La diffusione dinamica della luce, o DLS, è un metodo fondamentale per valutare la dimensione e la distribuzione delle particelle intatte. Tuttavia, l'analisi delle nanoparticelle di carboidrati di ferro pone alcune sfide. Un vantaggio del DLS include un'ampia strumentazione disponibile, facile da eseguire l'analisi e stabilire protocolli per l'analisi dei nanomateriali.
Uno degli obiettivi del DLS è quello di valutare il profilo di polidispersione delle nanoparticelle, che può in definitiva influenzare l'interazione con l'ambiente biologico. Per la dimostrazione della procedura, sarà Cintia Batista Marques, dottoranda dell'Università di Ginevra. Dopo aver avviato la macchina nel software dello strumento, selezionare la posizione di memorizzazione nella finestra aperta, assegnare un nome al file di misurazione e confermare i dettagli facendo clic su Salva.
Selezionare la procedura operativa standard richiesta dall'elenco a discesa nell'interfaccia dello strumento. Se è necessaria una SOP precedente, selezionare Cerca SOP dall'elenco e confermare la selezione facendo clic sulla freccia verde. Per iniziare il processo di misurazione, fare clic sul pulsante verde di avvio nella parte inferiore della schermata dell'interfaccia dello strumento.
Quindi, riempire un millilitro dello standard di particelle non diluite in una cuvetta di polistirolo e chiuderlo con il coperchio. Una volta riempito, assicurarsi che non ci siano bolle d'aria. Se sono presenti bolle d'aria, rimuoverle picchiettando leggermente sulla cuvetta.
Posizionare la cuvetta nel supporto della cella dello strumento con il segno della freccia rivolto in avanti e chiudere il coperchio della camera di misura. Caricare il parametro SOP dell'unità e immettere il nome del campione SST 20 nanometer particle standard nella finestra iniziale. Inoltre, aggiungere una nota che includa un numero identificativo e la data di scadenza dello standard.
Per misurare la soluzione di saccarosio di ferro, pipettare 0,5 millilitri di una soluzione di saccarosio di ferro con contenuto di ferro al 2% in massa in volume in un matraccio tarato da 25 millilitri e riempire fino al segno con acqua a basso contenuto di particelle, ottenendo una soluzione contenente 0,4 milligrammi di ferro per millilitro. Ora posizionare la cuvetta di plastica contenente la soluzione di misurazione nel dispositivo con il segno di freccia rivolto in avanti e chiudere il coperchio. Caricare nuovamente la SOP dei parametri e immettere il numero di batch del nome del campione nella finestra iniziale.
Avviare la misurazione e al termine, indicata da un segnale acustico, chiudere la finestra di misurazione. Calcola il valore medio di sei singole misurazioni. Contrassegnare le singole misurazioni nella visualizzazione dei record del file di misurazione e fare clic con il pulsante destro del mouse su Crea risultato medio.
Aggiungere il nome del valore medio in Nome campione. Quindi confermare facendo clic su OK. Attendi che il software crei un nuovo record alla fine dell'elenco e cerca un nome inserito e il risultato medio in quel record.
Vengono visualizzati i grafici di distribuzione delle dimensioni per intensità, volume e numero. La distribuzione delle dimensioni per intensità influenzata da un secondo picco è fornita come esempio di un risultato negativo. Dati di scarsa qualità hanno mostrato un segnale aggiuntivo a 5.000 nanometri.
La distribuzione dimensionale per numero differiva fino a un fattore due dalla media Z basata sull'intensità proposta. Solo valori leggermente inferiori sono stati calcolati dalla distribuzione dimensionale per volume. Quando si utilizza DLS per caratterizzare le nanoparticelle di carboidrati di ferro, è importante garantire la corretta SOP, la diluizione del campione e anche il riempimento della cuvetta.
Il frazionamento asimmetrico del flusso del campo di flusso e la cromatografia di esclusione dimensionale e la diffusione a raggi X a piccolo angolo possono essere eseguiti come metodi fisico-chimici ortogonali aggiuntivi. I protocolli validati per DLS migliorano notevolmente la robustezza della caratterizzazione iniziale e comparativa delle nanoparticelle di carboidrati di ferro. Tuttavia, la preparazione del campione e la propensione della tecnica verso grandi dimensioni delle particelle devono essere considerate nel contesto delle metodologie ortogonali.
