Headspace Gaz Kromatografisi-Tandem Dört Kutuplu Kütle Spektrometrisi ile Hayvan Kaynaklı Tıpta Trimetilamin Tayini için Geliştirilmiş Bir Teknik

Özet

Burada, hayvansal kaynaklı ilaçlarda trimetilamin (TMA) tayini için uygun bir headspace gaz kromatografisi-tandem dört kutuplu kütle spektrometrisi (HS-GC-MS/MS) yöntemi açıklanmaktadır. Protokol, numune ön işlemini, üst boşluk tedavisini, analiz koşullarını, metodolojik doğrulamayı ve hayvansal kaynaklı ilaçlarda TMA'nın belirlenmesini içerir.

Özet

Hayvansal kaynaklı ilaçların ayırt edici özellikleri ve önemli iyileştirici etkileri vardır, ancak çoğunun belirgin bir balık kokusu vardır ve bu da klinik hastaların zayıf uyumuna neden olur. Trimetilamin (TMA), hayvansal kaynaklı tıptaki en önemli balık kokusu bileşenlerinden biridir. Kostik ilavesinden sonra hızlı asit-baz reaksiyonunun neden olduğu üst boşluk şişesindeki artan basınç nedeniyle mevcut tespit yöntemini kullanarak TMA'yı doğru bir şekilde tanımlamak zordur, bu da TMA'nın üst boşluk şişesinden kaçmasına neden olur ve hayvansal kaynaklı ilaçların balık kokusunun araştırma ilerlemesini durdurur. Bu çalışmada, asit ve kostik arasında bir izolasyon tabakası olarak bir parafin tabakası ekleyen kontrollü bir tespit yöntemi önerdik. TMA üretim hızı, parafin tabakasının termostatik fırın ısıtması yoluyla yavaşça sıvılaştırılmasıyla etkin bir şekilde kontrol edilebilir. Bu yöntem, iyi tekrarlanabilirlik ve yüksek hassasiyet ile tatmin edici doğrusallık, hassas deneyler ve geri kazanımlar gösterdi. Hayvansal kaynaklı ilaçların koku giderme konusunda teknik destek sağladı.

Giriş

Hayvan parçalarından ve/veya bunların yan ürünlerinden (burada hayvansal kaynaklı ilaçlar olarak anılacaktır) elde edilen ürünleri kullanarak insan hastalıklarının tedavisi giderek daha fazla ilgi görmektedir. Kanser, kardiyovasküler hastalık, karaciğer sirozu, mastitis ve diğer hastalıkların tedavisinde güçlü bir etki, küçük dozaj ve önemli ve spesifik klinik etkinlik avantajları ile önemli bir rol oynarlar. Bununla birlikte, hayvansal kaynaklı ilaçlar genellikle belirgin bir balık kokusuna sahiptir, bu da hastaların uyumunu büyük ölçüde etkiler ve özellikle çocuklar için elverişsizdir ^1,2. Balık kokusu esas ....

Protokol

Pheretima, Periplaneta americana ve Hirudo'nun tıbbi malzemeleri hakkında bilgi için Tablo 1'e bakınız. Chengdu Geleneksel Çin Tıbbı Üniversitesi'nden Prof. Xu Runchun tarafından Pheretima aspergillum (E.Perrier), Periplaneta americana L. ve Whitmania pigra Whitman'ın kurutulmuş bedenleri olarak tanımlandılar.

1. Numune ekstraksiyonu

1. Pheretima, Periplaneta americana ve Hirudo'yu bitkisel bir öğütücü ile ezin (Malzeme Tablosuna bakınız), tıbbi tozu No. 2 (elek açıklığı: 0.8 mm) ve No. 4 (elek açıklığı:....

Tartışmalar

Hayvansal kaynaklı ilaçlar tüm vücuttan, organ veya dokulardan, fizyolojik veya patolojik ürünlerden, dışkılardan veya salgılardan ve hayvanların işlenmiş ürünlerinden gelir. TMA, hayvansal kaynaklı ilaçlarda önemli bir balık kokusu kaynağıdır; çok düşük koku alma eşiği (0.000032 × ^10-6 V/V) ve güçlü balık kokusu¹³ olan tipik bir kötü kokulu maddedir. Şu anda, yaygın olarak kullanılan HS-GC-MS yöntemi, hayvansal kaynaklı ilaçlarda TMA'yı stabil .......

Malzemeler

Name	Company	Catalog Number	Comments
Centrifuge	Beckman Coulter Trading (China) Co.	SSC-2-0213
Chinese herbal medicine grinder	Zhejiang Yongkang Xi'an Hardware and Pharmaceutical Factory	HX-200K
Convection oven	Sanyo Electric Co., Ltd	MOV-112F
Decapper for 20 mm Aluminum caps	ANPEL Laboratory Technologies (Shanghai) Inc	V1750004
Electronic balance	Shimadzu Corporation Japan	AUW220D
Gas chromatography mass spectrometry	Shimadzu Corporation Japan	TQ-8050 NX
Headspace Vial	ANPEL Laboratory Technologies (Shanghai) Inc	25760200
Homogenizer	Shanghai biaomo Factory	FJ200-SH
Preassembled Cap	ANPEL Laboratory Technologies (Shanghai) Inc	L4150050
Sample sieve	Zhenxing Sieve Factory	/
SH-Volatile Amine	Chengdu Meimelte Technology Co., Ltd	227-3626-01
Sodium hydroxide	Chengdu Chron Chemicals Co., Ltd	2022101401
Solid paraffin wax	Shanghai Hualing Kangfu apparatus factory	20221112
Trichloroacetic acid	Chengdu Chron Chemicals Co., Ltd	2022102001
Trimethylamine hydrochloride	Chengdu Aifa Biotechnology Co., Ltd	AF22022108
Ultra-pure water system	Sichuan Youpu Ultrapure Technology Co., Ltd	UPR-11-5T