variables in tests of other areas of behavior.

Misurare Coordinamento motore in Mouse

Mice are increasingly being used in behavioral neuroscience, largely replacing rats as the behaviorist's animal of choice. Before aspects of behavior such ...

Neuroscienze

T-maze Forced Alternation and Left-right Discrimination Tasks for Assessing Working and Reference Memory in Mice

Forced alternation and left-right discrimination tasks using the T-maze have been widely used to assess working and reference memory, respectively, in rodents. In our laboratory, we evaluated the two types of memory in more than 30 strains of genetically engineered mice using the automated version of this apparatus. Here, we present the modified T-maze apparatus operated by a computer with a video-tracking system and our protocols in a movie format. The T-maze apparatus consists of runways partitioned off by sliding doors that can automatically open downward, each with a start box, a T-shaped alley, two boxes with automatic pellet dispensers at one side of the box, and two L-shaped alleys. Each L-shaped alley is connected to the start box so that mice can return to the start box, which excludes the effects of experimenter handling on mouse behavior. This apparatus also has an advantage that in vivo microdialysis, in vivo electrophysiology, and optogenetics techniques can be performed during T-maze performance because the doors are designed to go down into the floor. In this movie article, we describe T-maze tasks using the automated apparatus and the T-maze performance of &alpha;-CaMKII+/- mice, which are reported to show working memory deficits in the eight-arm radial maze task. Our data indicated that &alpha;-CaMKII+/- mice showed a working memory deficit, but no impairment of reference memory, and are consistent with previous findings using the eight-arm radial maze task, which supports the validity of our protocol. In addition, our data indicate that mutants tended to exhibit reversal learning deficits, suggesting that &alpha;-CaMKII deficiency causes reduced behavioral flexibility. Thus, the T-maze test using the modified automatic apparatus is useful for assessing working and reference memory and behavioral flexibility in mice.

This article presents the protocol of T-maze tests using a modified automated apparatus for assessing the learning and memory functions in mice.

T-labirinto alternanza forzata e sinistra-destra Attività discriminazione per la Valutazione di lavoro e la memoria di riferimento nel Mice

Forced alternation and left-right discrimination tasks using the T-maze have been widely used to assess working and reference memory, respectively, in ...

A Simple and Low-cost Assay for Measuring Ambulation in Mouse Models of Muscular Dystrophy

Measuring functional outcomes in the treatment of muscular dystrophy is an essential aspect of preclinical testing. The assessment of voluntary ambulation in mouse models is a non-invasive and reproducible activity assay that is directly analogous to measures of patient ambulation such as the 6-minute walk test and related mobility scores. Many common methods for testing mouse ambulation speed and distance are based on the open field test, where an animal&#39;s free movement within an arena is measured over time. One major downside to this approach is that commercial software and equipment for high-resolution motion tracking is expensive and may require transferring mice to specialized facilities for testing. Here, we describe a low-cost, video-based system for measuring mouse ambulation that utilizes free and open-source software. Using this protocol, we demonstrate that voluntary ambulation in the dystrophin-null mdx mouse model for Duchenne muscular dystrophy (DMD) is decreased relative to wild-type mouse activity. In mdx mice expressing the utrophin transgene, these activity deficits are not observed and the total distance traveled is indistinguishable from wild-type mice. This method is effective for measuring changes in voluntary ambulation associated with dystrophic pathology, and provides a versatile platform that can be readily adapted to diverse research settings.

This protocol describes a flexible, low-cost system for measuring mouse ambulation in an open field activity assay. We show that a 6-minute ambulation assay based on this system detects a decrease in voluntary movement in mdx mice, and accurately distinguishes improvement in a muscle-specific rescue of these animals.

Un'analisi semplice e a basso costo per la misurazione della deambulazione in modelli murini di distrofia muscolare

Measuring functional outcomes in the treatment of muscular dystrophy is an essential aspect of preclinical testing. The assessment of voluntary ambulation ...

<meta charset="utf8"></head><body>Saggi comportamentali per il disturbo dello spettro autistico in modelli murini

Strategies for Assessing Autistic-Like Behaviors in Mice

Autism spectrum disorder (ASD) is a neurobiologically complex condition with a heterogeneous genetic etiology. Clinically, ASD is diagnosed by social communication impairments and restrictive or repetitive behaviors, such as hand flapping or lining up objects. These behavioral patterns can be reliably observed in mouse models with ASD-linked genetic mutations, making them highly useful tools for studying the underlying cellular and molecular mechanisms in ASD. Understanding how genetic changes affect the neurobiology and behaviors observed in ASD will facilitate the development of novel targeted therapeutic compounds to ameliorate core behavioral impairments. Our lab has employed several protocols encompassing well-described training and testing procedures that reflect a wide range of behavioral deficits related to ASD. Here, we detail two assays to study the core features of ASD in mouse models: self-grooming (a measure of repetitive behavior) and the three-chamber social interaction test (a measure of social interaction approach and preference for social novelty).

<meta charset="utf8"></head><body>Strategie per valutare i comportamenti simil-autistici nei topi

Rodent models are valuable tools for studying core behaviors related to autism spectrum disorder (ASD). In this article, we expound on two behavioral tests for modeling the core features of ASD in mice: self-grooming, which assesses repetitive behavior, and the three-chamber social interaction test, which documents social impairments.

Strategie per valutare i comportamenti simil-autistici nei topi

Autism spectrum disorder (ASD) is a neurobiologically complex condition with a heterogeneous genetic etiology. Clinically, ASD is diagnosed by social ...

Valutare prestazioni funzionali nel

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Valutazione della Sensorimotor funzione in modelli murini di malattia di Parkinson

Misurare la forza della Mice

Misure comportamentali e locomotore Utilizzo di un campo aperto Sistema di Monitoraggio Attività per le Malattie muscolo scheletrico

Morris water maze Test: Ottimizzazione per ceppo di topi e Ambiente di prova

Misurare Coordinamento motore in Mouse

T-labirinto alternanza forzata e sinistra-destra Attività discriminazione per la Valutazione di lavoro e la memoria di riferimento nel Mice

Un'analisi semplice e a basso costo per la misurazione della deambulazione in modelli murini di distrofia muscolare

Strategie per valutare i comportamenti simil-autistici nei topi

Strategie per valutare i comportamenti simil-autistici nei topi

Strategie per valutare i comportamenti simil-autistici nei topi