ヘッドスペースガスクロマトグラフィー-タンデム四重極質量分析法による動物由来医薬品におけるトリメチルアミン検出の改良技術

要約

ここでは、動物由来の医薬品中のトリメチルアミン(TMA)の測定に適したヘッドスペースガスクロマトグラフィー-タンデム四重極質量分析(HS-GC-MS/MS)法について説明します。プロトコルには、サンプルの前処理、ヘッドスペース処理、分析条件、方法論的検証、および動物由来医薬品中のTMAの測定が含まれます。

要約

動物由来医薬品は、独特の特徴と顕著な治療効果を有するが、それらのほとんどは明らかな生臭さを有し、その結果、臨床患者のコンプライアンスが悪くなる。トリメチルアミン(TMA)は、動物由来の薬における重要な魚臭成分の1つです。既存の検出方法では、灰汁添加後の急速な酸塩基反応によるヘッドスペースバイアル内の圧力上昇により、TMAがヘッドスペースバイアルから逃げ出し、動物由来医薬品の生臭さの研究が停滞するため、TMAを正確に同定することは困難である。本研究では,酸と灰汁の分離層としてパラフィン層を導入した制御検出法を提案した.TMAの生成速度は、恒温炉加熱によってパラフィン層をゆっくりと液化することによって効果的に制御することができた。この方法は、良好な直線性、精密な実験、および良好な再現性と高感度の回収率を示しました。動物由来医薬品の消臭に関する技術支援を行いました。

概要

動物部位由来の製品やその副産物(ここでは動物由来医薬品と呼びます)を利用したヒト疾患の治療がますます注目されています。それらは、癌、心血管疾患、肝硬変、乳房炎、およびその他の疾患の治療において重要な役割を果たし、強力な効果、少量の投与量、および重要かつ特異的な臨床効果の利点を備えています。しかし、動物由来の医薬品は一般に生臭さが顕著であり、これは患者のコンプライアンスに大きく影響し、特に子供にとって不利です^1,2。生臭は、主に医薬品に含まれるタンパク質、アミノ酸、脂肪などの物質に由来し、脂肪酸の酸化やアミノ酸の分解などによって分解され、魚臭のあるさまざまな物質が生成されます^2,3,4。その中でもトリメチルアミン(TMA)は、腐った動物由来食品や腐った動物由来食品に広く存在する生臭みのある揮発性ガスです⁵。

これまで、ガスクロマトグラフィー(GC)、液体クロマトグラフィー(LC)、イオンクロマトグラフィー、分光光度法、液体クロマトグラフィー-質量分析(LC-MS)、およびセンサー法は、環境、食品、および尿中のTMAを検出するために....

プロトコル

フェレティマ、ペリプラネタアメリカーナ、ヒルドの医薬品については表1を参照してください。それらは、成都中医薬大学のXu Runchun教授によって、フェレティマアスペルギルム(E.ペリエ)、ペリプラネタアメリカーナL.、ホイットマニアピグラホイットマンの乾燥体として特定されました。

1. 検体抽出

1. フェレティマ、ペリプラネタアメリカーナ、ヒルドをハーブグラインダー(材料表を参照)で粉砕し、薬用粉末を2番(ふるい開口部:0.8 mm)および4番(ふるい開口部:0.25 mm)の標準薬剤ふるいにかけ、2つのふるいの間に粉末を集めて必要なサンプル粉末を取得します。
   注: フェレティマ は粉砕後にふわふわしているので、その粉末をふるいにかける必要はありません。
2. 50 mLのプラスチック遠沈管に1 gの粉末(0.001 gまで正確)を取り、20 mLの5%トリクロロ酢酸(TCA)溶液( 材料表を参照)を加え、高速分散ホモジナイザーで1,000 rmin-1で¹ 分間ホモジナイズします。
3. ホ....

ディスカッション

動物由来の医薬品は、動物の全身、臓器または組織、生理学的または病理学的産物、排泄物または分泌物、および加工製品から得られます。TMAは、動物由来の医薬品に含まれる魚臭の重要な原因です。これは、嗅覚閾値が非常に低く(0.000032 × ^10-6 V / V)、強い魚臭¹³を持つ典型的な悪臭物質です。現在、一般的に使用されているHS-GC-MS法では、動物由来医薬品中のTMAを?.......

資料

Name	Company	Catalog Number	Comments
Centrifuge	Beckman Coulter Trading (China) Co.	SSC-2-0213
Chinese herbal medicine grinder	Zhejiang Yongkang Xi'an Hardware and Pharmaceutical Factory	HX-200K
Convection oven	Sanyo Electric Co., Ltd	MOV-112F
Decapper for 20 mm Aluminum caps	ANPEL Laboratory Technologies (Shanghai) Inc	V1750004
Electronic balance	Shimadzu Corporation Japan	AUW220D
Gas chromatography mass spectrometry	Shimadzu Corporation Japan	TQ-8050 NX
Headspace Vial	ANPEL Laboratory Technologies (Shanghai) Inc	25760200
Homogenizer	Shanghai biaomo Factory	FJ200-SH
Preassembled Cap	ANPEL Laboratory Technologies (Shanghai) Inc	L4150050
Sample sieve	Zhenxing Sieve Factory	/
SH-Volatile Amine	Chengdu Meimelte Technology Co., Ltd	227-3626-01
Sodium hydroxide	Chengdu Chron Chemicals Co., Ltd	2022101401
Solid paraffin wax	Shanghai Hualing Kangfu apparatus factory	20221112
Trichloroacetic acid	Chengdu Chron Chemicals Co., Ltd	2022102001
Trimethylamine hydrochloride	Chengdu Aifa Biotechnology Co., Ltd	AF22022108
Ultra-pure water system	Sichuan Youpu Ultrapure Technology Co., Ltd	UPR-11-5T