マウスの鎖骨下静脈穿刺による血液採取

マウスの鎖骨下静脈穿刺による採血。マウスからの血液サンプル採取は、ほとんどの研究室で不可欠です。マウスにおける採血のための従来のアプローチは、100マイクロリットル未満のサンプルが必要な場合に、尾切断である。

しかし、非終末期の時点で100マイクロリットル以上の血液が必要な場合、レトロ眼窩下出血、下顎下出血、または心外の採血が最も一般的に考えられる技術である。いくつかの場所では、頸静脈切開またはカテーテル法が代替方法として採用された。それにもかかわらず、上記の方法はマウスに傷ついています。

正式な研究に基づいて、ここではマウスの鎖骨下静脈からの採血のための新しい経済的で穏やかな戦略を紹介します。安全性と実現可能性、およびこの技術で得られた血液量が提示され、議論される。全身麻酔後、仰向けの位置にマウスを横たえる。

75%エタノールで破砕空間を洗浄してください。穿刺前に鎖骨と上耳窩を確認します。鎖骨の真ん中に穿刺部位を特定します。

針を上方に移動し、鎖骨の後部に向かって上向きに動かします。3~4ミリメートル前方に移動した後、注射器に負圧を入れて、ゆっくりと針を引き戻します。血液は撤退の過程で注射器に排出されます。

採血後、穿刺部位を1~2分間柔らかく押して出血を止める。75%エタノール、粘着テープ、上着剤、チューブ、針で接続された1.0ミリリットルのシリンジ、電子スケール、ヘパリン、および生理食塩水を含む必要な材料を準備します。満足のいく全身麻酔の後、手術台の上にマウスを置き、テーブルの端から2〜4センチメートル離れて静脈穿刺を容易にします。

図 2 に示すように、手足を快適な位置に固定します。全手順で挿管や機械的換気は必要なかった。綿棒で破膜腔の周りに上膜剤を塗布する。

3分後、上流剤を湿った綿棒で洗い、毛皮と目に見える汚れを取り除きます。75%エタノールで破包領域を殺菌し、清潔なガーゼで乾燥させます。鎖骨の骨と上耳のフォッサエの位置を1本の指で特定します。

穿刺部位を見つけ、鎖骨の真ん中に近づき、その上に引っ掛かります。皮膚および皮下組織を固定するために穿刺部位に左人差し指を横に置く。頭蓋の上方に針を移動し、上の胞子窩に向かって置きます。

針が皮下組織に入ると、右手の薬指は後方に移動して陰圧を形成する必要があります。注射器を3~4ミリメートル進めるが、注射器に血液が流出しない場合は停止する。その後、ゆっくりとシリンジを引き戻し、その中に負圧を保ちます。

ほとんどの場合、血液は引き戻しの過程で注射器に入ります。血液が注射器に入ったら、注射器を固定し、注射器に採取された血液量が必要になるまで負圧を保ちます。採血後、穿刺針を引き出し、綿棒で穿刺部位を1~2分間わずかに押して出血を止め、マウスをケージに送り返します。

血液サンプルをヘパリンチューブに移します。我々は、10個のキミマウスでこの手順を繰り返した。9つの手順が右側で成功しました。

1つのケースは右側の3回の試みで失敗し、左側で採血に成功した。タイムコースの範囲は35~126秒でした。採血量は約200マイクロリットルに設定した。

採血は1~4回の試みで成功した。血液採取は2匹のマウスの最初の試みで成功し、1匹のマウスで4回の試みで、他のマウスでは2〜3回の試みで成功した。すべてのデータを表 1 に示します。

すべての動物は生き残り、血液サンプリング後30分以内に回復した。すべての観察されたパラメータの性別に有意差はなかった。結論として、鎖骨下静脈穿刺は、マウスの採血のための安全で効果的な方法である。

尾静脈切断およびレトロ眼窩神経叢採取に加えて、この方法は、マウスのいくつかの時点での観察研究に適しており、適当である。