Il significato di questo protocollo rispetto ai precedenti metodi di campionamento della prostata è che ci dà una maggiore fiducia nel prendere di mira il tessuto tumorale fresco per la ricerca. Pertanto, possiamo portare il tessuto fresco direttamente in laboratorio e usarlo per la coltura o l'imaging perché abbiamo un'alta fiducia di quali campioni sono tumorali e quali sono benigni. Il mio consiglio chiave quando imparo la tecnica è lavorare con il tuo patologo locale in modo che la diagnosi e il rapporto finale dei tessuti non siano compromessi.
Per indirizzare la posizione tumorale, rivedere le immagini della risonanza prima per misurare la posizione sopra il tumore e trovare la sequenza in cui il tumore è più visibile nel piano assiale. Scorri le immagini assiali per identificare l'immagine in cui il tumore è il più grande e stampa l'immagine come riferimento. Nell'immagine coronale corrispondente, misurare la distanza dalla base della prostata alla posizione assiale selezionata e misurare l'intera lunghezza della prostata dall'apice alla base in millimetri.
Quindi stampare queste misurazioni e contrassegnare le posizioni del tumore come riferimento. Dopo aver raccolto il campione, sterilizzare la cappa di flusso laminare e l'apparato di affettamento della prostata con il 70% di etanolo e pesare la prostata su una scala standard in grammi. Quindi dipingere il lato destro con inchiostro blu e il lato sinistro del campione con inchiostro nero che copre l'intera capsula e vescicole seminali con inchiostro per consentire la discriminazione dei margini chirurgici.
Per tagliare la prostata, posizionare il tessuto con la base e l'apice rivolti verso le pareti opposte dell'apparato con il lato posteriore verso il basso e il lato anteriore verso l'alto. Posizionare i perni d'oro attorno al campione di tessuto spingendo leggermente la prostata verso l'interno, se necessario, per ottenere una vestibilità aderente e misurare la lunghezza della prostata dalla base all'apice per confrontare questa misurazione con la lunghezza della prostata misurata dalla risonanza prima. Se la prostata si è ridotta, regolare la posizione di affezione prevista della percentuale appropriata della riduzione.
Quindi, misurare dalla base alla fetta trasversale desiderata e selezionare il perno più vicino a questa misurazione da tagliare. Indossare guanti a catena per prevenire lesioni, posizionare le lame del dispositivo di affettare su entrambi i lati del perno identificato e utilizzare il distanziale per tenere le lame distanti cinque millimetri. Per acquisire la fetta, utilizzare tratti lunghi per spostare lentamente ma saldamente le lame verso il basso, in avanti e all'indietro confermando che una fetta completa è stata separata prima di smontare l'apparato.
Quindi rimuovere le pareti e i perni e utilizzare i guanti per trasferire con cura la fetta su un pezzo sterile di sughero. Dopo aver acquisito il campione, ispezionare visivamente la fetta trasversale per il confronto con l'immagine della risonanza prima assiale. In alcuni casi, l'area tumorale può apparire più pallia del tessuto circostante.
Palpare delicatamente la fetta trasversale. Il tumore può sembrare più sodo del tessuto circostante. Utilizzando l'immagine della risonanza prima assiale come guida, selezionare una o più aree per il campionamento e utilizzare un punzone di sei millimetri per spingere verso il basso sull'area tissutale di interesse.
Ruotare il punzone tissutale sul posto e scendere contro il tappo per garantire una separazione completa utilizzando un bisturi affilato per separare il campione di biopsia dal campione, se necessario. Una volta acquisito il campione, rimuovere il punzone e utilizzare lo stantuffo per espellere il campione nel contenitore appropriato per la successiva analisi a valle. Quindi inchiodare i fori in cui i punzoni sono stati presi in rosso e notare la posizione di ogni pugno insieme al peso della prostata e qualsiasi osservazione sul colore e la compattezza del tessuto.
Aggiungere la capsula prostatica al sughero per evitare la sentina durante la fissazione. Immergere la prostata e il sughero in fissivo assicurando che il campione sia completamente sommerso. In questa analisi rappresentativa, dei primi 92 casi campionati come dimostrato, il 64% dei campioni conteneva almeno il 40% di tumore e sono stati sottoposti al Progetto 100.000 Genomi senza microdisezione.
Il DNA è stato estratto ed era di resa e qualità sufficienti in tutti i casi ed è stato pubblicato un sottoinsieme iniziale di 59 di questi campioni per il confronto con un precedente metodo di campionamento del campione. Seguendo questa procedura, i campioni di tumore fresco possono essere utilizzati per l'imaging dal vivo o la cultura permettendoci di testare nuovi biomarcatori, farmaci e saperne di più sulla biologia dei tumori. Ora che usiamo questo metodo di routine, sono stato in grado di portare avanti un progetto usando questo tessuto per la coltura ex vivo per esaminare nuove combinazioni di terapie precliniche per il cancro alla prostata.
